食品安全地方標準茯苓1.范圍本文件規定了茯苓的術語和定義、技術要求、標簽、包裝、運輸和貯存。本文件適用于湖南地區生產的茯苓。2.規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB2762食品安全國家標準食品中污染物限量GB2763食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量GB4806.7食品安全國家標準食品接觸用塑料材料及制品GB5009.3食品安全國家標準食品中水分的測定GB5009.4食品安全國家標準食品中灰分的測定GB5749生活飲用水衛生標準GB/T6543運輸包裝用單瓦楞紙箱和雙瓦楞紙箱GB7718食品安全國家標準預包裝食品標簽通則GB14881食品安全國家標準食品生產通用衛生規范GB31621食品安全國家標準食品經營過程衛生規范JJF1070定量包裝商品凈含量計量檢驗規則原國家質量監督檢驗檢疫總局第75號（2005）令《定量包裝商品計量監督管理辦法》3.術語和定義下列術語和定義適用于本文件。茯苓：真菌茯苓Poriacocos(Schw.)Wolf的菌核，經采挖、去泥、清洗、去皮、切割、干燥等工序制成，用作食品加工原料。4.技術要求4.1原料要求茯苓：茯苓應新鮮、無蟲蛀、無霉變、無病斑，呈不規則團塊，大小不一。外皮薄而粗糙，棕褐色至黑褐色，有明顯的皺縮紋理。質堅實，斷面呈顆粒性，內部白色，少數淡紅色。4.2生產用水應符合GB5749的規定。4.3感官要求應符合表1規定。表1感官要求項目要求檢驗方法色澤外皮棕褐色至黑褐色，內部白色，少數淡紅色取適量樣品置于潔凈白色瓷盤中，在自然光線下質，嗅其氣味，用溫開水漱口后嘗其滋味氣味、滋味呈本品特有的氣味及滋味，無異味形態具有產品應有的形態，無霉變、無蟲蛀雜質無正常視力可見的外來雜質4.4理化指標應符合表2的規定。表2理化指標項目指標檢驗方法水分/（%）≤GB5009.3總灰分/（%以干基計）≤2.0GB5009.4第一法總三萜/（%）≥0.5茯苓酸/（%）≥0.054.5污染物限量污染物限量應符合GB2762中食用菌及其制品的規定。4.6農藥殘留限量農藥殘留限量應符合GB2763中食用菌的規定。4.7凈含量預包裝食品凈含量應符合原國家質量監督檢驗檢疫總局第75號（2005）令《定量包裝商品計量監督管理辦法》的要求，凈含量檢測應按照JJF1070的規定執行。5.生產加工過程中的衛生要求生產加工過程中的衛生要求應符合GB14881的規定。6.標簽、包裝、運輸、貯存6.1預包裝食品標簽應符合GB7718的規定。6.2產品內包裝應符合GB4806.7的規定，產品外包裝箱應符合GB/T6543的規定。6.3運輸和貯存應符合GB31621的規定。1.原理茯苓中三萜類物質在酸性條件下與香草醛反應生成藍紫色產物，在550nm波長下有最大吸收，吸收光度值與總三萜含量呈正比。2.試劑與材料除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規定的三級水。2.1無水乙醇（C2H5OH）。2.2高氯酸（HCLO4）。2.3冰醋酸（CH3COOH）。2.4甲醇（CH3OH）。2.55%香草醛-冰醋酸溶液：稱取香草醛5g，加入約70mL冰醋酸溶解，溶解后加冰醋酸定容至100mL。2.6齊墩果酸標準品：CAS號508-02-1，純度≥99%。2.7齊墩果酸標準儲備溶液：準確稱取105℃干燥至恒重的齊墩果酸標準品20mg（精確至0.1mg用甲醇溶解并定容至100mL。該標準液中齊墩果酸的質量濃度為200μg/mL，4℃冰箱密封保存，有效期1個月。3.儀器和設備3.1分析天平：感量為0.1mg。3.2分光光度計：配1cm比色皿，波長550nm。3.3水浴鍋：溫度控制范圍在60℃-100℃。3.4超聲波提取儀：500W。3.5離心機：8000r/min。