2025屆上海市香山中學高二生物第一學期期末綜合測試模擬試題注意事項：1．答卷前，考生務必將自己的姓名、準考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應題目的答案標號涂黑，如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標號。回答非選擇題時，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．如圖所示是測定植物某一生命活動過程的裝置，從左側泵入空氣后，會產生某些實驗現象。下列說法中錯誤的是（）A.溫度是該實驗的一個無關變量B.本實驗裝置中乙瓶的作用是減少實驗誤差C.把不透光的玻璃罩換成透光的玻璃罩，實驗現象會更明顯D.如果將丙玻璃罩中的植物換成萌發的種子，則會出現相同的實驗現象2．在榕樹花期，榕果由于有苞片，可以防止非傳粉小蜂進入其內產卵。只有頭部楔形的傳粉小蜂才能鉆過苞片進入榕果交配、產卵，并幫助榕樹傳粉。楊氏榕樹金小蜂為一種非傳粉小蜂，但可以利用傳粉榕小蜂咬出的通道更快速地進入榕果并完成產卵。科研人員研究了進入榕果內產卵小蜂種類對榕果種子產量及小蜂產生后代數量的影響，統計相關數據，結果如下表所示。下列相關分析不正確的是（）榕果內產卵小蜂種類榕果內種子數量傳粉小蜂后代數量楊氏榕樹金小蜂后代數量傳粉榕小蜂5.5108.50楊氏榕樹金小蜂+傳粉榕小蜂10.010.580.7A.楊氏榕樹金小蜂與傳粉榕小蜂體型可能相似B.榕果內傳粉榕小蜂比楊氏榕樹金小蜂具有更強的資源競爭能力C.楊氏榕樹金小蜂進入榕果內產卵有助于榕樹傳粉D.傳粉榕小蜂與榕樹的關系為互利共生3．如圖為人體內甲狀腺激素分泌的調節過程，甲、乙、丙表示不同的器官，a、b、c表示三種不同的激素。下列敘述中，正確的是（）A.器官甲除分泌激素a外，還可以合成和分泌促胰島素B.a、b、c均靠體液傳輸，只運輸給靶器官和靶細胞C.激素c分泌增加，對器官甲、丙均有抑制作用D.器官丙還可以分泌生長激素，與激素c的作用為協同作用4．下列有關生態系統成分的敘述，正確的是（）A.自養生物都屬于生產者，都可以進行光合作用B.異養生物都是消費者，其中食草動物為初級消費者C.只有分解者能將有機物分解為無機物，是生態系統不可缺少的成分D.非生物的物質和能量是指陽光、熱能、水分、空氣、無機鹽等5．下列有關人類遺傳病的敘述，錯誤的是A.遺傳病患者不一定攜帶致病基因B.多基因遺傳病在群體中的發病率比較高C.攜帶遺傳病致病基因的個體一定患遺傳病D.基因突變是單基因遺傳病根本原因6．兩個不同的生態系統在同時受到同等強度的干擾（a）后，其結構和功能的曲線變化情況如圖所示，據圖不能得出的結論是（

）A.同等強度的干擾下，乙生態系統的抵抗力穩定性比甲強B.同等強度的干擾下，若乙生態系統干擾提前，則B點左移C.若甲生態系統的干擾強度增大，則C點右移D.圖中偏離正常運行范圍的程度可以體現恢復力穩定性的大小7．關于群落的理解正確的是（）A.竹林中竹子高低錯落有致，其在垂直結構上有分層現象B.自然狀態下，群落的演替結果是豐富度增加，恢復力穩定性也增加C.人類活動會干擾群落的演替速率，但不會改變演替方向D.群落的次生演替比初生演替速度快，起點與初生演替不同8．（10分）薩頓運用類比推理的方法提出基因在染色體的假說，摩爾根運用假說演繹法證明基因在染色體上。【詳解】A、薩頓運用類比推理法提出基因在染色體上的假說，A錯誤；B、摩爾根運用假說演繹法證明基因在染色體上，B正確；C、沃森、克里克經過大量的數據推理和科學研究在多位科學家的幫助下運用模型構建法，構建了DNA雙螺旋結構，C錯誤；D、艾弗里運用化學分析法證明DNA是遺傳物質，D錯誤。故選B。

