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③大多數(shù)單倍體植株可作為進(jìn)行體細(xì)胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料。(P40)(3)為什么大多數(shù)單倍體植株可作為進(jìn)行體細(xì)胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料?大多數(shù)單倍體植株的細(xì)胞中只含一套染色體,染色體加倍后得到的植株的隱性性狀容易顯現(xiàn)。(P40)2.突變體的利用(1)過(guò)程:(2)誘變處理對(duì)象:一般為愈傷組織。(3)產(chǎn)生原因:在植物的組織培養(yǎng)過(guò)程中,易受培養(yǎng)條件和誘變因素(如射線、化學(xué)物質(zhì)等)的影響而產(chǎn)生突變。(P41)(4)原理:基因突變和植物細(xì)胞的全能性。(5)誘變育種的缺點(diǎn):突變具有不定向性和低頻性,因此需大量處理實(shí)驗(yàn)材料。(6)誘變育種的優(yōu)點(diǎn):通過(guò)人工誘變提高愈傷組織的突變率,從而篩選獲得抗病、抗鹽、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的新品種,加快育種進(jìn)程。(P41)(7)利用:篩選出對(duì)人們有用的突變體,進(jìn)而培育成新品種。(P41)(三)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)1.代謝產(chǎn)物的分類a.初生代謝產(chǎn)物:初生代謝是生物生長(zhǎng)和生存所必需的代謝活動(dòng);產(chǎn)物:糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸等(P41相關(guān)信息)b.次生代謝產(chǎn)物:植物代謝會(huì)產(chǎn)生一些一般認(rèn)為不是生物生長(zhǎng)所必需的,一般在特定組織或器官中,并在一定的環(huán)境和時(shí)間條件下才進(jìn)行。產(chǎn)物:一類小分子有機(jī)化合物(如酚類、萜類、含氮化合物等)(P41相關(guān)信息)2.細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)的目標(biāo)產(chǎn)物:次生代謝產(chǎn)物。(P41)3.次生代謝物作用:在植物抗病、抗蟲(chóng)等方面發(fā)揮作用,也是很多藥物、香料和色素等的重要來(lái)源。(P41)4.生產(chǎn)技術(shù)手段:植物組織培養(yǎng)技術(shù)(在離體條件下對(duì)單個(gè)植物細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù))。5.過(guò)程:6.細(xì)胞產(chǎn)物工廠化生產(chǎn)主要利用的是哪種結(jié)構(gòu)?愈傷組織。7.該過(guò)程中是否需要培養(yǎng)得到完整植株?一般不需要。8.優(yōu)點(diǎn):不占用耕地,幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制,對(duì)于社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、環(huán)境保護(hù)具有重要意義;生產(chǎn)速度快。(P41)9.實(shí)例:利用紫草細(xì)胞的組織培養(yǎng)生產(chǎn)的紫草寧具有抗菌、消炎和抗腫瘤等活性。利用紅豆杉細(xì)胞的組織培養(yǎng)生產(chǎn)的紫杉醇具有高抗癌活性。(P41)▉考點(diǎn)03動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程包括:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞核移植。(P43)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念:指從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。(P43)2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理:細(xì)胞增殖(有絲分裂)。3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的地位:動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。(P43)4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵操作:原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。(P45)(一)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:營(yíng)養(yǎng)條件、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境、適宜的溫度、pH和滲透壓、適宜的氣體環(huán)境。(P43)2.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要包括:糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等。(P43)3.未知營(yíng)養(yǎng)條件:使用合成培養(yǎng)基時(shí),通常需加入血清等一些天然成分。(P44)4.血清的作用:提供尚未全部研究清楚的細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(P44)5.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基的物理性質(zhì):培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞一般使用液體培養(yǎng)基,也稱為培養(yǎng)液。(P44)6.動(dòng)物細(xì)胞利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括蔗糖和淀粉嗎?不包括。7.保證無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境的具體措施(P44)(1)對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理。(2)在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作。(3)還需要定期更換培養(yǎng)液。8.培養(yǎng)液的滅菌方法:濕熱滅菌法(高壓蒸汽滅菌)。