碳酸氫銨對小鼠的ld50及可信性研究

碳酸氫銨（俗稱臭粉）是食品行業中應用廣泛的緩解劑。配方為ch5no3。碳酸氫銨在食品加工過程中,產生出氨和二氧化碳,可以使食物變得膨松。由于限制明礬的使用,所以在食品中常用碳酸氫銨來替代,實際使用時與碳酸氫鈉合用,可作面包、餅干、煎餅等膨松劑的原料,亦用作發泡粉末果汁的原料;還可用于綠色蔬菜、竹筍等燙漂,以及醫藥及試劑;發酵粉亦以本品為主要成分,配以酸性物質;碳酸氫銨也可作為肥料。經研究它會對皮膚、眼和呼吸系統造成刺激。此外,在油炸和烘烤過程中形成的丙烯酰胺,經大量的試驗動物研究證明它屬于中等毒性物質,主要引起神經毒性,現沒有證據證明人體在丙烯酰胺暴露量下與癌癥發生率有直接關系。為了日常生活中安全使用碳酸氫銨,本試驗進行急性毒性試驗研究。1材料和方法1.1材料表面碳酸氫銨:天津市天力化學試劑有限公司,分析純。試驗動物:昆明種小鼠,體重20~25g。1.2方法1.2.1動物死亡情況觀察找出0(Dn)和100%(Dm)估計致死劑量。取20只小鼠,按性別分類后,根據體重隨機分為5組。禁食24h。配制系列濃度的碳酸氫銨,以各濃度的0.02mL·10g-1給每只小鼠一次性腹腔注射,連續觀察7d,記錄動物的死亡情況。根據觀察結果,當出現4/4死亡時,如其前一組為3/4死亡,則取4/4組的劑量為Dm,如前一組為2/4或1/4死亡,考慮到4/4組的劑量在正式實驗中可能的死亡率低于70%,為慎重起見,可將4/4組的劑量乘以2作為Dm;當出現0/4死亡時,如其后一組的死亡率為1/4,則取0/4組的劑量為Dn,如后一組死亡率大于1/4,考慮到0/4組的劑量在正式實驗中可能的死亡率高于70%,則將0/4組的劑量除以2,作為Dn。采用此方法,確定碳酸氫銨的Dm、Dn分別為495mg·kg-1和369mg·kg-1。1.2.2試驗1,碳酸氫銨劑量試驗取體重20~25g左右的小鼠40只,按體重隨機分成4組,每組10只,雌雄各半。劑量比值根據公式設為0.907,碳酸氫銨各組劑量分別為495mg·kg-1、449mg·kg-1、407mg·kg-1和369mg·kg-1。試驗前禁食24h,正常給水。按0.2mL·10g-1腹腔注射一次性給藥。1.3觀察指標給藥后,連續觀察7d,詳細記錄不同濃度梯度下小鼠每天的死亡數和時間,及出現的異常現象。1.4ld50的標準誤用、可信限及測量方法統計各組小鼠死亡數,計算死亡率(p),按孫氏改良寇氏公式[7~9],計算LD50值;lgLD50的標準誤按(2)式計算;LD50的95%可信限按(3)式計算。其中:Xm為最大劑量的對數;i為相鄰兩組高劑量與低劑量之比的對數;p為各組死亡率(以小數表示);Σp為各組動物死亡率的總和。2結果與分析2.1小鼠死亡數及死亡時間對小鼠的影響給藥后,小鼠暫時出現不進食,呼吸困難,煩躁不安等癥狀,小鼠死亡前劇烈抽搐、渾身發抖、在鼠籠中亂撞,直到死去,死后眼睛、尾巴均發黑,且尸體僵硬。存活小鼠10min后開始進食,以后均未出現行為異常。各組小鼠死亡數和死亡時間見表1,從表1可看出,給藥后小鼠在3d內死亡,后4d小鼠未見死亡。雄性小鼠的死亡數多于雌性小鼠。2.2可信限碳酸氫銨半數致死量試驗原始數據和計算資料見表2,按照表內數據和計算公式(1)、(2)和(3)得出:Sm=0.00648,X50=2.6671LD50的95%可信限為:452.2~478.40mg·kg-1。3碳酸氫銨的安全性LD50值是以動物死活的質反應為指標的毒性數據,此數值可作為衡量藥物毒性或效應大小的常用指標。半數致死量與毒性成反比,致死量越大毒性越小,致死量越小毒性越大。已知碳酸氫銨對小鼠靜脈注射的LD50值為245mg·kg-1,我們測得LD50小鼠經腹腔注射的為463.6mg·kg-1,因此碳酸氫銨具有毒性。碳酸氫銨分解全部是氣體,無殘渣,沒潛在的污染性,實際碳酸氫銨的