下列敘述正確的是（）A.受精卵中全部遺傳物質的一半來自精子B.卵細胞形成過程中，所有細胞都進行不均等的胞質分裂C.人的一個次級精母細胞中有0或1或2條X染色體D.形成10個受精卵，至少需要10個精原細胞和10個卵原細胞二、非選擇題9．（10分）下表為培養某種微生物的培養基配方，請回答有關問題：KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素蒸餾水1．4g2．1g0．2g10．0g1．0g定容1000mL（1）根據配方可知該培養基只允許分解_________的細菌生長，從功能上看，這種培養基被稱作_____培養基。為防止雜菌污染，對培養基采用的滅菌方法是______________。（2）若要通過統計培養基中菌落數來估計樣品中的細菌數，上述培養基中還需要添加__________，接種時應采用__________法。該方法接種培養后的菌落如下圖，其中適合用于計數的平板是________。（3）某同學涂布平板時用0．lmL稀釋液，稀釋液的稀釋倍數為105，平板中測得菌落數分別為17、156、179、451、175，則每1mL樣品中的細菌數約是____個。從土壤中分離出分解尿素的細菌后，要對其作進一步的鑒定，可在上述培養基中加入___________。10．（14分）大多數病原體被皮膚和黏膜阻擋，漏網之魚進入體液，巡邏的吞噬作用的細胞會主動吞噬它們，如果突破了前兩道防線，特異性免疫就會發生，如圖：（1）人體免疫系統的組成包括_________________、_________________和免疫活性物質。上圖所示為_________________免疫的基本過程。參與該過程的免疫活性物質有______，B細胞接收的第一個信號就是病原體表面的標簽蛋白，稱為_________，第二個信號是上圖中____________（填數字）所示步驟的確認，此外還需要輔助性T細胞產生的免疫活性物質作用，才能開始增殖、分化。（2）上海傳染病預防專家張文宏認為，新冠病毒會像流感一樣長期和人類共存，因為它們的遺傳物質是RNA，容易_______________使機體原有的免疫防御能力降低。HIV（人類免疫缺陷病毒）攻擊的是在________發育成熟的T細胞，T細胞在兩種特異性免疫中都發揮作用，使患者喪失大部分特異性免疫功能。（3）現在很多婦女婚前接種HPV疫苗，能產生抗體的同時還產生_______，能維持較長時間。異體器官移植之前要進行配型．供體與受體的主要_________________有一半以上相同，才可進行移植，同時受體還需終身服用_________________以降低免疫排斥。11．（14分）2020年兩位女科學家埃瑪紐埃爾·卡彭蒂娜和詹妮弗·杜德娜因發現“CRISPR/Cas9基因剪刀”而獲得2020年諾貝爾化學獎。CRISPR/Cas9系統可對基因組進行定點編輯，其工作原理如圖1所示。該系統主要包含單鏈向導RNA和Cas9蛋白兩個部分，能特異性識別并結合特定的DNA序列，從而引導Cas9蛋白到相應位置并剪切DNA，最終實現對靶基因序列的編輯。請回答下列問題：（1）圖1為CRISPR/Cas9系統作用示意圖，該系統能精準識別相關基因的原理是sgRNA與目標DNA發生______，Cas9蛋白可催化_____(化學鍵名稱)水解，剪切特定DNA片段。（2）LMNA基因編碼的核纖層蛋白與維持細胞核正常形態有關。科研人員利用CRISPR/Cas9技術對體外培養的HepG2(人源肺癌細胞)細胞株進行基因編輯，獲得了LMNA基因敲除的穩定細胞系。①HepG2細胞中沒有編碼Cas9的基因，需將Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并與質粒結合導入HepG2細胞，sgRNA的合成需要______催化。②用下圖2中的質粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段構建表達載體時，應選用_______進行酶切。將構建好的表達載體與用______處理的細菌置于適宜反應體系中培養。