培養(yǎng)用具的滅菌方法:濕熱滅菌法(+烘干)或干熱滅菌法。9.怎樣保證無(wú)菌操作?對(duì)操作空間、操作者衣著和手進(jìn)行清潔和消毒,保證所有操作均在在超凈工作臺(tái)并在酒精燈火焰旁進(jìn)行。10.為什么培養(yǎng)液需要定期更換?(P44)以便清除代謝物,防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。11.如何防止培養(yǎng)過(guò)程中的微生物污染?在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。12.哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以36.5±0.5℃為宜。(P44)13.多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為7.2-7.4。(P44)14.維持適宜滲透壓的目的維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能。15.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2。(P44)16.O2的作用:O2是細(xì)胞代謝所必需的。CO2的作用:CO2的主要作用維持培養(yǎng)液的pH。(P44)17.培養(yǎng)容器:通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶。(P44圖)培養(yǎng)儀器:含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱。(P44)18.因此動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境為95%空氣和5%CO2。(P44)(二)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程取動(dòng)物組織制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液原代培養(yǎng)分瓶傳代培養(yǎng)1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)取材:動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官。取材原因:細(xì)胞分化程度低,增殖能力強(qiáng),容易培養(yǎng)。2.制成細(xì)胞懸液的步驟(P44)(1)將組織分散成單個(gè)細(xì)胞。(2)用培養(yǎng)液將細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。3.將組織分散成單個(gè)細(xì)胞的原因(1)從動(dòng)物體取出的成塊組織中,細(xì)胞與細(xì)胞靠在一起,彼此限制了生長(zhǎng)和增殖;(2)能使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸,更易進(jìn)行物質(zhì)交換。4.將組織分散成單個(gè)細(xì)胞的方法(1)機(jī)械法;(2)用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時(shí)間。5.用胰蛋白酶分散細(xì)胞,可以說(shuō)明什么問(wèn)題?動(dòng)物細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。6.可以用胃蛋白酶分散細(xì)胞嗎?不可以。為什么?胃蛋白酶作用的適宜pH約為2,當(dāng)pH大于6時(shí),胃蛋白酶就會(huì)失去活性,多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2-7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒(méi)有活性,所以用胃蛋白酶不行。7.酶解法較溫和,一定不會(huì)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷嗎?不是,使用胰蛋白酶時(shí),要控制好作用時(shí)間,因?yàn)橐鹊鞍酌覆粌H能分解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),長(zhǎng)時(shí)間作用還會(huì)分解細(xì)胞膜蛋白等,對(duì)細(xì)胞造成損傷。8.體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞的兩大類:(P44)(1)能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖。(2)大多數(shù)需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖(細(xì)胞貼壁)。9.兩類細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)(P44)(1)懸浮生長(zhǎng)類:會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻。(2)貼壁生長(zhǎng)類:除會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻外,還會(huì)發(fā)生接觸抑制。10.“細(xì)胞增殖到互相接觸的時(shí)候,糖蛋白識(shí)別了這種信息,就會(huì)使細(xì)胞停止繼續(xù)繁殖,出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象”試結(jié)合上述解釋,舉例說(shuō)明哪種細(xì)胞最可能無(wú)接觸抑制現(xiàn)象,并闡述原因:癌細(xì)胞,癌細(xì)胞的細(xì)胞膜上糖蛋白等物質(zhì)減少。11.原代培養(yǎng):通常將分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng),即指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。(P45)12.原代培養(yǎng)的具體做法:將初次制備好的細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)。(P44)13.傳代培養(yǎng):將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。(P45)14.分瓶傳代培養(yǎng)的具體做法(P45)(1)收集細(xì)胞a.懸浮生長(zhǎng)類:直接用離心法收集。b.貼壁生長(zhǎng)類:重新用胰蛋白酶等處理,使之分散成單個(gè)細(xì)胞,然后再用離心法收集。(2)將收集的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,分瓶培養(yǎng)。