ICS65.020.30CCSB43DB50重 慶 市 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB50/T1461—2023地方豬遺傳材料冷凍保存技術(shù)規(guī)范2023-092023-091520231215重慶市市場監(jiān)督管理局?發(fā)布DB50/T1461—2023前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由重慶市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會提出、歸口并組織實(shí)施。IIDB50/T1461DB50/T1461—2023DB50/T1461—2023DB50/T1461—2023地方豬遺傳材料冷凍保存技術(shù)規(guī)范范圍本文件適用于地方豬精液、成纖維細(xì)胞和胚胎的冷凍保存。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB/T24862 畜禽體細(xì)胞庫檢測技術(shù)規(guī)程GB/T25172 豬常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)范NY/T1674 牛羊胚胎質(zhì)量檢測技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1900 畜禽細(xì)胞與胚胎冷凍保種技術(shù)規(guī)范3術(shù)語和定義3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1遺傳材料geneticmaterial含有畜禽基因組、基因等遺傳物質(zhì)的器官、組織、細(xì)胞、精子、卵母細(xì)胞和胚胎等的生物樣本。4基本要求供體應(yīng)健康，符合品種特征特性。可利用后備或淘汰母豬進(jìn)行胚胎回收。5冷凍精液供體數(shù)量33頭全部保存。保存的公豬精液應(yīng)覆蓋所有家系。系譜不清的保種群，宜保存10頭以上公豬，不足10頭全部保存。質(zhì)量要求有效精子數(shù)每支不低于5000萬個(gè)。130%。40%。1000CFU/mL。0.5mL細(xì)管凍精不低于300支。標(biāo)識與記錄在細(xì)管上標(biāo)明供體單位、品種、編號、家系和生產(chǎn)日期。A.1。品質(zhì)檢測GB/T25172的規(guī)定執(zhí)行。冷凍成纖維細(xì)胞供體數(shù)量3頭366頭全部保存。103010頭、母豬不足30頭全部保存。質(zhì)量要求質(zhì)量要求NY/T1900要求。3～461×105個(gè)/mL～5×105個(gè)/mL。80%以上，生長曲線與冷凍前生長曲線相近，核型正常，無病原菌和支原體污染。標(biāo)識與記錄在凍存管上標(biāo)明供體單位、品種、樣品編號、家系、性別、培養(yǎng)代數(shù)和冷凍日期等。A.2。6.4品質(zhì)檢測應(yīng)按照GB/T24862的規(guī)定執(zhí)行。7冷凍胚胎供體數(shù)量系譜清晰的保種群，用于胚胎收集的母豬和相應(yīng)的配種公豬應(yīng)覆蓋所有家系，每個(gè)家系的配種3頭，不足3頭全部參加配種；母豬不少于6頭，不足6頭不宜制作冷凍胚胎。2510頭。群體母豬數(shù)低于50頭，宜保存淘汰母豬胚胎。7.2質(zhì)量要求2回收的胚胎為首次配種后第6d和第7d的桑椹胚和囊胚。A級，檢測方法參照NY/T1674的規(guī)定執(zhí)行。標(biāo)識與記錄在胚胎凍存細(xì)管上標(biāo)明供體單位、品種、供體母豬號、與配公豬號、胚胎發(fā)育期、胚胎等級、冷凍方法、數(shù)量和冷凍日期等。A.3。入庫保存冷凍精液、成纖維細(xì)胞和胚胎應(yīng)符合本文件規(guī)定的質(zhì)量要求，浸沒于液氮中保存。檔案管理檔案記錄應(yīng)長期保存。33附錄A（規(guī)范性）遺傳材料冷凍保存的技術(shù)資料公豬精液冷凍記錄表。表A.1公豬精液冷凍記錄表品種： 制作地點(diǎn)： 制作日期：公豬原精原精稀釋離心后稀釋平衡凍精制作人備注耳號品種量/mL活力（%）密度億/mL稀釋倍數(shù)活力%密度億/mL預(yù)設(shè)密度億量mL平衡時(shí)間h平衡后活力%解凍后活力%支數(shù)袋數(shù)記錄人：記錄人：4成纖維細(xì)胞冷凍記錄表。表A.2成纖維細(xì)胞冷凍記錄表品種： 制作地點(diǎn)： 制作日期：耳號來源家系性別父號母號冷凍代次冷凍時(shí)間細(xì)胞密度個(gè)/ml冷凍管數(shù)支保存位置活力%細(xì)菌污染支原體污染制作人檢測人記錄人：記錄人：5胚胎冷凍記錄表。表A.3胚胎冷凍記錄表品種： 制作地點(diǎn)： 制作日期：供體母豬處理信息母豬供體號品種胎次上次分娩日期處理前發(fā)情日期超排與否超排方法發(fā)情與配種發(fā)情日期初配日期配種公豬號配種方式胚胎回收回收日期回收方式?jīng)_胚液名稱沖胚人員黃體數(shù)—左側(cè)： 右側(cè)：卵泡數(shù)—左側(cè)： 右側(cè)：其他：鮮胚數(shù)質(zhì)量評定可用胚胎數(shù)：不可用胚胎數(shù)：未受精總數(shù)等級EMMCMEBBLEXB總數(shù)2~8細(xì)胞退化ABC合計(jì)胚胎冷