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文檔簡介

項目一培養基制備園藝技術專業教學資源庫模塊三組培基本操作技術123CONTENTS母液配制培養基種類、成分培養基配制及滅菌項目一培養基制備二、培養基種類、成分(三)培養基成分水分有機物天然物質

培養基支持物質輔助物質無機鹽培養基成分園藝植物組織培養要求:蒸餾水或重蒸餾水(即蒸餾水再蒸餾一次)

配制母液和研究時以保證各種成分的精確性和完全人為控制;大規模生產時可用自來水。二、培養基種類、成分培養基成分--水分園藝植物組織培養二、培養基種類、成分培養基成分--無機鹽

元素名稱添加形式大量

元素

(≥0.5mmol/L)微量元素(≤0.5mmol/L)NPKCaMgSFeBMnCuMoClKNO3,NH4NO3KH2PO4NaH2PO4KClKNO3CaCl2·2H2OMg2SO4·7H2OMg2SO4·

7H2OFeNa2-EDTAH3BO3MnSO4CuSO4Na2MoO4·2H2OCaCl2·2H2O園藝植物組織培養二、培養基種類、成分有機物維生素氨基酸植物激素碳水化合物培養基成分--有機物園藝植物組織培養二、培養基種類、成分培養基中有機物--碳水化合物種類:蔗糖或葡萄糖、果糖等。蔗糖濃度:2-3%,胚培養為4-15%注意:高壓滅菌部分糖會分解。大生產時可用白砂糖。園藝植物組織培養二、培養基種類、成分培養基中有機物--維生素種類:VB1、VB6、Vpp、Vc及生物素、葉酸。濃度:0.1-1.0mg/L

VB1

促愈傷組織產生,提高活力

VB6

促根生長

Vpp

與代謝和胚發育有關

Vc

防組織褐變作用園藝植物組織培養二、培養基種類、成分培養基中有機物--植物激素1.生長素類(1)種類:IAANAAIBA2,4-D(2)作用:誘導愈傷組織和根分化,促進細胞分裂和伸長。(3)穩定性與溶解性:除IAA外,對熱和光均穩定。多用95%酒精或稀NaOH溶液助溶。一般配成0.1-0.5mg/ml的母液。(4)濃度:0.05-5mg/L園藝植物組織培養二、培養基種類、成分培養基中有機物--植物激素

2.赤霉素(GAs)(1)種類:GA3(2)作用:促莖伸長,促胚發育成植株;打破休眠;一般在器官形成后加入。(3)穩定性和溶解性:不耐熱,在低溫條件下保存;溶于酒精,配制時可用少量95%酒精助溶。園藝植物組織培養二、培養基種類、成分培養基中有機物--植物激素

3.細胞分裂素(CTK)(1)種類:6-BAKTZT(2)作用:誘導不定芽分化和莖、苗增殖。(3)穩定性與溶解性:CTK對光、稀酸和熱均穩定;溶解于稀酸和稀堿中,配制時常用稀HCl助溶。通常配制成1mg/ml的母液。(4)濃度:0.05-10.0mg/L園藝植物組織培養二、培養基種類、成分培養基中有機物--氨基酸培養基中最常用的氨基酸是甘氨酸,丙氨酸等。有時采用水解乳蛋白或水解酪蛋白,用量在10-1000mg/L之間。缺點:營養豐富,極易引起污染。如無特別需要,以不用為宜。園藝植物組織培養二、培養基種類、成分天然復合物香蕉泥馬鈴薯椰乳培養基成分--天然復合物園藝植物組織培養椰乳促愈傷組織和細胞培養,用量10~20%,使用注意莖尖大小。

香蕉泥對PH值緩沖大,用量150~200ml/L,應用在蘭花組培。培養基成分--天然復合物園藝植物組織培養二、培養基種類、成分二、培養基種類、成分培養基成分--支持物質1.瓊脂(1)用量:6-10g/L(2)種類:瓊脂粉瓊脂條(3)作用:固化作用注意:新買應試凝固力。2.其它

玻璃纖維、濾紙橋、海綿等園藝植物組織培養二、培養基種類、成分輔助性物質抗氧化物活性炭抗生素培養基成分--輔助性物質園藝植物組織培養種類

抗生素作用:防污染,減少材料損失。注意:抗生素對組織生長有抑制作用,使用要慎重用量:5-20%二、培養基種類、成分園藝植物組織培養二、培養基種類、成分抗氧化物1.常用抗氧化劑:半胱氨酸、VC、PVP2.用量:50-200mg/L,3.作用:防止氧化注意:可用抗氧化劑洗滌外植體傷口表面。園藝植物組織培養二、培養基種類、成分活性炭1.作用:具吸附作用;莖尖初代培養可防褐化;促進新梢增殖(濃度0.1—0.2%);促進生根;防止組培苗玻璃化(濃度0.3%);有利于胚胎培養。2.常用濃度:0.5-10g/L園藝植物組織培養二、培養基種類、成分組培所需藥品價錢一覽表藥品名稱規格包裝價格(元)瓊脂粉強度900g/cm2

1kg180瓊脂條強度500g/cm21kg140MS干粉培養基(41.5克配成一升培養基)含蔗糖和瓊脂粉500g90園藝植物組織培養二、培養基種類、成分組培所需藥品價錢一覽表藥品名稱包裝價格(元)IBA10g100NAA50g30KT10g2502,4-D100g50TDZ塞苯隆100mg350反玉米素50mg2806-BA10g150園藝植物組織培養二、培養基種類、成分組培所需藥品價錢一覽表藥品名稱包裝價格(元)煙酸100g60肌醇100g35VB1100g55甘氨酸100g10VB650g50園藝植物組織培養二、培養基種類、成分組培所需藥品價錢一覽表藥品名稱包裝價格(元)硫酸亞鐵500g30乙二胺四乙酸二鈉鹽500g50KI500g174鉬酸鈉500g340吐溫-80500ml23園藝植物組織培養二、培養基種類、成分任務2:培養基配制1.學生分組提交培養基配制方案,并準備所需設備和物品;2.各小組分別配制MS培養基;3.母液標識與保存;4.填記錄:配制完后,填寫

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