然后將培養的細菌涂布于含______的平板培養基上，37℃培養，24h后挑取菌落，提取質粒作為模板，選擇圖3中引物組合________和______，通過PCR和電泳技術鑒定是否重組成功。③用鑒定成功的工程菌對HepG2細胞進行轉染，培養三天后收集HepG2細胞，提取基因組，對其______序列進行檢測，判斷Cas9-sgRNA拼接基因是否導入成功。若從細胞水平進行檢測，可以檢測HepG2細胞數目增長量或______。（3）華人科學家張鋒是首個將CRISPR基因編輯技術應用于哺乳動物和人類細胞的科學家，為此項技術廣泛應用于生命科學和醫學領域做出了不可磨滅的貢獻。但是更多的學者提出了CRISRP/Cas9基因編輯技術有時存在編輯對象出錯而造成“脫靶”，實驗發現sgRNA的序列長短影響成功率，越短脫靶率越______，脫靶最可能的原因是______。12．HIV屬于逆轉錄病毒，是艾滋病的病原體。回答下列問題：（1）從免疫學角度分析，艾滋病是一種_______病。被HIV侵染的T細胞產生于骨髓這一免疫器官，并在______________成熟。人體感染HIV后，人體的免疫系統能夠由_______產生抗體，用于對抗病毒。（2）人體感染HIV后，體溫維持在39℃，此時人體產熱量_______（大于、小于、等于）散熱量，人體還會出現呼吸急促、心率加快的臨床癥狀，調節此過程的中樞位于______________。（3）已知某種菌導致的肺炎在健康人群中罕見，但是在艾滋病患者中卻多發。引起這種現象的根本原因是HIV主要感染和破壞了患者的部分_______細胞，降低了患者免疫系統的防衛功能。（4）艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易發生惡性腫瘤，主要原因是人的免疫系統對癌細胞有______________的功能。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】如圖是測定植物某一生命活動過程的裝置，甲中氫氧化鈉的作用是除去空氣中的二氧化碳；乙中澄清石灰水的作用是檢測空氣中的二氧化碳是否被除凈；丙中植物在黑暗條件下只能進行呼吸作用；丁中澄清石灰水的作用是檢測細胞呼吸是否產生二氧化碳。【詳解】A、本實驗測定的是植物細胞的有氧呼吸，溫度是無關變量，實驗應在最適溫度條件下進行，A正確；B、乙裝置的作用是確保進入丙裝置的氣體中沒有CO2，減少實驗誤差，B正確；C、如果玻璃罩透光，則植物能進行光合作用和呼吸作用，呼吸作用產生的CO2被光合作用吸收，實驗現象會更不明顯，影響實驗結果的觀察，C錯誤；D、如果將丙玻璃罩中的植物換成萌發的種子，由于種子也能進行呼吸作用產生CO2，則實驗會出現相同的現象，D正確。故選C。2、B【解析】分析題意可知：榕樹依靠傳粉榕小蜂為之傳粉，傳粉榕小蜂在榕樹榕果中產卵，為其幼體唯一的棲息場所和食物來源，說明是互利共生關系；另外非傳粉楊氏榕樹金小蜂也將卵產在榕果內，說明傳粉榕小蜂和非傳粉楊氏榕樹金小蜂之間形成競爭關系。【詳解】根據“楊氏榕樹金小蜂可以利用傳粉榕小蜂咬出的通道更快速地進入榕果并完成產卵”可說明楊氏榕樹金小蜂與傳粉榕小蜂體型可能相似，A正確；傳粉榕小蜂單獨進入榕果內時，傳粉小蜂后代數量為108.5，而楊氏榕樹金小蜂+傳粉榕小蜂共同進入榕果內時，傳粉小蜂后代數量為10.5，可見榕果內楊氏榕樹金小蜂比傳粉榕小蜂具有更強的資源競爭能力，B錯誤；由表格數據，只有傳粉榕小蜂進入榕果產卵時，榕果內種子數量為5.5，而楊氏榕樹金小蜂+傳粉榕小蜂共同進入榕果產卵時，榕果內種子數量為10.0，說明楊氏榕樹金小蜂進入榕果內產卵也有助于榕樹傳粉，C正確；傳粉榕小蜂為榕樹傳粉，榕樹為傳粉榕小蜂的幼蟲提供營養，說明二者的關系為互利共生，D正確。故選B。