食品生物技術(shù)基礎(chǔ)動物細胞工程第1頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四

第三節(jié)動物細胞工程一、動物細胞培養(yǎng)二、核移植、胚胎移植三、動物細胞融合技術(shù)

四、單克隆抗體第2頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合單克隆抗體技術(shù)核、胚胎移植動物細胞工程常用技術(shù)第3頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四

動物細胞工程動物細胞工程常用的技術(shù)手段有動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合、單克隆抗體、胚胎移植、核移植等。其中，動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。第4頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四動物細胞培養(yǎng)

許多動物細胞能夠分泌蛋白質(zhì)，如抗體等。但是單個細胞分泌的蛋白質(zhì)的量是很少的，要獲得大量的分泌蛋白就要借助于大規(guī)模的動物細胞培養(yǎng)了。

動物細胞培養(yǎng)液：通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等；

培養(yǎng)的動物細胞：大都取自動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織。

動物細胞培養(yǎng)方式：原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)第5頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四

動物細胞培養(yǎng)1.發(fā)展歷史:20世紀初，人們不知道神經(jīng)纖維是由神經(jīng)細胞的細胞質(zhì)向外突出形成的，還是由神經(jīng)細胞周圍的其他細胞融合而成的。生物學家們就這個問題展開了激烈的爭論。1907年，美國生物學家哈里森(Harrison)從蝌蚪的脊索中分離出神經(jīng)組織，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織存活了好幾周，并且從神經(jīng)細胞中長出了神經(jīng)纖維。哈里森的實驗不僅解決了神經(jīng)纖維的起源問題，而且開創(chuàng)了動物組織培養(yǎng)的先河。此后，在許多科學家的不懈努力下，動物組織培養(yǎng)不斷改進并逐漸發(fā)展成為動物細胞培養(yǎng)。第6頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四2、動物細胞培養(yǎng)的應用和概念：動物細胞培養(yǎng):指從動物有機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細胞生長和增殖。第7頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四3、動物細胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶10代細胞原代培養(yǎng)50代細胞傳代培養(yǎng)細胞株無限傳代細胞系單個細胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動物組織細胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細胞網(wǎng)絡起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。（分解彈性纖維）第8頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四3、動物細胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶10代細胞原代培養(yǎng)50代細胞傳代培養(yǎng)細胞株無限傳代細胞系單個細胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變動物組織細胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細胞網(wǎng)絡起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。（分解彈性纖維）第9頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四動物細胞的培養(yǎng)過程

幼齡動物取動物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理細胞培養(yǎng)單個細胞動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。第10頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四原代培養(yǎng)：初代培養(yǎng)亦稱“原代培養(yǎng)”。指將欲待進行體外無菌培養(yǎng)的組織或器官從母體取下后，經(jīng)表面滅菌后，切成合適的小塊，置于培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)的過程。由于外植體是直接取自母體的，事前并未經(jīng)過體外培養(yǎng)，因此將它們規(guī)定為第一代培養(yǎng)物。通過繼代培養(yǎng)，其體外繁殖體可供作第二、第三乃至無數(shù)代的培養(yǎng)物。傳代培養(yǎng)：

繼代培養(yǎng)亦稱“傳代培養(yǎng)”。將培養(yǎng)的動植物細胞、組織或器官乃至植物小植株從原來的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到一種新鮮的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)的過程稱為繼代培養(yǎng)。它是培養(yǎng)物連續(xù)傳代的一種方法，每轉(zhuǎn)移培養(yǎng)一次即稱為一代。因此按轉(zhuǎn)移培養(yǎng)的次數(shù)確定繼代培養(yǎng)的代數(shù)。通過繼代培養(yǎng)可以使培養(yǎng)的細胞、組織或植物小植株能不斷獲得新鮮補充的營養(yǎng)物質(zhì)，可以避免在原培養(yǎng)基中所積累的一些有毒物質(zhì)對培養(yǎng)物的不利影響，從而可以使培養(yǎng)物不斷生長和增殖。第11頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四概念原代培養(yǎng)：從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞為原代細胞。培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞稱為原代細胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。第12頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存活到40~50代，這種傳代細胞為細胞株。