15.為什么動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中需分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)?(P44)細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻,貼壁細(xì)胞還會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象。16.離心的作用:在沉淀中得到細(xì)胞,同時(shí)去掉上清液中的胰蛋白酶。17.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)有沒(méi)有體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性?未體現(xiàn),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只是細(xì)胞增殖的過(guò)程。思考:正常細(xì)胞能否一直傳代培養(yǎng)下去?不可以;細(xì)胞的傳代培養(yǎng)一般傳至10代后就不易傳下去,這時(shí)細(xì)胞能保持細(xì)胞正常的二倍體核型;傳至10-50代左右時(shí),增殖會(huì)逐漸緩慢,以至于完全停止,這時(shí)部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化,這一階段的細(xì)胞稱為細(xì)胞株;繼續(xù)傳代培養(yǎng)時(shí),少部分細(xì)胞會(huì)克服細(xì)胞壽命的自然極限,獲得不死性,這些細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生了突變,正在朝著等同于癌細(xì)胞的方向發(fā)展,這一階段的細(xì)胞稱為細(xì)胞系,細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)一定改變了。(三)干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用1.干細(xì)胞功能:在一定條件下,可以分化成其他類型的細(xì)胞。(P46)2.干細(xì)胞的分布:早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。(P46)3.干細(xì)胞的種類:包括胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等。(P46)4.胚胎干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞)(P46)(1)分布:存在于早期胚胎中。(2)特點(diǎn):具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞,并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。5.成體干細(xì)胞(P46)(1)分布:存在于成體組織或器官內(nèi)中。(2)常見(jiàn)類別:包括骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞、睪丸中的精原干細(xì)胞等;(3)特點(diǎn):一般認(rèn)為,成體干細(xì)胞具有組織特異性,只能分化成特定的細(xì)胞或組織,不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。(4)發(fā)現(xiàn)最早、研究最多的、應(yīng)用最成熟的實(shí)例造血干細(xì)胞,主要存在于成體的骨髓、外周血和臍帶血中。6.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞概念:通過(guò)體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞,獲得類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞,稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞,簡(jiǎn)稱iPS細(xì)胞。(P46)7.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞優(yōu)點(diǎn):(P46)(1)誘導(dǎo)過(guò)程無(wú)需破壞胚胎。(2)iPS細(xì)胞可以來(lái)源于病人自身的體細(xì)胞,將它移植回病人體內(nèi)后,理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。8.干細(xì)胞的應(yīng)用:有著自我更新能力及分化潛能的干細(xì)胞,與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切相關(guān)。(P46)9.干細(xì)胞應(yīng)用實(shí)例(P46)(1)造血干細(xì)胞可以治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病。(2)神經(jīng)干細(xì)胞可以治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病(如帕金森病、阿爾茨海默病等)。(3)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)可治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血癥,在治療阿爾茲海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得了新進(jìn)展。9.干細(xì)胞可以治療某些頑癥的原理是什么?干細(xì)胞可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞,經(jīng)移植可使壞死或退化部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能。10.胚胎干細(xì)胞的局限性:必須從胚胎中獲取,涉及倫理問(wèn)題。(P46)11.普遍認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。(P46)12.iPS細(xì)胞用于治療人類疾病過(guò)程(P47)取成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)入相關(guān)因子細(xì)胞轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化為多種組織細(xì)胞移植回病人體內(nèi)。13.