【點睛】本題考查種間關系、共同進化等相關知識，意在考查考生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論的能力。3、C【解析】據圖分析：圖中甲表示垂體，乙表示甲狀腺，丙表示下丘腦，b表示促甲狀腺激素釋放激素，a表示促甲狀腺激素，c表示甲狀腺激素。【詳解】A、根據前面的分析可知，圖中器官甲為垂體，A錯誤；B、a、b、c均靠體液傳輸，運輸到全身各處，但是只作用于靶器官和靶細胞，B錯誤；C、寒冷或緊張時，激素c甲狀腺激素分泌增加，對甲垂體、丙下丘腦分泌激素a、b有抑制作用，C正確；D、器官丙為下丘腦，下丘腦不能分泌生長激素，生長激素是垂體分泌，D錯誤。故選C。4、D【解析】1.生態系統的結構包括生態系統成分和營養結構（食物鏈和食物網）。

生態系統中的成分有：①非生物的物質和能量：空氣、水、礦物質、陽光、熱能；②生產者：屬自養生物（主要是綠色植物）；是生態系統的主要成分；③消費者：屬異養生物（各種動物）；分類：初級消費者、次級消費者、三級消費者；④分解者：屬異養生物（細菌、真菌等營腐生生活的微生物），其作用為：分解動植物遺體、排出物和殘落物中的有機物為無機物歸還到無機環境。【詳解】A、自養生物都屬于生產者，但不都能進行光合作用，如硝化細菌，A錯誤；B、異養生物不都是消費者，如蚯蚓、禿鷲等為分解者，其中食草動物為初級消費者，B錯誤；C、分解者都是腐生生物，都是生態系統不可缺少的成分，但生物都能將有機物分解為無機物（細胞呼吸），C錯誤；D、生態系統的組成成分包括生產者、消費者、分解者和非生物的物質和能量，其中非生物的物質和能量是指陽光、熱能、水分、空氣、無機鹽等，D正確。故選D。5、C【解析】人類遺傳病分為單基因遺傳病、多基因遺傳病和染色體異常遺傳病：（1）單基因遺傳病包括常染色體顯性遺傳病（如并指）、常染色體隱性遺傳病（如白化病）、伴X染色體隱性遺傳病（如血友病、色盲）、伴X染色體顯性遺傳病（如抗維生素D佝僂病）、伴Y染色體遺傳病（如人類外耳道多毛）；（2）多基因遺傳病是由多對等位基因異常引起的，如青少年型糖尿病；（3）染色體異常遺傳病包括染色體結構異常遺傳病（如貓叫綜合征）和染色體數目異常遺傳病（如21三體綜合征）。【詳解】A、遺傳病患者不一定攜帶致病基因，如染色體異常遺傳病，A正確；B、多基因遺傳病在群體中的發病率比單基因遺傳病的高，B正確；C、攜帶遺傳病致病基因的個體不一定患遺傳病，如女性色盲基因攜帶者，C錯誤；D、單基因遺傳病的根本原因是基因突變，D正確。故選C。6、D【解析】系統具有自我調節能力，這是生態系統穩定性的基礎；負反饋調節是自我調節能力的基礎。在相同強度的干擾下，生態系統受到的影響大，說明其抵抗力穩定性低，偏離正常范圍越大，恢復需要的時間就越長。【詳解】A、從圖中可看出甲、乙兩個生態系統在受到干擾后，甲生態系統保持自身結構和功能原狀所需的時間長，波動范圍大，所以抵抗力穩定性差，乙抵抗力穩定性強，正確；B、若乙生態系統干擾提前，由于乙生態系統恢復自身原狀的周期不變，所以B點也會提前，正確；C、若甲生態系統的干擾強度增大，則甲生態系統恢復自身原狀所需要的時間更長，所以C點右移，正確；D、抵抗力穩定性是指生態系統抵抗外界干擾并使自身的結構和功能保持原狀的能力，所以抵抗力穩定性越大，受到相同程度的外界干擾時偏離正常范圍的距離越小，圖中偏離正常運行范圍的程度可以體現抵抗力穩定性的大小，錯誤。故選D。【點睛】抵抗力穩定性是指生態系統抵抗外界干擾并使自身的結構和功能保持原狀的能力。所以抵抗力穩定性越大，受到相同程度的外界干擾時偏離正常范圍的距離就越小，抵抗力穩定性越小，受到相同程度的外界干擾時偏離正常范圍的距離就越大；恢復力穩定性是指生態系統在遭到外界干擾因素的破壞后恢復到原狀的能力。所以恢復力穩定性越大，遭到外界干擾因素的破壞后恢復到原狀的的時間就越短；由于熱帶雨林生態系統的抵抗力穩定性大于草原生態系統的抵抗力穩定性，若所受干擾程度相同，則熱帶雨林生態系統的抵抗力穩定性大于草原生態系統。