細胞系：細胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。細胞株和細胞系的區(qū)別：細胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。第13頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四思考討論：在動物細胞培養(yǎng)過程中，為什么要用胰蛋白酶對取出的動物組織進行處理？胰蛋白酶處理動物組織，可以使動物組織細胞間的膠原纖維和細胞外的其他成分酶解，獲得單個細胞。

第14頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四3.動物細胞培養(yǎng)的條件1.無菌無毒的環(huán)境2.營養(yǎng)3.溫度和pH4.氣體環(huán)境

第15頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四（1）生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體（2）檢測有毒物質(zhì)（許多致畸、致癌物質(zhì)加入培養(yǎng)液后，培養(yǎng)細胞會發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異。根據(jù)變異細胞占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)，可以判斷某種物質(zhì)的毒性。）（3）為燒傷病人植皮如何利用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)，解決為燒傷病人植皮問題?（利用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)中細胞的貼壁生長和接觸抑制特點，可以用燒傷病人自己的健康皮膚細胞培養(yǎng)出大量的自身薄層皮膚細胞供植皮所需。）（4）用于科學研究（生理、病理、藥理）4.動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的應用第16頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四Vero細胞和狂犬病毒的培養(yǎng)工藝DMEM培養(yǎng)基胎牛血清其他成分錐形瓶逐級放大培養(yǎng)加堿（碳酸氫鈉）加糖（葡萄糖）灌注培養(yǎng)液微載體5L種子罐培養(yǎng)培養(yǎng)液50L生物反應器接種狂犬病毒出液口收獲病毒第17頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四

植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理細胞的全能性細胞增殖第18頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四

植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)培養(yǎng)基性質(zhì)固、液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基第19頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四

植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖動物血清第20頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四

植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)培養(yǎng)結(jié)果植物體細胞株、細胞系第21頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四

植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細胞或細胞分泌蛋白等第22頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理細胞的全能性細胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固、液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖動物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細胞株、細胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細胞或細胞分泌蛋白等第23頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四思考：2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？1、動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處？3、為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞？4、動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。獨特之處有：1、液體培養(yǎng)基2、成分中有動物血清等因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛，分裂能力強。成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細胞懸浮液利于培養(yǎng)。不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體。第24頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四二、動物體細胞核、胚胎移植技術(shù)和克隆動物

動物核移植：指將動物的一個細胞的細胞核,移如入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中。使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。第25頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四

胚胎移植技術(shù)

胚胎移植技術(shù)指將一個生物體內(nèi)的胚胎移植到另一個生物體內(nèi)繁殖的技術(shù)，這樣可能大量繁殖優(yōu)良的品種。先注射雌性激素在一雌性動物的體內(nèi)，促使其大量排卵，然后在體外人工受精后發(fā)育成為胚胎后再植入其它同類動物的子宮內(nèi)使其發(fā)育成為個體。大大提高了繁殖率。第26頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四胚胎移植技術(shù)胚胎移植的基本程序如下（以牛胚胎移植為例）第27頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四克隆技術(shù)克隆羊培育過程黑面綿羊去核卵細胞白面綿羊乳腺細胞核細胞核移植重組細胞電脈沖刺激早期胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利第28頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四多莉克隆猴第29頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四克隆牛第30頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四體細胞核移植技術(shù)的應用前景第31頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四(1)遺傳素質(zhì)完全一致的克隆動物將更有利于開展對動物(人)生長、發(fā)育、衰老和健康等機理的研究；有利于大量培養(yǎng)品質(zhì)優(yōu)良的家畜;經(jīng)轉(zhuǎn)基因的克隆哺乳動物，將能為人類提供源源不斷的廉價的藥品、保健品以及較易被人體接受的移植器官；(4)科學家將很快地從目前的同種克隆技術(shù)推進到異種克隆,即借腹懷胎的新領(lǐng)域,這無疑將大大促進對瀕臨滅種的哺乳動物的保護工作。

