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文檔簡介
實驗目的和要求通過在小鼠復制乏氧性、血液性和組織中毒性缺氧模型,觀察動物在缺氧時呼吸、皮膚粘膜、血液顏色和活動情況的改變以及動物的存活時間,加深理解各型缺氧的發生原因和機制。
實驗動物每組取成年小鼠7只,新生小鼠1只。成年鼠稱重、編號。選出兩對體重相等或最相近(誤差在1g以內)的成年小鼠備用。實驗一:乏氧性缺氧取體重誤差<1g的小鼠2只,同時分別密閉在置有鈉石灰或玻璃珠的廣口瓶中,計時。仔細觀察小鼠的活動、呼吸和皮膚粘膜顏色的改變,死亡時記錄存活時間。測死亡時瓶內氧濃度(其中一鼠死亡時,同時測兩鼠瓶內的氧濃度)。小鼠死后立即開胸取心血,觀察血液顏色。緩沖瓶玻璃珠或鈉石灰水圖5-3-3小鼠缺氧瓶裝置實驗一:乏氧性缺氧實驗二:一氧化碳中毒性缺氧取小鼠1只,放入指定裝置,調節煤氣流量(60個左右氣泡/min),吸入CO。觀察指標同實驗一的2、4項。實驗三:亞硝酸鈉中毒性缺氧取體重相近(誤差<1g)的小鼠2只;腹腔注射給藥:0.15ml/10g體重觀察方法與指標同實驗一的2、4項。
鼠1鼠25%亞硝酸鈉溶液√√1%美藍溶液√
生理鹽水
√實驗四:氰化鉀中毒性缺氧取健康小鼠1只腹腔注射0.2%氰化鉀0.15ml/10g觀察指標同實驗一的2、4項實驗五:年齡因素對缺氧耐受性的影響取成年鼠和新生幼鼠各1只;新生鼠置入青霉素小瓶中,瓶口蓋棉花;與成年鼠共同置入廣口瓶并密閉。觀察活動、呼吸情況和存活時間。
注意事項
所用廣口瓶須密閉不漏氣,且各瓶容量應一致。動物死亡后要立即取血,血液要充分與抗凝劑混合,量要準(即液滴大小相同),否則對比性差。試管應事先編號,以免搞錯。記錄時間要準確,以一只表為準。氰化鉀有劇毒,勿沾染皮膚、粘膜,尤其是破損處。要認真仔細觀察小鼠活動情況、呼吸深度和尾、耳、口顏色的變化。實驗結果
幾種類型缺氧指標的改變乏氧性血液性組織年齡玻璃珠鈉石灰CONaNO2+NSNaNO2+美藍KCN成年新生存活時間(min)血液顏色呼吸變化FiO2(%)分組討論題各組小鼠缺氧死亡的原因和機制是什么?實驗一中兩小鼠瓶內FiO2有何變化?其發生機制是什么?各組缺氧小鼠粘膜及血液顏色生成的原因;各組的呼吸變化有何不同,為什么?年齡差異對缺氧耐受有何不同,為什么?(完)CO中毒死因①結合速率==
解離速率==
親和力==②吸入氣中CO達0.1%,血中HbCO可達50%③HbCO增加其余血紅素對氧的親和力,氧離曲線左移④抑制RBC糖酵解,2,3-DPG減少,氧離曲線左移亞硝酸鈉中毒
高鐵血紅蛋白血癥(methemoglobinemia)
Hb-Fe2+
+NaNO2Hb-Fe3+-OH
+NaNO正常成人MHb含量不超過Hb總量的1~2%NaNO2
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