考點2動物細胞融合技術和單克隆抗體1.動物細胞融合技術（1）動物細胞融合（2）辨析動物細胞融合和植物體細胞雜交項目動物細胞融合植物體細胞雜交原理細胞膜的流動性、細胞增殖細胞膜的流動性、細胞的全能性前處理使細胞分散開除去細胞壁相關酶胰蛋白酶和膠原蛋白酶纖維素酶和果膠酶誘導方法物理法：電融合法；化學法：PEG融合法；生物法：滅活病毒誘導法物理法：電融合法、離心法等；化學法：PEG融合法、高Ca2＋—高pH融合法目的獲得雜交細胞獲得雜種植株意義和用途制備單克隆抗體，診斷、治療、預防疾病打破生殖隔離，實現遠緣雜交育種，培育植物新品種2.單克隆抗體及其應用技術手段動物細胞融合和動物細胞培養原理細胞膜的流動性和細胞增殖制備流程篩選目的第一次：獲得[6]雜交瘤細胞；第二次：獲得能產生所需抗體的雜交瘤細胞特點雜交瘤細胞：既能迅速大量增殖，又能產生[7]特異性抗體單克隆抗體：能準確地識別抗原的細微差別，與特定抗原發生特異性結合，并且可以大量制備應用①作為診斷試劑：利用同位素或熒光標記的單克隆抗體可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病。②運載藥物[如抗體—藥物偶聯物（ADC）]。③用于治療疾病基礎自測1.動物細胞融合過程中既有細胞膜融合也有核的融合。（√）2.動物細胞融合的結果是形成單核的雜種細胞，植物體細胞雜交的結果是得到雜種植株。（√）3.用特定的抗原對小鼠進行免疫后，從小鼠脾臟中只能得到一種B淋巴細胞。（×）4.單克隆抗體是單個B淋巴細胞增殖并產生的抗體。（×）5.單克隆抗體制備過程中的兩次篩選目的相同。（×）6.雜交瘤細胞進行體內培養，是為了獲得能產生單克隆抗體的胚胎。（×）深度思考1.為什么誘導動物細胞融合時要用滅活的病毒，而不用活病毒？誘導細胞融合的原理是什么？提示活病毒可能會感染細胞，而滅活的病毒不會感染細胞。誘導細胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發生融合。2.ADC在臨床應用上的作用機理是什么？提示其作用機理是通過單克隆抗體的靶向作用特異性地識別并結合腫瘤細胞表面的抗原，然后利用細胞本身具備的內吞作用使化學藥物進入腫瘤細胞內發揮作用，從而達到殺死腫瘤細胞的目的。研透高考明確方向命題點1動物細胞融合的過程分析1.細胞融合技術是研究細胞遺傳、細胞免疫等的重要手段，如圖A、B表示兩種動物細胞。下列有關說法錯誤的是（D）A.圖示過程與植物原生質體融合的基本原理相同B.仙臺病毒需要用紫外線等滅活使其失去感染能力C.圖中C細胞進行的細胞分裂方式為有絲分裂D.將A、B細胞等量混合誘導得到的融合細胞即為雜交細胞解析圖示過程為動物細胞的融合，該過程與植物原生質體融合的基本原理相同，都依賴于細胞膜的流動性，A正確；用來誘導動物細胞融合的病毒，需要用紫外線等滅活使其失去感染能力，B正確；圖中C細胞進行的細胞分裂方式為有絲分裂，C正確；將A、B細胞等量混合誘導得到的融合細胞可能有三種類型：AA型、BB型、AB型（雜交細胞），D錯誤。2.[2022江蘇，多選]如圖表示利用細胞融合技術進行基因定位的過程，在人—鼠雜種細胞中人的染色體會以隨機方式丟失，通過分析基因產物進行基因定位。現檢測細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關敘述正確的有（ACD）A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合B.細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人—人、人—鼠、鼠—鼠融合細胞C.芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色體上D.胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上解析加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合，A正確。細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均是在選擇培養基上進行篩選過的細胞，所以均是人—鼠雜交細胞，B錯誤。由題意可知，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，分析題圖可知，相關基因位于2號染色體上；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均含有11號染色體，故乳酸脫氫酶基因位于11號染色體上，C正確。只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅲ含有17號染色體，而Ⅰ、Ⅱ不含有17號染色體，故相關基因位于17號染色體上；Ⅰ、Ⅲ都有X染色體和11號染色體，都有磷酸甘油酸激酶活性，而Ⅱ不具有磷酸甘油酸激酶活性，故磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，D正確。命題點2單克隆抗體的制備和應用分析3.[2023北京]甲狀旁腺激素（PTH）水平是人類多種疾病的重要診斷指標。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，有關制備過程的敘述不正確的是（D）A.需要使用動物細胞培養技術B.需要制備用PTH免疫的小鼠C.利用抗原—抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞D.篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細胞解析在單克隆抗體制備過程中需要用到動物細胞培養技術，還需要制備用PTH免疫的小鼠，A、B正確；若要篩選能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，需要利用抗原—抗體結合的原理進行篩選，C正確；一般來說，單個雜交瘤細胞只能分泌一種抗體，D錯誤。4.[2023湖北節選，11分]某病毒對動物養殖業危害十分嚴重。我國學者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒，其主要技術路線如圖所示。回答下列問題：（1）添加脂溶性物質PEG可促進細胞融合，該過程中PEG對細胞膜的作用是改變細胞膜結構（使兩個細胞接觸處質膜的脂類分子發生疏散和重組）。（2）在雜交瘤細胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養基（如HAT培養基），該培養基對未融合的（親本）細胞和融合的具有同種核的細胞生長具有抑制作用。（3）單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，其目的是篩選能分泌與該病毒外殼蛋白A特異性結合的抗體的雜交瘤細胞。解析（1）聚乙二醇（PEG）分子能改變膜結構，使兩個細胞接觸處質膜的脂類分子發生疏散和重組，從而導致質膜相互親和、融合。（2）淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合后，有的細胞未融合，有的細胞已融合；融合細胞中有的是具有同種核的細胞，有的是具有不同種核的