1/6..常用技術的原理及其應用及人類基因組學測試題一、名詞解釋2．Southernblotting3．Northernblotting4．Westernblotting5．dotblotting7．PCR8．功能性克隆9．轉基因技術二、填空題是。三、選擇題A．SouthernblottingB．NorthernblottingC．WesternblottingD．dotblottingE．insituhybridization2.不經電泳分離直接將樣品點在NC膜上的技術是A．SouthernblottingB．NorthernblottingC．WesternblottingD．DotblottingE．insituhybridization3.經電泳分離后將蛋白質轉移到NC膜上的技術是A．SouthernblottingB.NorthernblottingC．WesternblottingD．dotblottingE．insituhybridizationA．SouthernblottingB．NorthernblottingC．WesternblottingD．EasternblottingE．insituhybridizationC.只需微量模板D．用途非常廣泛E.底物必須標記A．耐熱B．耐高壓C.耐酸D．耐堿E.耐低溫A．95°CB．85°CC．75°CD．65°CE．55°C8．PCR反應過程中,退火溫度一般是2/6..A．72°CB．85°CC．75°CD．65°CE．55°C9.PCR反應過程中,引物延伸所需溫度一般是A．95°CB.82°CC．72°CD．62°CE．55°CNABTaqDNAC.上、下游特異性引物A、BD．ddNTPA．5~10次B．10~15次C．15~20次D．20~25次E．25~30次12．PCR反應體系與雙脫氧末端終止法測序體系不同的是缺少A．模板B．引物C.DNA聚合酶D．ddNTPE．緩沖液A．Klenow小片段B．引物C.dNTPD．標記dNTPE．ddNTPSanger本步驟不包括A．標記模板B．模板一引物雜交C．電泳D．引物的延長與合成阻斷E．放射自顯影直讀圖15．Sanger法測序的四個反應體系中應分別加入不同的ABC標記dNTPD．DNA聚合酶E.ddNTP16．人類基因組計劃的主要研究容不包括A．遺傳圖分析B．物理圖分析C．轉錄圖分析D.序列圖分析E．蛋白質功能分析A．轉基因技術B．核轉移技術C．基因剔除技術D．肽核酸技術E.反義核酸技術A.引物B．Klenow大片段C.ddNTPD.化學裂解試劑E．電泳后放射自顯影讀圖19．Sanger法測序所得直讀圖像中,由終點至始點所讀序列為NAE.循環周期的次數21．基因剔除<knockout>的方法主要被用來研究A．基因的結構B．基因的功能C.基因的表達D．基因的調控E．基因的突變22.反義核酸作用主要是NAD．降解DNAE．封閉核糖體的功能3/6..D．反應時間不必太長E.應采用超薄高壓電泳<1—5>A．NorthernblottingB．dotblottingC．WesternblottingD.SouthernblottingE.insituhybridizanon1.．用限制性切酶酶切后進行電泳分離,再將DNA轉移到NC膜上雜交的技術是將蛋白質轉移至NC膜上,與標記蛋白雜交的技術是5.在組織切片上直接與探針雜交的技術是<6—8>A．95°CB．85°CC．72°CD．65°CE．55°CPCR是<9—12>ATaqDNAB.反轉錄酶C．K1cnow大片段D．末端核苷酸轉移9．同聚物加尾連接需要A．特異性引物B．Klenow大片段C.dNTPD．ddNTPE．35S-a-dATPA．退火B.復性C.變性D．引物延伸E．引物終止3．DNA鏈末端合成終止法反應體系中含有A．引物B．dNTPC．ddNTPD．35S-a-dATPE．TaqDNA聚合酶4．DNA鏈末端合成終止法反應體系中不含有A．模板B．TaqDNA聚合酶C．ddNTPD．化學裂解試劑E．35S-a-dATPA．病原微生物的微量檢測B．突變基因的篩選C.法醫學鑒定D．DNA序列分析E克隆目的基因6．克隆致病相關基因的策略包括A．定位克隆B．非定位候選克隆C．功能克隆D．定位候選克隆E．隨機克隆PCR?簡述其基本原理、反應體系和主要步驟。3.如果你有翻譯活性很高的人酪氨酸酶的mRNA,請設計兩個實驗以鑒定某個克隆的基因片段是否為酪氨酸酶的基因?4/6..參考答案一、名詞解釋單鏈分子之間存在一定程度的堿基配對關系,就可在不同分子間形成雜化雙鏈,這種現象稱4．將聚丙烯酰胺凝膠電泳后的蛋白質轉移至NC膜上,再與另一標記蛋白質分子<如抗6．指采用原位合成或顯微打印手段,將數以萬計的DNA探針固化于支持物表面上,產生二維DNA探針陣列,然后與標記的樣品進行雜交,通過檢測雜交信號來實現對生物樣品快速、并行、高效地檢測或醫學診斷。由于常用硅芯片作為支持物,且在制備過程運用了計算機芯片的制備技術,故稱基因芯片技術。8．指從對一種致病基因的功能的了解出發克隆該致病基因的策略。血友病的第Ⅷ因子基因是以此策略克隆成功的。9．指將目的基因整合人受精卵細胞或胚胎干細胞,然后將細胞導人動物子宮,使之發育二、填空題16．DNARNA蛋白質17．引物TaqDNA聚合酶dNTP含Mg2—’的緩沖液1S．變性退火延伸1Q．模板一引物雜交引物延長與合成阻斷電泳放射自顯影直讀圖20．遺傳圖分析物理圖分析轉錄圖分析序列圖分析資料的儲存和利用21．功能基因組學蛋白質組學22．功能性克隆定位克隆候選基因克隆23．功能性克隆定位克隆三、選擇題21—3031—4041—505—6021—3031—4021—3031—40補的寡核苷酸片段為引物,在DNA聚合酶的作用下,按半保留復制的機制沿模板鏈延伸直至5/6..完成新的DNA合成,重復這一過程,使目的DNA片段得到大量擴增。其反應體系包括：模板環,一般進行25~30次循環。最后一次循環的延伸反應時間應適當延長<5min>,以獲得較大管中所有產物是一系列長度只差1個核苷酸的聚合鏈,經超薄高壓電泳可將其一一分辨。大體過程為：<1>單鏈模板的制備；可據M13噬菌體的特性,將目的基因用基因工程的方法<2>克隆片段與酪氨酸酶mRNA雜交,mRNA翻譯活性喪失,該克隆片段為酪氨酸酶的基測試題一、名詞解釋2.結構基因組學3．功能基因組學4．比較基因組學二、填空題1．Southernblotting用于研究一一——,、Northernblotting用于研究一一—的克隆所采用的克隆策略是————。三、選擇題1．人類基因組計劃的主要研究容不包括A．遺傳圖分析B．物理圖分析C．轉錄圖分析D.序列圖分析E．蛋白質功能分析A．轉基因技術D．肽核酸技術B．核轉移技術E.反義核酸技術C．基因剔除技術6/6..E.