克隆技術(shù)將對21世紀產(chǎn)生的重大影響第32頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四三、動物細胞融合動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是相同的，誘導融合的方法也相類似，動物細胞的融合還常常用到滅活的病毒作為誘導劑。很多不同種類的動物細胞之間或動物與人的細胞之間都能進行融合，形成雜種細胞，例如人—鼠、人—兔、人—雞、人—蛙、鼠—雞、鼠—兔、鼠—猴等的細胞都能進行融合。動物細胞融合技術(shù)最重要的用途，是制備單克隆抗體。

第33頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四細胞融合是用自然或人工方法，使兩個或更多個不同的細胞融合成一個細胞的過程。

植物細胞由于具有細胞壁，在進行人工誘導融合之前，必須先脫除其細胞壁釋放出原生質(zhì)體才能進行融合。動物細胞可直接用于融合。人工誘導動物細胞融合的方法有病毒誘融法、化學誘融法和電刺激誘融法等。

植物原生質(zhì)體人工誘融法見“原生質(zhì)體融合”。細胞融合過程應包括核基因和胞質(zhì)基因(如線粒體和葉綠體基因)的融合。第34頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四動物細胞融合

細胞融合是正常的生命活動兩個細胞正在融合受精作用第35頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四動物細胞融合第36頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四細胞A細胞B雜種細胞滅活的病毒物理法化學法仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒第37頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四用滅活的病毒誘導動物細胞融合過程細胞核病毒顆粒細胞核第38頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四細胞融合與融合誘導細胞融合物質(zhì)誘導劑：仙臺病毒、聚乙二醇

誘導細胞融合的仙臺病毒必須滅活。

思考討論：為什么細胞融合過程中使用的病毒需要滅活？第39頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四動物細胞融合

（1）基本原理：細胞膜的流動性。（2）誘導劑：滅活的仙臺病毒、PEG等。（3）用途：制備單克隆抗體。第40頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四動物細胞融合（總結(jié)）2.誘導融合的方法：1.自然條件下的細胞融合現(xiàn)象3.融合的具體過程：先是細胞質(zhì)融合，細胞核的融合是在第一次有絲分裂時完成的。仙臺病毒紫外線喪失感染活性（不感染細胞）保留融合活性（誘導細胞融合）第41頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的有（）A．誘導融合的方法完全相同B．所用的技術(shù)手段完全相同C．所采用的原理完全相同 D．都能形成雜種細胞解析所用的誘導方法略有不同：除了植物細胞融合所用的誘導方法外，動物細胞融合還常用滅活的仙臺病毒做誘導劑。動物細胞融合和植物體細胞雜交，這兩項細胞工程技術(shù)中都包含了細胞融合過程，兩種細胞融合所用的技術(shù)手段基本相同，但不完全相同。動物細胞融合采用的原理是細胞膜的流動性，植物體細胞雜交采用的原理是細胞膜的流動性和細胞的全能性。動物細胞融合和植物體細胞雜交過程中均能產(chǎn)生雜種細胞，只不過是動物的雜種細胞在現(xiàn)有技術(shù)條件下，還不能發(fā)育成一個個體，它的全能性還不能表現(xiàn)出來，植物的雜種細胞就不一樣了，植物的雜種細胞可以通過組織培養(yǎng)技術(shù)形成雜種植株。

D第42頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四四、單克隆抗體

在動物發(fā)生免疫反應的過程中，體內(nèi)的每一個B淋巴細胞分泌一種特異性抗體。因此，要想獲得大量的單一抗體，必須用單個B淋巴細胞進行無性繁殖，也就是通過克隆，形成細胞群，這樣的細胞群就有可能產(chǎn)生出化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體——單克隆抗體。

