紫外分光光度法標準操作規程文件類型文件編碼執行日期執行部門起草人：起草日期：審核人：審核日期：批準人：批準日期：修訂號批準日期執行日期變更原因及目：目的：建立紫外分光光度法標準操作規程。適用范圍：紫外分光光度法測定。責任：質檢員實施本操作規程，檢驗室主任負責監督本規程正確執行。程序：1.儀器的校正和檢定由于溫度變化對機械部分的影響，儀器的波長經常會略有變動，因此除應定期對所用的儀器進行全面校正檢定外，還應于測定前校正測定波長。常用汞燈中的較強譜線237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm與576.96nm，或用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正，鈥玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm與637.5nm波長處有尖銳吸收峰，也可作波長校正用，但因來源不同會有微小的差別，使用時應注意。E波長/nmE235(最小)257(最大)313(最小)350(最大)吸收系數1%124.5144.048.62106.61吸收度的準確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120℃干燥至恒重的基準重鉻酸鉀約60mg，精密稱定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000ml，在規定的波長處測定并計算其吸收系數，并與規定的吸收系數比較，如上表，相對偏差應在±1%以內。雜散光的檢查可按下頁表的試劑和濃度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在規定的波長處測定透光率，應符合表中的規定。2.對溶劑的要求測定供試品前，應先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即用1cm操作標準----質量管理文件名稱紫外分光光度標準操作規程編碼SOP-QC-7038-00頁數3-2試劑濃度%（g/ml）測定用波長nm透光率%碘化鈉亞硝酸鈉1.005.00220340<0.8<0.8測定其吸收度。溶劑和吸收池的吸收度，在220～240nm范圍內不得超過0.40，在241～250nm范圍內不得超過0.20，在251～300nm范圍內不得超過0.10，在300nm以上時不得超過0.05。3.測定法測定時，除另有規定外，應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1cm的石英吸收池，在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規定外，吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內；否則應考慮該試樣的真偽、純度以及儀器波長的準確度，并以吸收度最大的波長作為測定波長。一般供試品溶液的吸收度讀數，以在0.3～0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度會偏低；狹縫寬度的選擇，應以減小狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準，由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸度后應減去空白讀數，再計算含量。用作鑒別和檢查項目的方法，分別按各品種項下的方法進行。鑒別項下吸收度讀數的范圍可根據制劑的實際含量和供試液的稀釋倍數估算。用于含量測定的方法一般有以下幾種。(1)對照品比較法按各品種項下的方法，分別配制供試品溶液和對照品溶液，對照液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分標示量的100%±10%，所用溶劑也應完全一致，在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸收度后，按下式計算供試品中被測溶液的濃度：CX=（AX/AR）CR式中CX為供試品溶液的濃度；AX為供試品溶液的吸收度；操作標準----質量管理文件名稱紫外分光光度標準操作規程編碼SOP-QC-7038-00頁數3-3CR為對照品溶液的濃度；AR為對照品溶液的吸收度。(2)吸收系數法按各品種項下的方法配制供試品溶液，在規定的波長處測定其吸收度，再以該品種在規定條件下的吸收系數計算含量。用本法測定法，應注意儀器的校正和檢定。(3)計算分光光度法采用計算分光光度法應慎重。本法有多種，使用時均應按各品種項下規定的方法進行。當吸收度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測定時，波長的微小變化可能對測定結果造成顯著影響，故對照品和供試品測試條件應盡可能一致。若測定時不用對照品，如維生素A測定法，則應在測定時對儀器作仔細的校正和檢定。出師表兩漢：諸葛亮先帝創業未半而中道崩殂，今天下三分，益州疲弊，此誠危急存亡之秋也。然侍衛之臣不懈于內，忠志之士忘身于外者，蓋追先帝之殊遇，欲報之于陛下也。誠宜開張圣聽，以光先帝遺德，恢弘志士之氣，不宜妄自菲薄，引喻失義，以塞忠諫之路也。宮中府中，俱為一體；陟罰臧否，不宜異同。若有作奸犯科及為忠善者，宜付有司論其刑賞，以昭陛下平明之理；不宜偏私，使內外異法也。侍中、侍郎郭攸之、費祎、董允等，此皆良實，志慮忠純，是以先帝簡拔以遺陛下：愚以為宮中之事，事無大小，悉以咨之，然后施行，必能裨補闕漏，有所廣益。將軍向寵，性行淑均，曉暢軍事，試用于昔日，先帝稱之曰“能”，是以眾議舉寵為督：愚以為營中之事，悉以咨之，必能使行陣和睦，優劣得所。親賢臣，遠小人，此先漢所以興隆也；親小人，遠賢臣，此后漢所以傾頹也。先帝在時，每與臣論此事，未嘗不嘆息痛恨于桓、靈也。侍中、尚書、長史、參軍，此悉貞良死節之臣，愿陛下親之、信之，則漢室之隆，可計日而待也。臣本布衣，躬耕于南陽，茍全性命于亂世，不求聞達于諸侯。先帝不以臣卑鄙，猥自枉屈，三顧臣于草廬之中，咨臣以當世之事，由是感激，遂許先帝以驅馳。后值傾覆，受任于敗軍之際，奉命于危難之間，爾來二十有一年矣。先帝知臣謹慎，故臨崩寄臣以大事也。受命以來，夙夜憂嘆，恐托付不效，以傷先帝之明；故五月渡瀘，深入不毛。今南方已定，兵甲已足，當獎率三軍，北定中原，庶竭駑鈍，攘除奸兇，興復漢室，還于舊都。此臣所以報先帝而忠陛