風濕免疫性疾病相關自身抗體抗核抗體譜（ANAs）類風濕關節炎相關抗體(RF,抗CCP等)抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）抗自身免疫性肌炎譜自身免疫性肝病相關抗體譜抗磷脂抗體譜當前第1頁\共有54頁\編于星期三\5點抗核抗體譜檢測的意義有助于彌漫性結締組織病的分類和診斷抗Sm抗體是SLE的標記抗體；抗Scl-70抗體是SSc的標記抗體；抗Jo-1抗體是PM/DM的標記抗體；觀察疾病活動度和治療反應抗dsDNA抗體研究發病機理抗核小體抗體、抗dsDNA抗體當前第2頁\共有54頁\編于星期三\5點基本概念ANA熒光核型ANAs中的常見抗體當前第3頁\共有54頁\編于星期三\5點抗核抗體自身抗體：指抗自身組織、器官、細胞及其成分的抗體ANA：指抗細胞核成分（DNA，RNA，蛋白質和酶）的抗體。ANA存在一個譜。ANA新概念：抗核酸(Nucleicacid)和核蛋白(Nucleoprotein)抗體總稱某些核抗原成分在核仁和胞漿內比核質內更豐富

(如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)當前第4頁\共有54頁\編于星期三\5點ANA檢測方法-IIF法ANA滴度ANA核型當前第5頁\共有54頁\編于星期三\5點ANA滴度的意義結締組織病的粗篩（>1:160）陽性標本還需進一步識別感染、腫瘤及5%正常人可出現低滴度陽性ANA陰性基本可以除外SLEANA滴度與疾病活動性無明確相關性當前第6頁\共有54頁\編于星期三\5點熒光顯微鏡下ANA的染色型別均質型（H）核膜型（M)斑點型（S）核仁型（N）著絲點型（ACA）胞漿型（C）混合型當前第7頁\共有54頁\編于星期三\5點均質型(H)抗組蛋白抗ds/ssDNA抗核小體主要出現在SLE中當前第8頁\共有54頁\編于星期三\5點均質型

(H)當前第9頁\共有54頁\編于星期三\5點核膜型

(M)主要與抗dsDNA有關與抗原底物片固定方法和備制過程有關出現在SLE中部分與抗核包膜蛋白有關抗板層素抗gp210出現在PBC中

當前第10頁\共有54頁\編于星期三\5點核膜型

(M)當前第11頁\共有54頁\編于星期三\5點與抗ENA成分有關抗Sm抗RNP抗SS-A抗SS-B出現在SLE、MCTD、pSS、SSc、PM/DM等

斑點型(S)當前第12頁\共有54頁\編于星期三\5點斑點型(S)當前第13頁\共有54頁\編于星期三\5點與抗核仁蛋白有關抗Scl-70抗RNA多聚酶I抗PM-Scl出現在SSc中核仁

型(N)當前第14頁\共有54頁\編于星期三\5點核仁

型(N)當前第15頁\共有54頁\編于星期三\5點與抗著絲點染色質有關存在于有絲分裂期出現在SSc、CREST綜合征等中著絲點

型(ACA)當前第16頁\共有54頁\編于星期三\5點著絲點

型(ACA)當前第17頁\共有54頁\編于星期三\5點與抗胞漿成分有關抗核糖體P蛋白（rRNP）：出現在SLE中抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ抗信號識別顆粒（SRP)抗線粒體：出現在PBC中抗高爾基體抗溶酶體等等

胞漿型

(C)見于PM/DM當前第18頁\共有54頁\編于星期三\5點

胞漿型(C)當前第19頁\共有54頁\編于星期三\5點ANA熒光核型小結均質型（H）：像大餅，SLE相關核膜型（M)：像圈圈，SLE相關斑點型（S）：像藕片，抗ENA核仁型（N）：像紐扣，SD相關著絲點型（ACA）：像滿天星，抗ACA胞漿型（C）：像空心大餅,SLEPM/DMPBC相關混合型：稀釋后檢測有助于區分當前第20頁\共有54頁\編于星期三\5點抗核抗體譜（ANAs）ANAs抗核不溶成分抗核可溶成分（抗ENA）抗染色體DNA蛋白抗核仁抗體

抗DNA抗體

抗核小體抗體

抗組蛋白H1,H2A,H2B,H3,H4

抗Sm,U1RNP,SSA,SSB抗Scl-70,Jo-1,PM-1抗rRNP,PCNA…….dsDNAssDNA抗著絲點抗體（ACA)抗5sRNA當前第21頁\共有54頁\編于星期三\5點抗dsDNA檢測方法以短膜蟲或馬疫錐蟲為底物的間接免疫熒光法(IIF)：≥1:5短膜蟲或馬疫錐蟲的動基體內含有天然純dsDNA，未經人工處理，不含組蛋白與ssDNA，抗原性純一特異。優點：特異性好

