血液細胞形態學檢查

北京協和醫院血液科

葛昌文工作步驟1.登記(1)收到標本后，登記患者姓名、性別、年齡、病歷號，并告知病人取報告的時間和日期；(2)標本要登記化驗號及分類號、標本采取日期穿刺部位、標本來源（如：病房、門診、外院）。010203040506染色在玻片血膜頭部標明姓名或編號，并將其平置于染色架上；加瑞氏染液6-8滴覆蓋全部血膜，隨后加緩沖液(PH6.4)10-12滴，用洗耳球吹勻；血片染色10-15min，骨髓片染15-20min(根據有核細胞的多少而定)，必要時用低倍鏡觀察染色效果；手搖玻片數次，使染液渣上浮，用自來水先緩后急沖去染液，晾干待檢。鏡檢外周血涂片檢查法復習申請單的臨床診斷、送檢目的和要求。肉眼觀察涂片血膜大小、厚薄程度、染色好壞。低倍鏡檢查涂片的厚薄及染色情況。估計白細胞數（可大體核對WBC直接計數是否正確）。了解白細胞大致分布及片尾部有無異常細胞、特大細胞及細胞團。選擇具有代表性的鏡檢區域（多介于涂片體尾之間，細胞分布均勻，互不重疊、擠壓）。油鏡檢查01進行WBC分類計數：一般計數100個有核細胞(若WBC≤1.0×109/L，WBC分類計數不足100個，則注明有核細胞少見，全片分類多少個WBC；特殊情況如骨髓移植后，則注明有核細胞少，無法分類)，觀察細胞形態、比例及有無巨大或異常細胞。0221白細胞分類計數：計數中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞及單核細胞比例，注意各類細胞形態有無異常。注意片尾部有無不成熟細胞或異常細胞(如中晚幼粒、有核紅細胞、淋巴細胞、吞噬細胞、腫瘤細胞等)。01紅細胞形態（群體、個體）及排列（重疊、緡錢狀）02血小板數量、形態及聚集性。03寄生蟲。01WBC數及主要成分、各類白細胞比例及形態是否正常。02有無不成熟白細胞、有核紅細胞及異常細胞情況。03成熟紅細胞大小、形態、色素狀態(中心淡染、核殘余物、多嗜性RBC)及排列等情況。04血小板數量、形態及聚集性。05寄生蟲。5.外周血涂片報告單內容：復習患者病歷資料、實驗室檢查結果及治療情況肉眼觀察

涂片在染色前均需用肉眼觀察；以確定標本的取材、涂片是否“合格”，血膜厚薄，有無脂肪珠及“骨髓小粒”。12骨髓細胞形態檢查法取材、涂片、染色的好壞。

有核細胞多少(判定增生程度)及其分布；粒與紅系的比例及各階段比例的初步印象。

尋找異常細胞如轉移癌細胞等。

選擇油鏡檢查區域：要求能代表此涂片細胞的基本情況，有核細胞多，分布均勻，形態舒展、清晰易辨認。3.低倍鏡檢查油鏡檢查

觀察細胞形態及進行有核細胞分類計數。一般油鏡觀察區域在涂片血膜的體尾交界部位，分類計數時標本上下移動，驗證低倍鏡檢查所得的初步印象。通常計數200個有核細胞，特殊情況可計數400或500個有核細胞，增生低下或有核細胞甚少時，可分類計數100個有核細胞。在油鏡觀察中，通過血細胞工作站對有代表性的細胞區域采集圖象并入庫保存（見血細胞工作站操作程序）。具體內容如下：骨髓有核細胞分類計數，以百分率(%)表示，計算各系所占百分比和粒紅比例(M/E)。粒系：計算粒系所占%及各階段比例；觀察核移向(左移、右移)及形態的改變(巨幼變、雙核、P-H畸形、胞漿顆粒多少或有無)。紅系：計算紅系所占%及各階段比例；觀察形態有無異常(巨幼變、類巨幼變及雙核、多核、核分裂等殘余物)、多嗜性紅細胞多少、成熟紅細胞形態及排列等。淋巴細胞及單核細胞比例及形態有無異常巨核系：

外周血血小板數量正常時(100-300×109/L),一般不做巨核細胞計數；當PLT＞500×109/L時，應計數全片的巨核細胞數量，但無需分類；當PLT＜100×109/L，要計數全片巨核細胞，分類50個巨核細胞(或換算成%)，并注明有無血小板生成。注意病理性巨核細胞(巨大異常巨核、亞小型、小型、微型巨核),計數100個有核細胞中的病理性小型、微型及亞小型巨核細胞的數量。注意血小板量與質(形態、大小、聚集性等)的改變。A非造血細胞的種類和數量：此類多在涂片尾部或邊緣處，分類計數結果可能比實際低。B異常細胞：如轉移瘤細胞、高雪氏細胞、N-P細胞、惡組細胞等。010203取材涂片及染色情況。骨髓增生程度及主要成分，一般用M/E表示。粒系：增生情況及所占%，各階段比例，核移向(左移、右移)形態發育與異常改變，嗜酸性及嗜堿性細胞情況。5.骨髓涂片檢查報告單內容：01紅系:增生情況及所占%,各階段比例，形態有無異常(如巨變、類巨幼變、分裂相、核殘余物、雙核、多核等)及成熟紅細胞形態。02淋巴及單核細胞：數量和形態是否有異常。03巨核系：數量、分類及形態有無異常，產血小板情況；血小板形態和數量。04漿細胞：形態與數量，有無不成熟或病理性漿細胞。05造血與非造血細胞島及非造血細胞增生情況。涂片中有無巨大異型及腫瘤細胞等。寄生蟲。結論:診斷、印象和建議。附錄:

1.骨髓增生程度標準:增生度標準紅(無核)細胞:有核細胞增生極度活躍增生明顯活躍增生活躍增生尚活躍增生低下增生極度低下1-5:16-10:111-20:121-40:141-100:1100以上:12.骨髓細胞正常值:粒系原始0-1.0紅系原始0-0.5淋巴系原始早幼0.1-2.5早幼0-2.0幼稚0-0.6中性中幼3.18-13.2中幼3.77-13.0淋巴8.4-32.4晚幼5.22-20.2晚幼3.44-10.0其他組織0-1.0桿狀8.47-24.4巨核系原始吞噬0-0.1分葉6.12-25.0幼稚內皮0-0.2嗜酸性早幼顆粒巨0-0.2組堿0-0.1中幼0-1.1產板巨組酸0-0.1晚幼0-2.1裸核巨漿0-1.2桿狀0-1.1小原成纖分葉0-3.4小幼脂肪0-0.1嗜堿性早幼小巨中幼0-0.1單核系原始晚幼0-0.1幼稚桿狀0-0.1單核