制備iPS細(xì)胞的其他方法(P46相關(guān)信息)(1)借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。(2)直接將特定蛋白導(dǎo)入受體細(xì)胞中誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。(3)用小分子化合物來(lái)誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。14.iPS細(xì)胞的來(lái)源:成纖維細(xì)胞以及已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞。(P46相關(guān)信息)15.如果想將iPS細(xì)胞用于緊急情況,應(yīng)該提前采取什么措施?(P47拓展應(yīng)用)建立iPS細(xì)胞庫(kù)(HLA多態(tài)性豐富的iPS細(xì)胞庫(kù)),可以為需要的人找到HLA匹配度較高的iPS細(xì)胞。16.如果誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化為生殖細(xì)胞的技術(shù)發(fā)展成熟,該技術(shù)可能會(huì)有哪些應(yīng)用?(P47拓展應(yīng)用)可以用來(lái)治療不孕癥,可以用來(lái)進(jìn)行瀕危物種的克隆,可以對(duì)獲得的生殖細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作,再經(jīng)過(guò)受精、胚胎發(fā)育等過(guò)程來(lái)獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。▉考點(diǎn)04動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體(一)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)概念:使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。(P48)2.誘導(dǎo)的結(jié)果:形成的雜交細(xì)胞,具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息。(P48)3.誘導(dǎo)的原理:細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。4.誘導(dǎo)方法:PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等。其中,滅活病毒誘導(dǎo)法是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)融合方法。(P48)5.意義:突破了有性雜交的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。(P48)6.“滅活病毒”中滅活的具體含義是什么?(P48相關(guān)信息)用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力,但并不破壞它們的抗原結(jié)構(gòu)。7.滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是什么?(P48相關(guān)信息)病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開(kāi),細(xì)胞發(fā)生融合。8.融合實(shí)質(zhì)及完成的標(biāo)志:細(xì)胞核的融合。9.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用(P48)(1)細(xì)胞融合技術(shù)成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。(2)利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù),為制備單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。(二)單克隆抗體及其應(yīng)用1.早期獲得抗體的方法:向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動(dòng)物產(chǎn)生抗體,然后從動(dòng)物血清中分離所需抗體。(P49)2.上述抗體的缺點(diǎn):產(chǎn)量低、純度低、特異性差。(P49)3.B細(xì)胞的特點(diǎn)(優(yōu)點(diǎn)和局限性):能產(chǎn)生單一的特異性抗體,但不能無(wú)限增殖。(P49)4.癌細(xì)胞的特點(diǎn):能在體外大量增殖,但不能產(chǎn)生抗體。5.雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn):B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到的雜交瘤細(xì)胞,既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生大量特定抗體。(P49)6.米爾斯坦和科勒由于發(fā)明了單克隆抗體的制備技術(shù),于1984年獲得了諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。(P49)7.制備過(guò)程:8.實(shí)驗(yàn)最初應(yīng)如何處理小鼠?(P48)注射特定的抗原,用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫。9.上述操作目的是為了獲得抗體嗎?不是。(P48)10.注射特定抗原的目的:用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫,并從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞(獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞)。(P48)11.誘導(dǎo)融合的方法:PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法(動(dòng)物細(xì)胞特有)。(P48)12.誘導(dǎo)融合后,能得到幾種細(xì)胞?(融合只考慮兩兩融合)(1)未融合的親本細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞)。(2)融合的具有同種核的細(xì)胞(B-B細(xì)胞、瘤-瘤細(xì)胞)。(3)融合的雜交瘤細(xì)胞。13.第一次篩選(P48)(1)如何篩選(篩選方法):用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。