外周血實時分子診斷與治療

肺癌的精確化治療之個體化診斷個體化治療精確醫療（PrecisionMedicine）在檢測個體分子分型基礎上，預測疾病的易感性，對疾病進行特異性診斷，評估藥物的反應性，并依此為患病個體制定特異性治療方案。其精髓在于根據腫瘤的分子分型進行個體化治療。

非小細胞肺癌的致癌驅動基因*Amplificationonly1.PaoandGirard,LancetOncol;12:175–802.Krisetal.,ASCO;Abs#75063.Sivachenkoetal.,IASLC;Abs#PRS.1LungCancerMutationConsortium(腺癌)2TheCancerGenomeAtlasproject(鱗癌)3Frequencyofamplificationormutation常用的對應對應化療藥物的預測基因靶標：ERCC1、BRCA1與鉑類；RRM1與吉西他濱；TUBB3與抗微管類藥物；TYMS與培美曲塞；TOP2A與蒽環類藥物。因此，對于肺癌藥物有關的基因靶標檢測至關重要！

重要難點與挑戰在實際臨床中，諸多患者都經歷諸多線的治療；每一次疾病的進展代表的其實都是患者腫瘤在異質性方面的變化，嚴格來講，只有獲得患者進展后的腫瘤組織，并對其進行對應分析，才有也許為患者后續的治療指定愈加精確的治療方案。腫瘤進展取樣分析精確治療遺憾的是，臨床常規通過CT或B超引導下組織穿刺活檢是個非常痛苦的過程，諸多患者難以接受。不過，相比較而言，外周血的獲取則要輕易的多，在外周血中有來自腫瘤的游離的核酸，也有來自腫瘤的循環腫瘤細胞CTC，它們都是非常適合進行實時動態檢測的樣品。在ctDNA方面，采用ctDNA檢測EGFR突變，陽性患者使用TKI藥物的有效率高達70%以上，只不過，陰性患者仍然尚有較高的有效率。這提醒在這些成果中也許還存在某些假陰性的成果。原因在于在外周血中腫瘤來源的細胞或DNA含量一般較少，使得陽性成果不易被檢出。處理方案?——提高檢測措施的敏感性——近年來發展的微滴式數字PCR就可以實現對檢測標本的絕對定量，而檢測的敏感度可以高達0.01%處理方案?——提高樣品中腫瘤來源核酸或細胞的比率——通過檢測循環腫瘤細胞就是一種處理方案增長比例循環腫瘤細胞（CTC）檢測CTC的發生和出現是腫瘤發生轉移的關鍵環節?代表原發灶的腫瘤浸潤進入血管的轉移能力?代表了遠端形成轉移灶的潛能因此，CTC的出現是一個不良預后的指標CTC還被認為是一種液體活檢的工具，可以通過它對患者進行實時的分子分型截然不一樣的基因體現譜和生物學特性循環腫瘤細胞（CTC）檢測理論根據90%以上的惡性腫瘤細胞都是上皮來源的上皮來源的細胞血液系統的細胞運用差異進行分離在所有的CTC檢測技術中唯一通過美國FDA和我國CFDA同意的用于臨床的是CellSearch系統當然，CellSearch系統作為第一代的檢測技術自身也還是存在一定的缺陷和局限性新一代的CTC檢測技術逐漸改善其中最具有代表性的就是CTC-chip技術CTC-chip技術優勢明顯提高細胞檢出率實現肺癌患者的EGER突變檢測效果由于ctDNA為未來的藥物研發提供根據。近期，哈佛的團體又對這個技術做了深入改善，使得檢出效率有了深入的提高，后續分析更以便改善之后的技術可以實現CTC的體外培養并將其用于體外的藥敏試驗，尋找潛在的藥物組合或研究藥物耐藥的機制這樣的技術也可以針對CTC開展多種的試驗，對參與腫瘤轉移的機制進行深入的理解ABC正是由于CTC這樣的應用前景，使得CTC有關的技術受到了越來越多的關注，之因此這樣，是由于CTC是后續多種分析的源頭之水，只有拿到數量和質量完全合格的CTC后續的多種免疫分型，原位雜交，突變，體現以及基因組的測序分析等等才會成為也許，也只有這樣，才可以實時指導腫瘤患者的個體化精確醫療，并且深入的理解腫瘤的內在機制。而這正是CTC研究的未來，也是這個領域最吸引人的地方。根據腫瘤的分子表型進行個體化治療是腫瘤精確醫療的精髓，然而腫瘤處在不停發展變化過程之中，實時檢測就顯得尤為重要。組織活檢雖然說是分子分型的首選，不過它的獲取非常困難。在無法獲得組織的時候，外周血中ctDNA和CTC就可以成為良好的補充?？梢詫崿F多種層面的分子分析ctDNA和CTC優劣比較ctD