免疫系統(tǒng)是由機體內(nèi)的淋巴細胞組成的，包括T淋巴細胞和B淋巴細胞。抗原(如病毒、細菌等非自身物質(zhì))進入身體后，T淋巴細胞產(chǎn)生多種淋巴因子排斥抗原，B淋巴細胞在T淋巴細胞協(xié)助下，分化出許多漿細胞。每個漿細胞能生產(chǎn)無數(shù)殺傷癌變細胞或病毒的物質(zhì)，即抗體。由一個B淋巴細胞分化的一群漿細胞稱為“純系”或“克隆”。由一個克隆產(chǎn)生的抗體即為單克隆抗體。第43頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四什么是抗體？抗體是機體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。B淋巴細胞產(chǎn)生抗體。第44頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四B淋巴細胞與抗體１．B淋巴細胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。２．動物體內(nèi)的B淋巴細胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。３．每一個淋巴細胞只能產(chǎn)生一種抗體。第45頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四單克隆抗體由單個B淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖（克隆），形成基因型相同的細胞群，這一細胞群所產(chǎn)生的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體稱為單克隆抗體。

特點：

特異性強、靈敏度高

第46頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？利用淋巴細胞產(chǎn)生抗體的功能利用腫瘤細胞無限增殖的特性利用細胞融合的技術(shù)將兩種細胞融合獲得具有淋巴細胞和腫瘤細胞特性的雜交瘤細胞利用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細胞第47頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四單克隆抗體的制備

英國科學家米爾斯坦和德國科學家柯勒在前人工作的基礎(chǔ)上，繼續(xù)探索和嘗試，并且充分發(fā)揮想象力，設計了一個極富創(chuàng)造性的實驗方案。

他們首先將抗原注射入小鼠體內(nèi)，然后從小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞，與小鼠骨髓瘤細胞在滅活的仙臺病毒或聚乙二醇的誘導下融合，再在特定的選擇性培養(yǎng)基中篩選出雜交瘤細胞。由于雜交瘤細胞繼承了雙親細胞的遺傳物質(zhì)，因此，它不僅具有B淋巴細胞分泌特異性抗體的能力，還有骨髓瘤細胞在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的本領(lǐng)。他們培養(yǎng)雜交瘤細胞，從中挑選出能夠產(chǎn)生所需抗體的細胞群，繼續(xù)培養(yǎng)，以獲得足夠數(shù)量的細胞，在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。這樣，從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體。

第48頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四第49頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四單克隆抗體制備過程

注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體第50頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四第51頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四1、本過程利用了哪些原理？免疫原理，細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理2、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B細胞融合？小鼠骨髓瘤細胞可以在體外培養(yǎng)條件下大量增殖，B淋巴細胞能夠產(chǎn)生抗體，細胞的同源性越近，融合形成的雜種細胞越易成活。這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體。3、骨髓瘤細胞是癌細胞嗎?有無限增殖能力（失去凋亡機制，失去接觸抑制等）的細胞是腫瘤細胞，而具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤細胞，稱為癌細胞，所以說，瘤細胞不能等于癌細胞。第52頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四

注射抗原B淋巴細胞骨髓瘤細胞細胞融合、篩選雜交瘤細胞細胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體（4）整個制備過程為何要經(jīng)過兩次細胞篩選?第53頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四（4）整個制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選?第一次篩選得到雜交瘤細胞（多種），第二次需先在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。由于該細胞群是單個雜交瘤細胞克隆得來的，所以產(chǎn)生的抗體必然是化學性質(zhì)單一的，特異性強的單克隆抗體。這里的單克隆確有單個細胞克隆的含義，只不過克隆的不是B淋巴細胞，而是雜交瘤細胞。第54頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四單克隆抗體的應用與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強，靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯。應用主要有：1、臨床診斷2、作為載體，運載抗癌藥物，形成“生物導彈”治療腫瘤資料：目前世界各國已經(jīng)研制出數(shù)以百計的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個必然趨勢。另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和定位體內(nèi)“病灶”也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。第55頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四第三章細胞工程與食品產(chǎn)業(yè)第一節(jié)細胞工程概述第二節(jié)植物細胞工程第三節(jié)動物細胞工程第四節(jié)細胞工程在食品工業(yè)中的應用第56頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四干細胞工程