(2)篩選原理:在選擇培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)。(3)獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生抗體。此時(shí),抗體不是所需的特定抗體。(4)得到的該雜交瘤細(xì)胞一定是所需的嗎?雜交瘤細(xì)胞并不純,因?yàn)閺钠⑴K獲得的B淋巴細(xì)胞不純(既有未免疫的B淋巴細(xì)胞,又有能產(chǎn)其他抗體的B淋巴細(xì)胞,以及能產(chǎn)所需抗體的B淋巴細(xì)胞),因此要進(jìn)行第二次篩選。14.第二次篩選(P49)(1)如何篩選(篩選方法):用96孔板培養(yǎng),在每一個(gè)孔中盡量只接種一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下,進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)(一般進(jìn)行多次篩選)。(2)獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能迅速大量繁殖,又能分泌所需抗體。(3)選擇抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞,即分泌的抗體能與特定的抗原結(jié)合。(4)抗體檢測(cè)原理:抗原和抗體能夠特異性結(jié)合(分子水平的檢測(cè))。15.第一次篩選的目的:篩選獲得雜交瘤細(xì)胞。第二次篩選的目的:獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。16.如何對(duì)所需雜交瘤細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)(P49)在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)(接種于培養(yǎng)液中)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。17.如何獲取單克隆抗體(1)體外培養(yǎng):從細(xì)胞培養(yǎng)液中獲取。(2)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng):從小鼠腹水中獲取。18.單克隆抗體制備的過(guò)程中涉及的原理:細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖。19.單克隆抗體制備的過(guò)程中應(yīng)用到的技術(shù):動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。20.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備。(P50)21.單克隆抗體的應(yīng)用(P50)(1)作為診斷試劑,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。(2)用于治療疾病和運(yùn)載藥物。22.用作診斷試劑的原理:?jiǎn)慰寺】贵w能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合。(P50)23.用作診斷試劑的實(shí)例:多種疾病的診斷和病原體鑒定。(P50)24.運(yùn)載藥物(P50)(1)實(shí)例——ADC:與藥物結(jié)合,制成抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC),殺傷腫瘤細(xì)胞;ADC通常由抗體、接頭和藥物三部分組成。(P50)(2)原理:通過(guò)將藥物與能特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。(P50)發(fā)揮殺傷作用的為放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素;單克隆抗體作用為靶向運(yùn)輸作用;(3)優(yōu)點(diǎn):靶點(diǎn)清楚、毒副作用小(不會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害)。補(bǔ)充了解——HAT培養(yǎng)基的篩選原理1.細(xì)胞合成DNA有兩條途徑,正常細(xì)胞內(nèi)兩種途徑都有,若全合成途徑被阻斷,可以通過(guò)補(bǔ)救合成途徑合成DNA;2.骨髓瘤細(xì)胞不能合成轉(zhuǎn)化酶和激酶,因此只能進(jìn)行全合成途徑;3.全合成途徑能被氨基喋呤(A)阻斷;4.次黃嘌呤(H)、胸腺嘧啶(T)是補(bǔ)救合成途徑的原料;5.無(wú)增殖能力的細(xì)胞在培養(yǎng)基中存活僅5-7天,細(xì)胞的多聚體也容易死去;思考:將誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞接種于HAT培養(yǎng)基后兩周,則細(xì)胞生存狀況及原因?yàn)椋築細(xì)胞和B-B細(xì)胞死亡;能進(jìn)行補(bǔ)救合成途徑,但是無(wú)增殖能力。骨髓瘤細(xì)胞和瘤-瘤細(xì)胞死亡;兩種途徑均無(wú)法進(jìn)行,無(wú)法合成DNA,無(wú)法增殖。雜交瘤細(xì)胞存活;能進(jìn)行補(bǔ)救合成途徑,能合成DNA,可大量增殖。補(bǔ)充了解——不同水平的克隆及實(shí)例1.分子水平--DNA復(fù)制、PCR技術(shù)2.細(xì)胞水平--動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)3.個(gè)體水平--植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植▉考點(diǎn)05動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)概念:將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。(P52)2.克隆動(dòng)物:用核移植的方法得到的動(dòng)物。(P52)3.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)原理:動(dòng)物細(xì)胞核的全能性、細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。培育多利羊的原理:動(dòng)物體細(xì)胞核的全能性、細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。4.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)生殖方式:無(wú)性生殖。5.哺乳動(dòng)物核移植分類:胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。兩者中難度較高的是體細(xì)胞核移植。