食品微生物學(xué)檢驗(yàn)徐州質(zhì)檢所李美桃基本內(nèi)容菌落總數(shù)測定大腸菌群測定霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)罐頭食品商業(yè)無菌的檢驗(yàn)乳酸菌飲料中乳酸菌檢驗(yàn)涂抹試驗(yàn)和空降試驗(yàn)菌落總數(shù)測定定義食品檢樣經(jīng)過處理,在一定條件下培養(yǎng)后(如培養(yǎng)基成分,培養(yǎng)溫度和時(shí)間,PH,需氧性質(zhì)等)所得1ml(g)檢樣中所含菌落的總數(shù).本方法規(guī)定的培養(yǎng)條件下所得結(jié)果,只包括一群在營養(yǎng)瓊脂上生長發(fā)育的嗜中溫需氧的菌落總數(shù)意義菌落總數(shù)主要作為判定食品被污染程度的標(biāo)志,也可以觀察細(xì)菌在食品中繁殖的動(dòng)態(tài),以便對被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù).菌落總數(shù)測定cfu:colony-formingunits菌落形成單位,一個(gè)細(xì)菌在平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基上生長形成肉眼可見的菌落。菌落總數(shù)測定檢樣做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液選擇2-3個(gè)適宜稀釋度,各取1m分別加入滅菌平皿內(nèi)每皿內(nèi)加入適量營養(yǎng)瓊脂,36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h菌落計(jì)數(shù)整個(gè)操作過程都要在無菌狀態(tài)下進(jìn)行報(bào)告菌落總數(shù)測定測定過程中的一些要求和規(guī)定()所用器皿和稀釋液檢驗(yàn)中所用器皿必須是完全滅菌的,在滅菌前應(yīng)洗刷干凈,不得殘留抑菌物質(zhì)用作樣品稀釋的液體每批都要有空白對照.檢樣的稀釋液可以用滅菌生理鹽水或蒸餾水,最好使用磷酸緩沖液.菌落總數(shù)測定測定過程中的一些要求和規(guī)定(二)檢樣稀釋檢樣稀釋時(shí)應(yīng)以無菌手續(xù)稱取(或量取)有代表性的樣品,經(jīng)充分振搖混勻后作成1:10的稀釋液根據(jù)檢樣的具體情況,做幾個(gè)適當(dāng)?shù)蘑?倍遞增稀釋液.注意每遞增稀釋一次,必須換一支滅菌吸管.稀釋過程中要注意無菌操作防止在稀釋過程中受到外界的污染菌落總數(shù)測定測定過程中的一些要求和規(guī)定(二)平板接種和培養(yǎng)將稀釋液加入滅菌平皿內(nèi)時(shí),應(yīng)選擇2-3個(gè)適宜稀釋度,在作10倍遞增稀釋的同時(shí)吸取1m加入平皿內(nèi)營養(yǎng)瓊脂應(yīng)預(yù)先加熱融化,保溫于45℃左右的恒溫水浴中待用檢液加入平皿后,應(yīng)在20分鐘內(nèi)傾入營養(yǎng)瓊脂,并立即混合均勻瓊脂凝固后,應(yīng)在數(shù)分鐘內(nèi)翻轉(zhuǎn)培養(yǎng),這樣可以避免菌落蔓延生長為了控制污染,在檢驗(yàn)的同時(shí),于工作臺(tái)上打開一塊瓊脂平板,其暴露的時(shí)間應(yīng)與該檢樣從制備,稀釋到加入平皿時(shí)所用的最長時(shí)間相然后與加有檢樣的平皿一并置于溫箱內(nèi)培養(yǎng)培養(yǎng)溫度應(yīng)根據(jù)食品種類而定菌落總數(shù)測定測定過程中的一些要求和規(guī)定(四)對照試驗(yàn)加入平皿內(nèi)的檢樣稀釋液,有時(shí)帶有食品顆粒.為了避免混淆,可做一檢樣稀釋液與瓊脂混合的平皿,不經(jīng)培養(yǎng),而于4℃環(huán)境中放置,以便在計(jì)數(shù)時(shí)做對照.為了防止檢樣中食品顆粒與菌落混淆也可在已溶化而保溫于45℃水浴內(nèi)的瓊脂中,每100m加入1m|05%氯化三苯四氮唑(TTC)水溶液培養(yǎng)后如系食品顆粒,不變化如為細(xì)菌,則生成紅色菌落菌落總數(shù)測定菌落計(jì)數(shù)選取菌落數(shù)在30-300之間的平板作為菌落總數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn).一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板,應(yīng)采用兩個(gè)平板平均數(shù)菌落數(shù)的報(bào)告菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí),按其實(shí)有數(shù)報(bào)告;