7、D【解析】1、群落垂直結構：在垂直方向上，大多數群落具有明顯的分層現象；植物的影響因素是光照，動物是食物和棲息空間。2、人類可以砍伐樹木，填湖造地、捕殺動物，也可以封山育林、治理沙漠、管理草原，甚至可以建立人工群落．人類活動往往會使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向進行。【詳解】A、竹林中的竹子是種群，不是群落，沒有垂直結構，A錯誤；B、自然狀態下，在演替過程中，物種豐富度增加，抵抗力穩定性增強，恢復力穩定性降低，B錯誤；C、人類的活動可使演替偏離其自然方向和速度，C錯誤；D、次生演替由于保留原有土囊條件或植物種子其他繁殖體，因此次生演替的速度比原生演替的速度快，D正確。故選D。【點睛】8、C【解析】受精作用是精子和卵細胞相互識別、融合成為受精卵的過程。精子的頭部進入卵細胞，尾部留在外面，不久精子的細胞核就和卵細胞的細胞核融合，使受精卵中染色體的數目又恢復到體細胞的數目，其中有一半來自精子，有一半來自卵細胞。【詳解】A、由于受精卵的細胞質幾乎都來自卵細胞，因此受精卵中的核遺傳物質一半來自精子，一半來自卵細胞，而細胞質遺傳物質幾乎都來自卵細胞，A錯誤；B、卵細胞形成過程中，只有初級卵母細胞和次級卵母細胞進行不均等的細胞質分裂，而第一極體細胞質均等分裂，B錯誤；C、人的精原細胞中的性染色體組成為XY，經過減數分裂產生的次級精母細胞中或含有X染色體、或含有Y染色體，處于減數第二次分裂前、中期次級精母細胞中含有0或1個X染色體，而處于減數第二次分裂后期的次級精母細胞中則可能含有兩條X染色體，因此，人的一個次級精母細胞中有0或1或2條X染色體，C正確；D、1個精原細胞減數分裂形成4個精子，1個卵原細胞減數分裂形成1個卵細胞。因此形成10個受精卵，至少需要3個精原細胞和10個卵原細胞，D錯誤。故選C。二、非選擇題9、①.尿素②.選擇③.高壓蒸汽滅菌④.凝固劑（或瓊脂）⑤.稀釋涂布平板法⑥.C⑦.1．7×l08⑧.酚紅指示劑【解析】1、選擇培養基是在培養基中加入相應的特殊營養物質或化學物質，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長。2、稀釋涂布平板法計數時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養基內。經培養后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統計菌落數目，即可計算出樣品中的含菌數。【詳解】（1）該培養基以尿素為唯一氮源，只允許分解尿素的細菌生長，這種培養基能篩選出分解尿素的細菌，故這種培養基稱為選擇培養基。為防止雜菌污染，常用高壓蒸汽滅菌法對培養基滅菌。（2）若要通過統計培養基中菌落數來估計樣品中的細菌數，需用固體培養基，故上述培養基中還需要添加的成分是凝固劑（或瓊脂），并采用稀釋涂布平板法接種。用稀釋涂布平板法測定細菌數時，在每一個梯度濃度內，至少要涂布3個平板，選擇菌落數在30～300的進行記數，因此圖中C平板適合用于計數。（3）某同學涂布平板時用0．lmL稀釋液，稀釋液的稀釋倍數為105，平板中測得菌落數分別為17、156、179、451、175，由于需要選擇菌落數在30～300的進行記數，因此每1mL樣品中的細菌數約=（156+179+175）÷3÷0.1×105=1.7×l08個。在上述培養基中加入酚紅指示劑，可對從土壤中分離出的分解尿素的細菌作進一步的鑒定。【點睛】明確選擇培養基的選擇作用，能識記培養基為微生物提供的營養成分，能識記常用的接種方法和具體操作過程，對于微生物培養技術的掌握及分解尿素的菌的分離和計數的掌握應用是解題的關鍵。10、（1）①.免疫器官②.免疫細胞③.體液④.細胞因子、抗體⑤.抗原或抗原決定簇⑥.④或③④（2）①.變異或突變②.胸腺（3）①.記憶細胞②.