(P52)6.動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植;為什么?(P52)動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,表現(xiàn)全能性相對(duì)容易,動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,表現(xiàn)全能性十分困難。7.非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物體細(xì)胞核移植的困難原因(P52)(1)供體細(xì)胞的細(xì)胞核在去核卵母細(xì)胞中不能完全恢復(fù)其分化前的功能狀態(tài),這導(dǎo)致了胚胎發(fā)育率低;(2)對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物胚胎進(jìn)行操作的技術(shù)尚不完善。(一)體細(xì)胞核移植的過(guò)程1.采集的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)至MⅡ期(減數(shù)分裂Ⅱ中期)(P53)2.選擇MⅡ期卵母細(xì)胞的原因(1)含有促進(jìn)細(xì)胞核表現(xiàn)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件。(2)細(xì)胞體積大,易于操作。3.卵母細(xì)胞去核的方法:顯微操作(去核)法。(P53)*除此之外,還有梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。*這些方法是在沒(méi)有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性。4.“去核”去的是什么?去除的為紡錘體-染色體復(fù)合物。注意:去核時(shí),由于MⅡ期卵母細(xì)胞核的位置靠近第一極體,一般用微型吸管一并吸出細(xì)胞核和第一極體。5.去核的原因:使核移植得到的胚胎或動(dòng)物核內(nèi)遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物。6.與直接注入核相比,將供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn):對(duì)卵母細(xì)胞損傷較小。注入位置:將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞的透明帶內(nèi)(卵細(xì)胞膜和透明帶之間)。7.誘導(dǎo)供體細(xì)胞和去核卵母細(xì)胞融合的方法:電融合法。8.融合的結(jié)果:供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞,形成重構(gòu)胚。(P53)9.重構(gòu)胚概念:人工重新構(gòu)建的胚胎,具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。(P53相關(guān)信息)10.激活重構(gòu)胚的方法(P53)(1)物理方法:電刺激。(2)化學(xué)方法:Ca2+載體、乙醇和蛋白酶合成抑制。11.以上方法處理重構(gòu)胚的目的:激活重構(gòu)胚,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育過(guò)程。(P53)12.實(shí)驗(yàn)結(jié)論:證明了動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。13.實(shí)驗(yàn)結(jié)果:生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)基本相同的犢牛14.新生犢牛的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來(lái)自供體奶牛。新生犢牛的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來(lái)自去核卵母細(xì)胞。15.新生牛的性別與供體奶牛一致。16.通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞核移植獲得奶牛的過(guò)程中涉及的技術(shù):(1)動(dòng)物細(xì)胞核移植。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合。(4)早期胚胎培養(yǎng)。(5)胚胎移植。注意:操作為“將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞”時(shí),才涉及該技術(shù)。17.用上述技術(shù)培育的克隆動(dòng)物,是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎?不是。18.為什么克隆動(dòng)物不是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制*?(1)克隆動(dòng)物絕大部分DNA來(lái)自供體動(dòng)物的細(xì)胞核,但線粒體中的DNA(細(xì)胞質(zhì)中的DNA)同時(shí)來(lái)自供體細(xì)胞和受體卵母細(xì)胞。(2)性狀是基因與環(huán)境共同作用的結(jié)果,克隆動(dòng)物所處的環(huán)境與核供體細(xì)胞生活的環(huán)境不會(huì)完全相同。(3)克隆動(dòng)物在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中有可能發(fā)生基因突變、染色體變異等可遺傳變異。(二)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景及存在的問(wèn)題1.應(yīng)用前景(1)畜牧生產(chǎn)方面:加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。(P54)(2)醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域(P54)①轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白。②轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物的細(xì)胞、組織和器官可作為異種移植的供體。③以患者作為供體培育的人核移植胚胎干細(xì)胞,經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)分化能形成相應(yīng)的細(xì)胞、組織或器官,將它們移植給患者時(shí)可以避免免疫排斥反應(yīng)。(3)保護(hù)瀕危物種方面:保護(hù)瀕危物種,增加瀕危動(dòng)物的存活數(shù)量。