鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵日期：2013.3.18實驗者：曾惜(2011222702)合作者:曾子夜（2011222702）一、實驗目的和要求掌握紫外可見分光光度計的基本操作；掌握鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的原理和方法；掌握吸收曲線繪制及最大吸收波長選擇；掌握標準曲線繪制及應用。二、實驗原理鄰二氮菲（1,10—鄰二氮雜菲）是一種有機配位劑，可與Fe2+形成紅色配位離子在pH=3~9范圍內，該反應能夠迅速完成，生成的紅色配位離子在510nm波長附近有一吸收峰，摩爾吸收系數為1.1×104，反應十分靈敏，Fe2+濃度與吸光度符合光吸收定律，適合于微量鐵的測定。實驗中，采用pH=4.5-5的緩沖溶液保持標準系列溶液及樣品溶液的酸度；采用鹽酸羥胺還原標準儲備液及樣品溶液中的Fe3+并防止測定過程中Fe2+被空氣氧化。三、實驗儀器與試劑1.752S型分光光度計2.標準鐵儲備溶液（1.00×10-3mol/L）3.鄰二氮菲溶液（0.15%，新鮮配制）4.鹽酸羥胺溶液（10%，新鮮配制）5.NaAC緩沖溶液6.50ml容量瓶7個8.1cm玻璃比色皿2個9.鐵樣品溶液四、實驗步驟標準系列溶液及樣品溶液配制，按照下表配制鐵標準系列溶液及樣品溶液。編號1234567(鐵樣品溶液)1.00×10-3mol/L標準鐵溶液0.00ml1.00ml2.00ml3.00ml4.00ml5.00ml2.50ml10%鹽酸羥胺溶液1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml0.15%鄰二氮菲溶液5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00mlNaAC緩沖溶液5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml說明以上溶液均用移液管移取至50ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度并搖勻。系列標準溶液濃度0.00mol/ml0.02mol/ml0.04mol/ml0.06mol/ml0.08mol/ml0.10mol/ml——2、吸收曲線繪制用1cm比色皿，以1號溶液作為參比溶液，測定4號溶液在各個波長處的吸光度，繪制吸收曲線，并找出最大吸收波長。繪圖如下：測定波長480nm482nm484nm486nm488nm490nm492nm494nm496nm498nm吸光度0.5580.5790.5980.5740.5710.5850.5850.5850.5910.603測定波長500nm502nm504nm506nm508nm510nm512nm514nm516nm518nm吸光度0.6030.6310.6140.6140.6200.6280.6160.6370.6160.059測定波長520nm522nm524nm526nm528nm530nm532nm534nm536nm538nm吸光度0.5740.5550.5310.5190.4930.4600.4200.3910.3720.451選擇的最大吸收波長為：λmax=514nm標準曲線制作在選定最大吸收波長處，用1cm比色皿，以1號溶液作為參比溶液，分別測定2至7號溶液的吸光度，平行測定3次，計算吸光度平均值，繪制標準曲線。編號234567（樣品溶液）吸光度A10.2090.4300.6430.8621.0850.499吸光度A20.2110.4480.6500.8701.0890.505吸光度A30.2050.4300.6470.8711.0880.500A平均值0.2080.4360.6670.8681.0870.501繪制標準曲線：五、實驗數據處理樣品溶液中鐵含量的計算根溶液7號樣品溶液吸光度測定平均值，在坐標曲線上采用作圖法求出其對應的濃度值，采用下式計算樣品溶液中鐵的含量：Cx=C讀取值×=0.045×20=0.90平均值×10-3mol/L2、摩爾吸光系數計算在標準曲線的直線部分選擇量兩點，讀取對應的坐標值，計算鄰二氮菲配位物在最大吸收波長出的摩爾吸光系數：==1.1x104六、討論比色皿在換裝不同濃度的溶液時，必須用待測的溶液潤洗至少三次。注意分光光度計的正確操作。比色皿放入分光光度計樣品室錢，必須用吸收紙將表面擦拭干凈。4、實驗計算紅色配位物的摩爾吸光系數與文獻值一致。影響成敗的關鍵可能有：標準液和樣品液的配