干細胞定義現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)哺乳動物的許多已分化組織和器官中都保留了一些能夠分裂形成該組織或器官的未分化原始細胞，這些細胞稱為干細胞。干細胞形態(tài)特征：圓形，橢圓型，體積小，核質(zhì)比大，具有較強的端粒酶活性，因此具有較強增殖能力。

第57頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四干細胞增殖特性緩慢性，自穩(wěn)性干細胞分類人體干細胞基本分為三種類型：全能干細胞、多能干細胞和專能干細胞。第58頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四·干細胞分化模式

·胚胎干細胞(embryostemcell)：具有分化成多種細胞類型及構(gòu)建組織的潛能。·造血干細胞

·單能干細胞（monopotentialcell）第59頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四體內(nèi)干細胞的意義在于源源不斷地補充體內(nèi)一些短命組織的細胞來源，如血液細胞、皮膚細胞以及精巢等，或者組織或器官受到局部損傷時，它們可以再分裂形成新的該組織和器官，是體內(nèi)的一種自我修復機制。人類干細胞工程就是利用人體內(nèi)干細胞的特征來達到體外產(chǎn)生人類所需的產(chǎn)物的探索。主要用于器官修復，基因治療等。第60頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四1.動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是：（）

A．動物細胞融合

B．胚胎移植

C．動物細胞培養(yǎng)

D．核移植Ｃ第61頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四２．在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是（

）A．結(jié)果是相同的

B．雜種細胞的形成過程基本相同C．操作過程中酶的作用相同D．誘導融合的手段相同Ｂ第62頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四３.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是（）①淋巴細胞②小鼠骨髓瘤細胞③B淋巴細胞自身融合細胞④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞⑤雜交瘤細胞A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③C第63頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四4.單克隆抗體是指A．單個骨髓瘤細胞增殖產(chǎn)生的抗體 B．單個B淋巴細胞增殖產(chǎn)生的抗體C．單個雜交瘤細胞增殖產(chǎn)生的抗體 D．單個抗體通過克隆化，產(chǎn)生大量抗體C第64頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四5.將小鼠骨髓瘤細胞與一種B淋巴細胞融合，可使融合的細胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體，其依據(jù)是（多選）（）A．B淋巴細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖B．B淋巴細胞只有與骨髓瘤細胞融合后才能產(chǎn)生抗體C．骨髓瘤細胞可以無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體D．骨髓瘤細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖AC第65頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四要想獲得大量的單克隆抗體就必須用單個的B淋巴細胞進行無性繁殖，形成細胞群。其原因是（）

A．在體外培養(yǎng)條件下B淋巴細胞可以無限增殖B．在動物體內(nèi)B淋巴細胞可產(chǎn)生多達百萬種以上的抗體C．每一個B淋巴細胞都參與特異性免疫反應D．每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體D第66頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四7、關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是（）A、可以制成診斷盒．用于疾病的珍斷B、可以與藥物結(jié)合，用于病變細胞的定向治療C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)D第67頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四8.由A、B兩種細胞人工融合成D細胞的過程中，常用（）或（）作為誘導劑。融合過程包括（）和（）兩方面，D細胞稱為()細胞。PEG(聚乙二醇)或（滅活的病毒)膜融合核融合雜種第68頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四9.若由D細胞培育成植株，可用（)技術(shù)，這一培養(yǎng)過程要經(jīng)過

和

兩個階段。目前，植物體細胞雜交還有許多理論和技術(shù)問題沒有解決，如雜種植物還不能按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性狀，從遺傳學角度分析，其內(nèi)在因素很可能是

。植物細胞培養(yǎng)脫分化再分化控制優(yōu)良性狀的基因還不能表達第69頁，共74頁，2023年，2月20日，星期四10.如需制備單克隆抗體，則D細胞應具有(

)和(

)的能力。

分泌特異性抗體大量增殖第70頁，共74