(P54)(4)科研(P54)①研究克隆動(dòng)物可使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過(guò)程。②克隆一批遺傳背景相同的動(dòng)物,可以通過(guò)它們之間的對(duì)比來(lái)分析致病基因。③克隆特定疾病模型的動(dòng)物,還能為研究該疾病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助。2.存在問(wèn)題(P54)(1)體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率非常低。(2)各個(gè)技術(shù)環(huán)節(jié)有待進(jìn)一步改進(jìn)。(3)克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題,表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。▉考點(diǎn)06胚胎工程一、胚胎工程的理論基礎(chǔ)1.胚胎工程概念:對(duì)生殖細(xì)胞、受精卵或早期胚胎細(xì)胞進(jìn)行多種顯微操作和處理,然后將獲得的胚胎移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)后代,以滿足人類的各種需求。(P56)2.胚胎工程技術(shù)(1)操作對(duì)象:動(dòng)物生殖細(xì)胞、受精卵、早期胚胎細(xì)胞;(2)技術(shù)種類:體外受精、胚胎移植、胚胎分割;(P56)(3)特點(diǎn):獲得的胚胎需移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)后代;(4)理論基礎(chǔ):哺乳動(dòng)物受精和早期胚胎發(fā)育的規(guī)律。(P56)(一)受精1.受精概念:精子與卵子結(jié)合形成合子(即受精卵)的過(guò)程。(P56)2.受精場(chǎng)所:在自然條件下,哺乳動(dòng)物的受精在輸卵管內(nèi)完成。(P56)3.受精過(guò)程:包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段;前者又包括精子獲能和卵子的準(zhǔn)備。4.精子獲能(1)概念:剛剛排出的精子不能立即與卵子受精,必須在相應(yīng)的生理變化發(fā)生雌性動(dòng)物的生殖道后,才能獲得受精能力,這一生理現(xiàn)象稱為“精子獲能”。(P56)*獲能的能指的是“受精能力”而不是“能量”。(2)使精子獲能的兩種方法:(P56相關(guān)信息)a.直接利用雌性動(dòng)物生殖道使精子獲能b.將精子培養(yǎng)在人工配制的獲能液中使其獲能*獲能液的成分因動(dòng)物種類不同而有所差異;*獲能液常見(jiàn)有效成分有肝素、Ca2+載體等。(3)研究精子獲能機(jī)制的意義:實(shí)現(xiàn)了各種哺乳動(dòng)物在體外條件下的獲能,為體外受精技術(shù)的建立奠定了基礎(chǔ)。(P57)5.卵子的準(zhǔn)備(1)卵子一般在排出2-3h后才能被精子穿入。(P57)(2)動(dòng)物排出的卵子成熟程度不同。(P57)有的可能是初級(jí)卵母細(xì)胞,如馬、犬等;有的可能是次級(jí)卵母細(xì)胞,如豬、羊等。(3)卵子成熟的場(chǎng)所:排出的卵子都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟。(4)卵子具備與精子受精能力的時(shí)期MⅡ期。(P57)6.受精階段過(guò)程:(1)精子釋放多種酶溶解卵細(xì)胞膜外的一些結(jié)構(gòu),精子穿越透明帶。(P57)(2)透明帶反應(yīng):阻止多精入卵的第一道屏障。(P57)(3)透明帶反應(yīng)具體表現(xiàn):精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間,透明帶會(huì)迅速發(fā)生生理反應(yīng),阻止后來(lái)的精子進(jìn)入透明帶。(P57)(4)透明帶反應(yīng)發(fā)生時(shí)間:精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間。(P57)(5)精子入卵:(卵細(xì)胞膜反應(yīng):阻止多精入卵的第二道屏障。)(P57)(6)卵細(xì)胞膜反應(yīng)具體表現(xiàn):精子入卵后,卵細(xì)胞膜會(huì)立即發(fā)生生理反應(yīng),拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)。(P57)(7)卵細(xì)胞膜反應(yīng)發(fā)生時(shí)間:精子入卵后。(P57)(8)雄原核的形成:精子入卵后,尾部脫離,原有的核膜破裂并形成一個(gè)新的核膜,最后形成一個(gè)比原來(lái)精子的核還大的核,叫做雄原核。(P57)(9)雌原核的形成:精子入卵后,被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ,排出第二極體后,形成雌原核。(P57)(10)受精的標(biāo)志:a.觀察到兩個(gè)極體(透明帶和卵細(xì)胞膜之間)。b.觀察到雌、雄原核。注意:多數(shù)哺乳動(dòng)物的第一極體不進(jìn)行減數(shù)分裂Ⅱ,因而不會(huì)形成兩個(gè)第二極體,觀察到的兩個(gè)極體為一個(gè)第一極體一個(gè)第二極體。(P58相關(guān)信息)(11)受精完成的標(biāo)志:雌、雄原核核膜消失,形成合子。(P57)(12)受精過(guò)程結(jié)束后,受精卵的發(fā)育也就開(kāi)始了。(P57)(13)受精卵中細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來(lái)源一半來(lái)源于精子,一半來(lái)源于卵子。細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來(lái)源幾乎全部來(lái)自于卵子。(二)胚胎早期發(fā)育1.受精卵是胚胎發(fā)育過(guò)程中全能性最高的階段。2.哺乳動(dòng)物胚胎早期發(fā)育場(chǎng)所:輸卵管和子宮。3.胚胎早期發(fā)育階段(P58)受精卵→桑葚胚→囊胚→原腸胚。4.卵裂(1)場(chǎng)所:透明帶內(nèi)。(P58)(2)分裂方式:有絲分裂。(P58)(3)特點(diǎn)(P58)a.細(xì)胞數(shù)量不斷增加。b.胚胎總體積并不增加。(4)其他表現(xiàn)每個(gè)細(xì)胞體積不斷減小;DNA總數(shù)目不斷增加;每個(gè)細(xì)胞的核DNA數(shù)目不變;有機(jī)物總量減少;有機(jī)物種類增加。3.桑葚胚(1)概念:當(dāng)卵裂產(chǎn)生的子細(xì)胞逐漸形成致密的細(xì)胞團(tuán),形似桑葚時(shí),這時(shí)的胚胎稱為桑葚胚。