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文檔簡介

實驗五網織紅細胞計數1一、試管法

【目的】掌握網織紅細胞試管法的原理及操作方法。

【原理】網織紅細胞胞質內殘存少量核蛋白體和核糖核酸(RNA)等嗜堿性物質,經煌焦油藍或新亞甲藍等染液活體染色后呈藍色網織狀或點粒狀,可與完全成熟的紅細胞區別。2【操作】1.加染液2.加血染色3.制備涂片4.觀察5.計數6.計算7.報告方式3

【注意事項】1.染液質量直接影響網織紅細胞計數的準確性。煌焦油藍染液長期普遍應用,但溶解度低,易形成沉渣吸附于紅細胞表面;新亞甲藍對Ret染色力強且穩定,是WHO推薦使用的染液。試劑應定期配制,以免變質沉淀。瑞氏染液復染可使網織紅細胞數值偏低。

2.染色時間不能過短,室溫低時,可放置37℃溫箱或適當延長染色時間。染液與血液的比例以1∶1為宜。4

3.因網織紅細胞在體外仍繼續成熟,其數量隨著保存時間的延長而遞減,所以標本采集后應及時處理;標本染色后也應及時測定,因染料吸附可人為增高網織紅細胞計數值。

4.選擇紅細胞分布均勻、網織紅細胞著色好的部位計數。由于網織紅細胞體積較大,故應兼顧血片邊緣和尾部。5二、玻片法

【目的】掌握網織紅細胞玻片法的原理及操作方法。

【原理】網織紅細胞胞質內殘存少量核蛋白體和核糖核酸(RNA)等嗜堿性物質,經煌焦油藍或新亞甲藍等染液活體染色后呈藍色網織狀或點粒狀,可與完全成熟的紅細胞區別。6【操作】1.加染液

2.加血液

3.制備涂片

4.觀察

5.計數

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