當前第22頁\共有54頁\編于星期三\5點抗dsDNA檢測方法酶聯免疫吸附法（ELISA）:≥100IU/ml優點：敏感性最高缺點：過于敏感，同時可能檢測到ssDNA抗體和低親和力dsDNA抗體,而這兩種致病力均不強

放射免疫法(Farr):≥20%

優點：對高親和度DNA抗體的檢測優于CL-IIF缺點：具有放射性，對技術人員身體造成一定影響蛋白印跡法（WB）

缺點：dsDNA抗原在純化包備過程中可變性解鏈，變成ssDNA,導致假陽性結果不同方法檢測SLE患者抗dsDNA抗體的結果：everythingispossible至少用兩種方法做（報告結果時注明方法學）,互為補充。如：IIF法+ELISA法

當前第23頁\共有54頁\編于星期三\5點當前第24頁\共有54頁\編于星期三\5點當前第25頁\共有54頁\編于星期三\5點抗dsDNA抗體臨床意義SLE的血清特異性抗體多有致病性（IgG型），與親和力（高）有關與LN與SLE疾病活動性相關，活動期達90％可用于SLE疾病活動期判斷＆藥物療效觀察與SLE急性皮疹、血管炎、漿膜腔炎、白細胞減少等有關當前第26頁\共有54頁\編于星期三\5點當前第27頁\共有54頁\編于星期三\5點抗組蛋白抗體（AHA）

（酶聯免疫吸附法X2SD)可出現于多種結締組織病，不具有診斷特異性SLE：50%

活動期SLE可達90.2%與LN相關，與SLE疾病活動性存在一定意義的相關性藥物性狼瘡（DIL）：>90%如：異煙肼、苯妥因鈉、青霉胺、雌激素等僅有AHA而無其他ANA，強烈支持DIL其他結締組織?。?3-30%如：RA、PBC、SSc等

當前第28頁\共有54頁\編于星期三\5點核小體是真核細胞染色質的基本復制單位，由組蛋白與DNA組成。參與SLE發病機制：多克隆B細胞活化劑產生ANuA，先于其他ANA促進抗dsDNA與AHA形成參與LN的發生

抗核小體抗體（ANuA）當前第29頁\共有54頁\編于星期三\5點抗核小體抗體臨床意義SLE標記性/高特異性自身抗體敏感性：58%-66%（優于抗dsDNA及抗Sm）特異性：98%-100%（與抗dsDNA相當）用于SLE的早期診斷ANuA的產生早于抗dsDNA、AHA抗dsDNA陰性者有1/4～1/2ANuA陽性與LN相關，用于SLE疾病活動性監測當前第30頁\共有54頁\編于星期三\5點ANuA、抗dsDNA、AHA聯合檢測意義當前第31頁\共有54頁\編于星期三\5點抗ENA抗體

extractablenuclearantigen可提取性核抗原成分：核酸與核蛋白，不含染色質成分功能：參與細胞內DNA復制、RNA轉錄、蛋白翻譯合成來源：無種屬差異，有組織不均一性理化特性：對溫度和RNA酶敏感（U1RNP、SS-A）意義：抗ENA抗體是ANAs中范圍最廣、最為重要的一簇抗體，與疾病活動性大多無相關當前第32頁\共有54頁\編于星期三\5點

抗ENA抗體檢測方法免疫雙擴散法(ID)對流免疫電泳法(CIE)免疫印跡法(IBT)酶聯免疫吸附法(ELISA)蛋白芯片（Proteinchip）當前第33頁\共有54頁\編于星期三\5點抗Sm抗體與抗U1RNP抗體靶抗原：位于細胞核內的一組含尿嘧啶豐富的核糖核蛋白，Sm和U1RNP是同一分子復合物中的不同位點當前第34頁\共有54頁\編于星期三\5點抗Sm抗體與抗U1RNP抗體抗Sm：SLE的標記性抗體，是前瞻性及回顧性診斷的指標。陽性率低：SLE（30%）抗U1RNP：多種CTD均可出現，與手指腫脹、雷諾現象、肌炎、指端硬化等相關，但腎炎發生率低。

陽性率：40-60%，其中SLE(30-40%),SSc(14%),pSS(12%),PM/DM(15%)高滴度抗U1RNP+抗Sm-MCTD抗U1RNP+抗Sm+SLE抗U1RNP-抗Sm+實驗室誤差?U1RNP丟失?當前第35頁\共有54頁\編于星期三\5點抗rRNP抗體靶抗原：胞漿中60S核糖體大亞基上的磷酸化蛋白

