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ABO血型鑒定實(shí)驗(yàn)1實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸鞟BO血型鑒定血型就是紅細(xì)胞膜上特異抗原的類型。在ABO血型系統(tǒng)中,紅細(xì)胞膜上抗原分A和B兩種抗原,而血清抗體分抗A和抗B兩種抗體。A抗原加抗A抗體或B抗原加抗B抗體,則產(chǎn)生凝集現(xiàn)象。血型鑒定是將受試者的紅細(xì)胞加入標(biāo)準(zhǔn)A型血清(含有抗B抗體)與標(biāo)準(zhǔn)B型血清(含有抗A抗體)中,觀察有無(wú)凝集現(xiàn)象,從而測(cè)知受試者紅細(xì)胞膜上有無(wú)A或/和B抗原。在ABO血型系統(tǒng),根據(jù)紅細(xì)胞膜上是否含A、B抗原而分為A、B、AB、O四型,如表1。表1血型紅細(xì)胞膜上所含的抗原血清中所含的抗體O無(wú)A和B抗A和抗BAA抗BBB抗AABA和B無(wú)抗A和抗B2實(shí)驗(yàn)器材和藥品(1)器械采血針,消毒注射器,雙凹玻片,小試管,竹簽,棉球,臘筆,桌椅。(2)藥品標(biāo)準(zhǔn)A血清,標(biāo)準(zhǔn)B血清,生理鹽水,75%酒精,碘酒。3實(shí)驗(yàn)步驟3.1玻片法ABO血型鑒定(1)取雙凹玻片一塊,用干凈紗布輕拭使之潔凈,在玻片兩端用臘筆標(biāo)明A及B,并分別各滴入A及B標(biāo)準(zhǔn)血清一滴。(2)細(xì)胞懸液制備從指尖或耳垂取血一滴,加入含1ml生理鹽水的小試管內(nèi),混勻,即得約5%紅細(xì)胞懸液。采血時(shí)應(yīng)注意先用75%酒精消毒指尖或耳垂。(3)用滴管吸取紅細(xì)胞懸液,分別各滴一滴于玻片兩端的血清上,注意勿使滴管與血清相接觸。(4)竹簽兩頭分別混合,攪勻。(5)10~30min后觀察結(jié)果。如有凝集反應(yīng)可見(jiàn)到呈紅色點(diǎn)狀或小片狀凝集塊浮起。先用肉眼看有無(wú)凝集現(xiàn)象,肉眼不易分辨時(shí),則在低倍顯微鏡下觀察,如有凝集反應(yīng),可見(jiàn)紅細(xì)胞聚集成團(tuán)。(6)判斷血型根據(jù)被試者紅細(xì)胞是否被A,B型標(biāo)準(zhǔn)血清所凝集,判斷其血型。圖14注意事項(xiàng)4.1ABO血型鑒定(1)所用雙凹玻片的試管實(shí)驗(yàn)前必須清洗干凈,以免出現(xiàn)假凝集現(xiàn)象。(2)A及B標(biāo)準(zhǔn)血清絕對(duì)不能相混,所用滴管上貼橡皮膏標(biāo)明A及B、紅細(xì)胞懸液滴管頭不能接觸標(biāo)準(zhǔn)血清液面,竹簽一端去混勻一側(cè)就不能去接觸另一側(cè)。5結(jié)果與分析5.1ABO血型鑒定實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3所示,該被測(cè)者血液遇抗A血清凝集抗B血清補(bǔ)凝集,故該被測(cè)者血液中紅細(xì)胞有A抗原,無(wú)B抗原,由此判斷該被測(cè)者血型為A型。圖46思考題6.1在無(wú)標(biāo)準(zhǔn)血清情況下已知某人為A或B型,用其血去檢查未知血型的方法如下:已知A或B型血中僅含有A或B抗原,則向未知血型的血樣中滴加A或B型血時(shí)若均凝集最則為AB型,若均不凝集則為O型,若加入A凝集而B(niǎo)不凝集則為A型,否則為B型。6.2交叉配血時(shí)若主側(cè)不凝集而次側(cè)凝集可以少量輸血,其原因主要是:最常見(jiàn)的嚴(yán)重溶血反應(yīng),多因受血者血清中的血型抗體(凝集素)作用于輸入紅細(xì)胞膜上的抗原而引起,并非因輸入血清中的血型抗體作用于受血者的紅細(xì)胞所致,而交叉配血中的主次側(cè)為:將供血者的紅細(xì)胞與受血者的血清(主側(cè))及受血者的紅細(xì)胞與供血者的血清(次側(cè)),分別做配血試驗(yàn),觀察有無(wú)凝集反應(yīng)。由于輸入的血型抗體可被受血者的血漿稀釋,并可被固定組織抗原中和而失效。故臨床上配血,主要檢查供血者紅細(xì)胞膜上的血型抗原與受血者血清中的血型抗體是否發(fā)生凝集反應(yīng)。交叉配血的兩側(cè)均無(wú)凝集反應(yīng),為配血相合,可以輸血。主側(cè)出現(xiàn)凝集反應(yīng),為配血不合,不能輸血,主側(cè)無(wú)凝集反應(yīng)
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