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文檔簡介

生長的菌落我們如何用微生物來制作出這樣美麗的藝術作品呢?發酵工程的培養基1認識菌落2培養基的類型3配制培養基本節內容認識菌落前言菌落單個微生物在適宜的固體培養基表面或內部生長、繁殖到一定程度后形成的肉眼可見的、有一定形態結構的子細胞群體。觀察各種微生物形成的菌落幾種菌落及其形態幾種菌落及其形態培養基的類型第二部分123培養基都包括哪些成分?培養基都有哪些類型?它們的主要區別在哪里?說一說

培養基(培養液)主要是指為人工培養微生物等而制備的,適合微生物等生長、繁殖或積累代謝產物的營養基質。1.培養基內所含的基本物質最基本的物質(1)水(2)碳源(3)氮源(4)無機鹽以及生長因子、氧氣、二氧化碳、滲透壓、PH等的特殊要求

★碳源★

凡能提供碳元素的物質可作為碳源的物質有:無機碳源:、、有機碳源:蛋白質脂肪酸碳酸鹽碳酸氫鹽糖類(主要)葡萄糖乳糖二氧化碳不同微生物所利用的碳源不同異養型微生物的碳源為自養型微生物的碳源為含碳有機物(有機碳)含碳無機物(無機碳)作用:構成微生物體的重要成分,也是微生物生命活動的能源物質。★氮源★

凡能提供氮元素的物質可作為氮源的物質有:無機氮源:、、、有機氮源:蛋白胨牛肉膏尿素固氮微生物所利用的氮源是氮氣氨氣硝酸鹽氨鹽氮氣作用:構成微生物細胞中蛋白質、核酸的主要元素。★生長因子★細菌生長必需,而自身不能合成的微量有機物如:維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶等作用:合成酶和核酸★水★

在生物體內含量很高的無機物作用:不僅是優良的溶劑,而且可維持生物大分子結構的穩定★無機鹽★為微生物提供除碳、氮外的各種重要元素作用:細胞的組成成分、生理調節物質、某些化學自養菌的能源、酶的激活劑指出下列培養基配方中的碳源、氮源分別什么?2.培養基的類型和用途(1)按化學成分來分,可分為天然培養基和合成培養基。(2)按物理性質來分:培養基可分為固體培養基、半固體培養基和液體培養基。其中固體培養基用于菌種分離、鑒定菌落等,而液體培養基一般用于工業生產。(3)按用途來分,可分為基礎培養基和特殊培養基(4)按功能(特殊用途)來分,可分為選擇培養基、鑒別培養基、加富培養基。按化學成分來分天然培養基有血清、血漿、和組織提取液(如雞胚和牛胚浸液)。優點:取材便利、營養豐富、配制簡便、培養效果好缺點:來源受限、營養成分復雜難以控制、實驗結果的重復性差,影響對某些實驗產物的提取和實驗結果的分析天然培養基:適用于工業化生產按化學成分來分根據細胞生存所需物質的種類和數量,用人工方法模擬合成的。合成培養基主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質。優點:化學成分和含量明確、實驗的可重復性好缺點:成本較高、配制過程繁瑣、缺少某些成分,不能完全滿足體外細胞生長需要。合成培養基:用于研究和育種液體培養基:表面生長均勻混濁生長沉淀生長按物理狀態來分增菌、工業生產固體培養基:菌落,菌苔按物理狀態來分純化(分離)鑒定活菌計數保藏菌種半固體培養基:無動力有動力(彌散)觀察細菌的運動、厭氧菌的分離和菌種鑒定、保存按物理狀態來分瓊脂選擇培養基加入10%的酚溶液:抑制細菌和霉菌的生長,分離放線菌加入亞硫酸鉍:分離出傷寒沙門氏菌加入青霉素、四環素的培養基:分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養基:分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養基:分離固氮菌不加含碳有機物的無碳培養基:分離自養型微生物按功能來分鑒別培養基1可溶性淀粉培養基一些微生物可以產生胞外淀粉酶,將樣品微生物培養在添加可溶性淀粉的培養基中,如果其菌落周圍形成淀粉水解圈,可用來鑒定產淀粉酶的菌株。按功能來分鑒別培養基2溴甲基紫培養基一些微生物可以產生乳酸、醋酸或丙酸等代謝產物,與溴甲基紫發生顏色反應由紫色轉為黃色。常用溴甲基紫培養基鑒別產酸微生物。鑒別培養基3伊紅美藍培養基當大腸桿菌分解乳糖產酸時細菌帶正電荷被染成紅色,再與美藍結合形成紫黑色菌落,并帶有金屬光澤。常用的伊紅美藍乳糖培養基,可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細菌。鑒別培養基4尿素為唯一氮源的培養基在以尿素為唯一氮源的培養基加入酚紅指示劑,培養某種細菌后,細菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨,氨會使培養基的堿性增強,使PH升高,從而使酚紅指示劑變紅。以鑒定這種細菌能否分解尿素。剛果紅是一種染料,能與培養基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素分解菌分解后,剛果紅-纖維素的復合物就無法形成,培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈。鑒別培養基5剛果紅纖維素培養基加富培養基在培養基中加入有利于某些微生物生長和繁殖所需的特殊物質,如血液、血清、酵母浸膏、動植物組織液。一般適用于培養要求比較苛刻的異養微生物。從某種意義上來說,加富培養基類似于選擇培養基:加富培養基是增加所需分離的微生物的數量;選擇培養基是抑制不需要的微生物生長和繁殖。血清中含有:①多種蛋白質(白蛋白、球蛋白、鐵蛋白等)②多種金屬離子;③激素;④促貼附物質,如纖粘蛋白、冷析球蛋白、膠原等。⑤各種生長因子⑥轉移蛋白⑦不明成分人工合成培養基只能維持細胞生存,要想使細胞生長和繁殖,還需補充一定量的天然培養基(如血清)。3.不同的微生物往往需要采用不同的培養基配方細菌喜葷,真菌喜素大腸桿菌配方酵母提取物:0.25g蛋白胨:0.5gNacl:0.5g瓊脂:1g水:50ml酵母菌、霉菌常用培養基麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基☆依據微生物的生長需要確定培養基的成分和含量1.關于配制培養基的有關敘述中,正確的是(

)A.制作固體培養基必須加入瓊脂B.一般常用的是固體培養基C.氮源主要是為微生物提供能量D.牛肉膏只為微生物提供氮元素B隨堂練習2.下表為某培養基的配方,下列敘述正確的是(

)成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍蒸餾水含量10g10g2g0.4g0.065g1000mLA.從物理性質看該培養基屬于液體培養基,從用途看該培養基屬于選擇培養基B.該培養基中屬于碳源的物質主要是葡萄糖,屬于氮源的物質是蛋白胨C.該培養基缺少提供生長因子的物質D.該培養基調節合適的pH后就可以接種使用B配制馬鈴薯葡糖糖瓊脂培養基第三部分1.培養基配制原則①目的要明確:根據培養的微生物種類、培養的目的等確定培養基的類型和配制量。②營養要協調:培養基中各種營養物質的濃度和比例要適宜。例如:碳氮比4∶1時,谷氨酸棒狀桿菌大量繁殖而產生谷氨酸少;碳氮比為3∶1時,菌體繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。③pH要適宜:細菌培養基pH中性或偏堿性,霉菌培養基呈酸性。2.配置培養基的步驟:1.配制培養基2.調節pH3.分裝4.包扎5.滅菌6.擱置斜面7.無菌

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