當前第36頁\共有54頁\編于星期三\5點抗rRNP抗體SLE的高度特異性抗體，與SLE腦病相關常在SLE活動期存在,但不會隨病情的緩解立即消失,可持續1-2年后才轉陰。陽性率：24%可出現在SLE早期（ANA及抗dsDNA陰性）

當前第37頁\共有54頁\編于星期三\5點抗SSA與抗SSB抗體靶抗原：位于同一小分子核糖核蛋白上的相鄰結構在不同的細胞周期，在細胞內的定位不同（細胞核內和胞漿中均可存在）pSS的SS-A存在于細胞核內SLE的SS-A存在于胞漿中SS-B主要位于細胞核內45KD47KD48KD當前第38頁\共有54頁\編于星期三\5點抗SSA與抗SSB抗體抗SS-A：結締組織病中出現頻率最高的抗體（60-75%），見于pSS（75%）SLE（25%）

RA（10%）SSc（24%）PBC（20%）等抗SSB：常與抗SSA相伴出現，診斷pSS更特異，見于pSS（40%）、SLE（10%）臨床意義：與新生兒狼瘡和先天性心臟傳導阻滯、平滑肌受累、光過敏、血管炎、皮損、紫癜、淋巴結腫大、WBC減少有關ANA陰性的SCLE：常為抗SSA抗體陽性。當前第39頁\共有54頁\編于星期三\5點當前第40頁\共有54頁\編于星期三\5點當前第41頁\共有54頁\編于星期三\5點抗Jo-1抗體(抗PL-1抗體)靶抗原：組氨酸tRNA合成酶胞漿中的磷酸蛋白當前第42頁\共有54頁\編于星期三\5點抗Jo-1抗體(抗PL-1抗體)PM/DM的標記抗體，陽性率20-30%抗體效價與疾病活動性相關抗Jo-1抗體綜合征：急性發熱,對稱性關節炎,技工手,雷諾現象,肌炎（相對輕）,肺間質病變其他抗合成酶抗體：抗PL-7、抗PL-12、抗OJ、抗EJ當前第43頁\共有54頁\編于星期三\5點抗ScL-70抗體靶抗原：DNA拓樸異構酶I的降解產物主要存在核仁中SSc的標記抗體，陽性率20-30%多見于dSSc，病情進展快，提示預后不良與ILD、彌漫性皮膚硬化有關，而PAH少見當前第44頁\共有54頁\編于星期三\5點主要靶抗原：著絲點蛋白-B多見于ISSc，病程緩慢，提示預后較好CREST綜合征：軟組織鈣化（C）,雷諾現象（R）,食道功能障礙（E）,指端硬化（S）,毛細血管擴張（T），但并非標記抗體，也見于孤立性雷諾現象、SS、PBC、AIH等國外文獻：與PAH相關，而ILD少見中國人群：未發現與PAH相關，但ILD少見白伊娜，王遷等.中國系統性硬化癥患者硬皮病相關自身抗體的檢測及其臨床意義.中華微生物學和免疫學雜志.2011（5）:452-455.抗著絲點抗體(ACA)當前第45頁\共有54頁\編于星期三\5點TakeHomeMassageANA熒光核型對抗體性質范圍有一定提示作用，尤其在靶抗原陰性時。ANA陰性而靶抗原陽性主要見于抗胞漿成分抗體，如：SS-A、Jo-1、rRNP、線粒體等?？购巳市涂贵w常與SSc有關?？咕|型或核膜型抗體常與SLE有關。當前第46頁\共有54頁\編于星期三\5點TakeHomeMassage抗dsDNA：SLE特異性抗體，與LN及疾病活動度有關，至少兩種方法聯合檢測（如：IIF法+ELISA法）。抗核小體、抗組蛋白、抗dsDNA三抗體陽性者強烈提示增殖性LN。與疾病活動性相關的抗體：抗dsDNA、抗核小體、抗組蛋白、抗Jo-1、抗rRNP與預后相關的抗體：抗Scl-70（差）、ACA（好）當前第47頁\共有54頁\編于星期三\5點案例1女性，34歲游走性多關節痛，雷諾現象半年RF56U/L；抗CCP抗體陰性；ANA1：320胸部CT：輕度肺間質病變診斷？治療？（核仁型）UCTDILD發展為

SSc可能性大Pred+CTX當前第48頁\共有54頁\編于星期三\5點案例2男性，50歲雙腕關節炎、雷諾現象半年ANA全套：陰性；抗CCP、RF：陰性胸部CT：輕度肺間質病變右腕關節MRI：骨髓水腫和滑膜炎診斷？

復查：ANA陰性，抗Jo-1弱陽性診斷：抗Jo-1抗體綜合征Pred+TⅡ當前第49頁\共有54頁\編于星期三\5點案例3女性32歲手指關節痛2月ANA（+）S1:80抗SSA（+++）135抗Ro52（+++）110三大常規正常；E