組織相容性抗原或人類白細胞抗原或HLA③.免疫抑制劑【解析】1、免疫系統的組成：免疫器官、免疫細胞（T、B淋巴細胞和吞噬細胞等）和免疫活性物質（抗體、細胞因子和溶菌酶等）。2、體液免疫：除少數抗原可以直接刺激B細胞外，大多數抗原被抗原呈遞細胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇，抗原呈遞細胞將抗原呈遞給輔助性T細胞，再由輔助性T細胞產生細胞因子作用于B細胞，B細胞接受兩個信號并在細胞因子的作用下，開始進行一系列的增殖、分化，形成記憶細胞和漿細胞，漿細胞分泌抗體與相應的抗原特異性結合，發揮免疫效應。【小問1詳解】人體免疫系統的組成：免疫器官、免疫細胞（T、B淋巴細胞和吞噬細胞等）和免疫活性物質（抗體、細胞因子和溶菌酶等）。由圖可知，該免疫過程有抗體的參與，因此上圖所示為體液免疫的基本過程。免疫活性物質有抗體、細胞因子和溶菌酶等，參與體液免疫的免疫活性物質有抗體和由輔助性T細胞分泌的細胞因子。少數病原體可以直接刺激B細胞，因此B細胞接收的第一個信號就是病原體表面的標簽蛋白，稱為抗原或抗原決定簇。大多數抗原被抗原呈遞細胞攝取和處理，并暴露出其抗原決定簇，抗原呈遞細胞將抗原呈遞給輔助性T細胞，再由輔助性T細胞產生細胞因子作用于B細胞，因此B細胞接收的第二個信號就是圖中的④或③④所示步驟。【小問2詳解】RNA一般是單鏈結構，容易發生變異或突變。T細胞在骨髓中生成，但需要遷移到胸腺中發育成熟。【小問3詳解】疫苗的本質是抗原，注射的疫苗進入機體后，會產生抗體和記憶細胞。器官移植是將某一個體的器官移植到自體或另一個體體內的手術方法，用正常器官代替病變器官，重建該器官正常的功能。器官移植容易失敗的一個重要原因是受體對供體器官存在免疫排斥反應，故需要受體終生服用免疫抑制劑以降低免疫排斥。供體與受體的主要組織相容性抗原或（人類白細胞抗原或HLA）有一半以上相同就可以進行移植了。【點睛】本題以新冠病毒為素材，考查免疫系統的組成、體液免疫的過程、RNA的結構、免疫學的應用等相關知識，意在考查考生的識記能力和理解能力。11、①.堿基互補配對②.磷酸二酯鍵③.RNA聚合酶④.EcoRI⑤.Ca2+（CaCl2）⑥.嘌呤霉素⑦.Ⅱ⑧.Ⅲ（兩空位置可調換）⑨.堿基(或核苷酸)⑩.細胞核形態?.高?.sgRNA（向導RNA）越短越容易與DNA其他部位錯誤結合而脫靶【解析】1.基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達載體的構建，③將目的基因導人受體細胞，④目的基因的檢測與鑒定。

基因工程的三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體。

標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。【詳解】（1）圖1為CRISPR/Cas9系統作用示意圖，該系統能精準識別相關基因的原理根據堿基互補配對原則實現的，即為sgRNA與目標DNA發生堿基互補配對，同時Cas9蛋白可催化磷酸二酯鍵的水解，從而在特定的部位剪切特定DNA片段。（2）科研人員利用CRISPR/Cas9技術對體外培養的HepG2(人源肺癌細胞)細胞株進行基因編輯，獲得了LMNA基因敲除的穩定細胞系。①HepG2細胞中沒有編碼Cas9的基因，需將Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并與質粒結合導入HepG2細胞，根據細胞中的RNA均來自轉錄過程推測sgRNA的合成需要RNA聚合酶的催化。②用下圖2中的質粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段構建表達載體時，應選用EcoRI進行酶切，因為在質粒和目的基因的兩端均含有該酶的切割位點，而BamH