(P58)(2)特點(diǎn):這一階段及之前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能,屬于全能細(xì)胞。4.囊胚(1)概念:胚胎進(jìn)一步發(fā)育,細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)分化,形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、滋養(yǎng)層;隨著胚胎進(jìn)一步發(fā)育,胚胎內(nèi)部出現(xiàn)了含有液體的囊腔—囊胚腔,這個(gè)時(shí)期的胚胎叫做囊胚。(P58)(2)特點(diǎn):細(xì)胞逐漸分化。(P58)(3)結(jié)構(gòu)組成:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、滋養(yǎng)層、囊胚腔。(P58)a.內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(P58)位置:聚集在胚胎一端。作用:將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織。b.滋養(yǎng)層(P58)位置:沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列。作用:將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤。c.囊胚腔:胚胎內(nèi)部含有液體的腔。(P58)(4)孵化:囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大,會(huì)導(dǎo)致透明帶破裂,胚胎從透明帶中伸展出來(lái),這一過(guò)程叫做孵化。(P58)5.囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有全能性。6.原腸胚:囊胚孵化后,將發(fā)育形成原腸胚;原腸胚表面的細(xì)胞層為外胚層,向內(nèi)遷移的細(xì)胞形成內(nèi)胚層;隨著發(fā)育的進(jìn)行,一部分細(xì)胞還會(huì)在內(nèi)外兩個(gè)胚層之間形成中胚層;這三個(gè)胚層將逐漸分化形成各種組織、器官等。(P58小字)7.牛在自然情況下,胚胎最早可在8-16細(xì)胞階段進(jìn)入子宮,但在實(shí)踐中通常對(duì)發(fā)育到囊胚階段的胚胎進(jìn)行移植的原因:提高移植后胚胎的發(fā)育率和妊娠率。注意:不同種動(dòng)物精子的形態(tài)相似,大小略有不同,與動(dòng)物的體型大小無(wú)關(guān)。二、胚胎工程技術(shù)及其應(yīng)用(一)體外受精1.試管動(dòng)物:通過(guò)人工操作使卵子在體外受精,經(jīng)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后,再進(jìn)行移植產(chǎn)生的個(gè)體。(P60)2.體外受精技術(shù)的主要過(guò)程:卵母細(xì)胞的采集、精子的獲取和受精。(P60)(1)采集到的卵母細(xì)胞和精子,要分別在體外進(jìn)行成熟培養(yǎng)(即培養(yǎng)至MⅡ期)和獲能處理(可對(duì)精子進(jìn)行離心處理),然后才能用于體外受精。(P60)(2)一般情況下,可以將獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子置于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液中共同培養(yǎng)一段時(shí)間,來(lái)促進(jìn)它們完成受精。(P60)3.體外受精的意義:是提高動(dòng)物繁殖能力的有效措施,可以為胚胎移植提供可用胚胎。(P60)(二)胚胎移植1.概念:是指將通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。(P61)2.胚胎來(lái)源:體外受精及其他方式得到的胚胎。其他方式包括:體內(nèi)受精、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)等。3.胚胎移植的基本程序:(1)供體、受體的選擇和處理。提供胚胎的個(gè)體稱為供體。(P61)供體選擇標(biāo)準(zhǔn):遺傳性狀優(yōu)良、生產(chǎn)能力強(qiáng)。供體職能:產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎。接受胚胎的個(gè)體叫受體。(P61)受體選擇標(biāo)準(zhǔn):有健康體質(zhì)和正常繁殖能力。受體職能:承擔(dān)繁重而漫長(zhǎng)的妊娠和育仔任務(wù)。對(duì)受體進(jìn)行的處理:同期發(fā)情處理。(P61圖)該處理的目的:為胚胎移植前后提供相同的生理環(huán)境。只對(duì)供體進(jìn)行的操作:超數(shù)排卵處理。(P61圖)該處理需要用的激素:外源促性腺激素。該處理的結(jié)果:卵巢排出比自然情況下更多的成熟卵子。(2)配種或人工授精(應(yīng)選擇同種的優(yōu)良公牛)。(P61)(3)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。(P61)胚胎收集的基礎(chǔ):哺乳動(dòng)物早期胚胎形成后,在一定時(shí)間內(nèi)不會(huì)與母體子宮建立組織上的聯(lián)系,而是處于游離狀態(tài)。移植前檢查的目的:檢查胚胎的質(zhì)量。胚胎保存的方法(了解):-196℃液氮中保存。(4)胚胎的移植。(P61)胚胎移植的時(shí)期:一般選擇移植桑葚胚或囊胚階段的胚胎。移植后的檢查。(P61)移植后檢查的目的:對(duì)受體進(jìn)行妊娠檢查(檢查受體是否妊娠)。4.胚胎移植過(guò)程中進(jìn)行了兩次目的不同檢查(1)第一次目的:檢查胚胎的質(zhì)量。(2)第二次目的:檢查受體是否妊娠。5.胚胎移植的實(shí)質(zhì):早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。(P62思考)6.胚胎移植的地位:胚胎工程的最終技術(shù)環(huán)節(jié)。7.胚胎移植的意義(P62)(1)充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力。(2)大大縮短了供體本身的繁殖周期。(3)對(duì)供體施行超數(shù)排卵處理后,增加后代數(shù)量。8.胚胎移植是如何充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力的?對(duì)供體施行超數(shù)排卵處理后,可獲得多枚胚胎,經(jīng)移植可得到多個(gè)后代,使供體
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