3.6樣品粉碎機。3.70.425mm標準網篩。4.分析步驟4.1樣品制備取不少于200g具有代表性樣品，用樣品粉碎機粉碎，過0.425mm標準網篩，將樣品裝于密封容器中，0℃-20℃保存備用。4.2樣品提取稱取樣品0.5g（精準至0.0001g）至250mL具塞錐形瓶中，準確加入無水乙醇50mL，蓋緊塞子，搖勻，置于超聲波提取儀中超聲提取1h，其間經常搖動，提取后混合均勻，取適當體積于8000r/min的離心機中離心10min，取上清液作為樣品提取液備用。4.3測定4.3.1標準曲線準確移取齊墩果酸標準儲備溶液0mL、0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL，置于10mL試管中，標準品質量分別為0μg、20μg、40μg、60μg、100μg，將試管置于溫度為90℃-100℃水浴鍋中揮干溶劑，加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.1mL、高氯酸0.8mL，混勻后于60℃水浴中顯色20min，取出后迅速置于冰水浴中冷卻3min-5min，終止顯色反應，再加入5.0mL冰醋酸，混勻，室溫放置10min，立即用1cm比色皿，以0管調節零點，于波長550nm處測定吸光度。以齊墩果酸標準品質量為縱坐標、吸光度為橫坐標，繪制標準曲線。4.3.2樣品測定準確移取適量體積樣品提取液于10mL試管中，置于溫度為90℃-100℃的水浴鍋中揮干溶劑，以下操作同4.3.1，同時做試劑空白，并根據樣品提取液的吸光度計算總三萜含量。若樣品中總三萜含量測定值超出標準曲線范圍，應適當稀釋或增加移取體積后再次測定。5.試驗數據處理樣品中總三萜（以齊墩果酸計）的含量按式（1）計算：X=×100式中：X——樣品中總三萜的含量，單位為百分號（%）m1——從標準曲線上查的樣品反應液的總三萜的量（以齊墩果酸計），單位為微克(μg）V1——提取時準確加入的無水乙醇體積，單位為毫升（mL）f——樣品溶液稀釋倍數m2——樣品的質量，單位為克（g）V2——比色測定時移取的樣品提取液的體積，單位為毫升（mL）106——克換算成毫克的換算系數總三萜的測定結果以2次測定結果的算數平均值表示，測定結果小數點后位數的保留與方法檢出限一致，最多保留3位有效數字。6.重復性在重復性條件下獲得2次獨立測試結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。1.儀器與材料1.1儀器高效液相色譜儀系統，數控超聲波清洗器，紫外可見分光光度計，分析天平。1.2材料茯苓酸（質量分數≥98%）對照品，乙腈，甲醇（色譜純甲酸（分析純超純水。2.檢測方法2.1色譜條件色譜柱：C18柱（150mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-0.2%甲酸溶液（76∶24），流速：1.0mL/min；柱溫：32℃;檢測波長：222nm；進樣量：20μL。2.2對照品溶液的制備精密稱取對照品茯苓酸5.10mg至25mL量瓶，加甲醇溶解，配成每1mL含有茯苓酸0.204mg對照品溶液。2.3供試品溶液的制備取茯苓粉末（過60目篩）1g，精密稱定，移入50mL具塞錐形瓶中后，加入95%甲醇20mL，稱定質量，輕微振搖使粉末充分分散。于40℃超聲（360W，40kHz）處理30min，冷卻至室溫，再稱定質量，用甲醇補足減失的質量，吸取上清液，濾過，即得。用甲醇定容至1.0mL，得到系列濃度的混合對照品溶液。分別吸取上述混合對照品溶液20μL進樣，按上述色譜條件進樣測定，記錄峰面積，以峰面積值為縱坐標，對照品進樣濃度為橫坐標，進行線性回歸。測得茯苓酸的峰面積RSD（n=6）。再取同一份混合對照品溶液，按“2.1”項下色譜條件連續3d重復進樣2次，每次20μL，測得茯苓酸的峰面積RSD。2.