1T/GDNBXXXX—2023豇豆中滅蠅胺的快速分析液相色譜-質譜聯用法本文件規定了豇豆中滅蠅胺的快速分析液相色譜-質譜聯用法。本文件適用于豇豆中滅蠅胺殘留量的高效液相色譜-質譜法的測定。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB2763—2021食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方法3原理試樣用乙腈（含15%乙酸，v%）提取，提取液經分散固相萃取凈化，液相色譜-質譜聯用儀檢測，外標法定量。4試劑和材料除非另有說明，在分析中僅使用分析純的試劑，水為GB/T6682規定的一級水。4.1試劑4.1.1乙腈（CH3CN，CAS號：75-05-8）：色譜純。4.1.2甲醇（CH3OH，CAS號：67-56-1）：色譜純。4.1.3甲酸（HCOOH，CAS號：64-18-6）：色譜純。4.1.4乙酸（CH3COOH，CAS號：64-19-7）。4.1.5甲酸銨（NH?HCO2，CAS號：540-69-2）：色譜純。4.1.6氯化鈉（NaCl，CAS號：7647-14-5）。4.1.7無水硫酸鎂（MgSO4，CAS號：7487-88-9）。4.2溶液配置4.2.1乙腈-乙酸溶液（85+15，體積比）：量取150mL乙酸，加入850mL乙腈中，混勻。4.2.2甲酸水溶液（999+1，體積比）：量取1mL甲酸，加入999mL水中，混勻。4.3標準品1000mg/L滅蠅胺標準溶液（純度≥95%）。4.4標準溶液配置4.4.1標準儲備溶液（100mg/L吸取一定量的1000mg/L滅蠅胺標準溶液于容量瓶中用乙腈（4.1.1）定容至刻度，避光-18℃及以下條件保存，有效期6個月。4.4.2標準工作溶液（10mg/L）：吸取一定量的100mg/L滅蠅胺標準溶液（4.4.1）于容量瓶中用乙腈（4.1.1）定容至刻度，避光-18℃及以下條件保存，有效期為3個月。4.5材料24.5.1乙二胺-N-丙基硅烷吸附劑（PSA）：粒徑40μm～60μm。4.5.2石墨化炭黑（GCB）：粒徑40μm～120μm。4.5.3陶瓷均質子：4mm（直徑），或相當者。4.5.4微孔濾膜（有機相）：13mm×0.22μm，或相當者。5儀器5.1高效液相色譜-串聯三重四級桿質譜儀，配備電噴霧離子源（ESI）。5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.3渦旋混合器。5.4離心機。5.5組織搗碎機。6試樣制備與儲存樣品測定部位按照GB2763—2021中附錄A的規定執行。豇豆隨機取樣1.5kg。取后的樣品將其切碎，充分混勻，用四分法取一部分或全部用組織搗碎機粉碎后，放入聚乙烯瓶中。將試樣按照測試和備用分別存放，于-18℃及以下條件保存。7分析步驟7.1樣品前處理稱取10g試樣（精確至0.01g）于50mL塑料離心管中，加入10mL乙腈（含15%乙酸，4.2.1）、1g氯化鈉、4g無水硫酸鎂和5顆陶瓷均質子，劇烈振蕩2min后以4500r/min離心5min。吸取上清液5mL于15mL塑料離心管中，管中加入15mgGCB、150mgPSA和835mg無水硫酸鎂，渦旋振蕩1min后以4500r/min離心5min。取1mL上清液過0.22μm尼龍濾膜，待測定。7.2測定7.2.1液相色譜參考條件a）色譜柱：C18，2.0mm（內徑）×50mm,粒徑1.6μm，或相當者；b）流動相：A相為甲酸水溶液（4.2.2），B相為乙腈（4.1.1），流動相梯度條件見表1；c）流速：0.4mL/min；d）柱溫：40℃;e）進樣量：1μL。表1流動相及梯度條件（VA+VB）05557.2.2質譜參考條件a）離子源類型：電噴霧離子源；b）掃描方式：正離子掃描；c）霧化氣：3L/min；d）干燥氣：10L/min；e）加熱氣：10L/min；3T/GDNBXXXX—2023f）離子源接口溫度：300℃;g）加熱塊溫度：400℃;h）脫溶劑溫度：250℃;i）多反應監測：滅蠅胺的保留時間、前體離子、產物離子及離子對質譜參數見表2。表2滅蠅胺的質譜檢測參數7.2.3基質匹配標準工作曲線選擇與被測豇豆樣品性質相同或相似的空白樣品按照7.1部分進行前處理，得到空白基質溶液。精確吸取一定量的滅蠅胺標準溶液，逐級用空白基質溶液稀釋成質量濃度為0.005mg/L、0.010mg/L、0.050mg/L、0.10mg/L、0.50mg/L和1.00mg/L的基質匹配標準工作溶液，根據儀器性能和檢測需要選擇不少于5個濃度點，供液相色譜-質譜聯用儀測定。以農藥定量用產物離子的質量色譜圖峰面積為縱坐標，相對應的基質匹配標準工作溶液質量濃度為橫坐標，繪制基質匹配標準工作曲線。7.2.4定性及定量7.2.4.1保留時間：被測試樣中滅蠅胺色譜峰的保留時間與相應標準色譜峰的保留時間相比較，相對誤差應在±2.5%之內。7.2.4.2離子豐度比：在相同實驗條件下進行樣品測定時，如果檢出的色譜峰的保留時間與標準樣品相一致，并且在扣除背景后的樣品質譜圖中，滅蠅胺選擇的產物離子均出現，而且同一檢測批次，樣品中滅蠅胺的離子豐度比與質量濃度相當的基質標準溶液相比，其允許偏差不超過表3規定的范圍，則可判斷樣品中存在滅蠅胺。表3滅蠅胺定性時離子豐度比的最大允許偏差>50>20~50>10~207.2.4.3定量：外標法定量。7.3試樣溶液的測定將基質匹配標準工作溶液和試樣溶液依次注入液相色譜-質譜聯用儀中，保留時間和離子豐度比定性，測得定量用產物離子的質量色譜圖峰面積，待測樣液中滅蠅胺的響應值應在儀器檢測的定量測定線性范圍之內，超過線性范圍時應根據測定濃度進行適當倍數稀釋后再進行分析。7.4平行試驗按以上步驟對同一試樣進行平行試驗測定。7.5空白試驗除不加試樣外，采用完全相同的測定步驟進行平行操作。8結果計算試樣中滅蠅胺殘留量以質量分數ω計，單位為毫克每千克（mg/kg按公式（1）計算。計算結果保留2位有效數字；含量超過1mg/kg時保留3位有效數字。 式中：ω——試樣中滅蠅胺殘留量的數值（mg/kgρ——從基質匹配標準工作曲線中得到的試樣溶液中滅蠅胺質量濃度數值（mg/LV——提取液體積的數值（mLm——試樣質量的數值（g）。9精密度在重復性條件下，獲得2次獨立結果的絕對差值不超過重復性限（r參見附錄A。在再現性條件下，獲得2次獨立結果的絕對差值不超過重復性限（R參見附錄A。本標準方法對滅蠅胺的定量限為0.010mg/kg。滅蠅胺標準溶液色譜圖如圖1所示。圖1