本文格式為Word版，下載可任意編輯——安捷倫1290超高效液相色譜儀操作規程

維和藥業安捷倫1290Infinity型超高效液相色譜儀使生效日期用、維護、保養規程起草人審核人批準人起草日期審核日期批準日期頒發部門編號復印份數分發至目的：建立一個安捷倫1290Infinity型高效液相色譜儀使用、維護、保養規程，保證檢驗人員能按規程正確使用儀器，確保儀器的確鑿性、縝密度。防止儀器損壞，延長使用壽命，保證儀器正常運行。

范圍：適用于安捷倫1290Infinity型高效液相色譜儀的使用、維護和保養。責任：質量管理部。程序：1.開機

1.1開啟計算機，進入WindowsXP畫面。

1.2開啟Agilent1290InfinityHPLC各模塊電源。1.3待各模塊自檢完成后，雙擊“儀器1聯機〞圖標，化學工作站自動與Agilent1290InfinityHPLC通訊。

1.4從“視圖〞菜單中選擇“方法和運行控制〞、“系統視圖〞、“命令行〞，使其命令前有“√〞標志來調用所需的界面。

1.5右鍵點擊泵下面的瓶圖標，選擇“瓶填充〞，輸入溶劑的實際體積和瓶體積。也可輸入停泵的體積。點擊“確定〞。

1.6從菜單“視圖〞中，選中“在線信號〞，選中“信號窗口1〞，然后點擊“改變?〞鈕，將所要繪圖的信號移到右邊的框中，點擊“確定〞。(宛如時檢測二個信號，則重復，選中“信號窗口2〞。)2.排氣

2.1首先在泵模塊單擊右鍵，在方法編輯中，泵的參數設置部分，選好需要排空的通道（保證是開的）。

2.2右鍵點擊儀器狀態視圖中泵的圖標，選擇控制。2.3勾上清洗，并且輸入流量、時間、比例，開啟“泵〞、“清洗〞功能，點擊“確定〞，就可以排空管道。排空的時候閥會自動切換，無需人為介入。

2.4當我們發現泵頭里面有氣泡出不來的時候，選擇開啟“注入〞，然后點擊確定。此時泵會用很猛烈的方式朝外泵液體，并持續20次自動中止。3.編輯數據采集方法3.1開始編輯完整方法：

從“方法〞菜單中選擇“編輯完整方法?〞項，在方法編輯選項僅選擇“儀器/采集〞，點擊“確定〞，進圖下一畫面。

3.2方法信息：

在“方法解釋〞中參與方法的信息（如：Thisisfortest!），點擊“確定〞，進入下一畫面。3.3進樣方式選擇

根據自動進樣器的類型，選擇適合的進樣方式，本機默認為“HipAls〞。3.4泵參數設定：

在“流量〞處輸入流量，如1.5ml/min，中止時間：10min。在“溶劑B〞處輸入70.0，(A=100-B)，也可“添加〞一行“時間表〞，編輯梯度。在“壓力限〞處輸入柱標題機要第1頁共1頁

維和藥業標題安捷倫1290Infinity型超高效液相色譜儀使用、維護、保養規程頒發部門質量管理部編號SOP-ZL(WB)091-02子的最大耐高壓，以保護柱子。3.5自動進樣器參數設定:

選擇適合的進樣方式，如：“進樣體積1.0ul，標準進樣〞只能輸入進樣體積，此方式無洗針功能；“進樣量1.0ul，針清洗后進樣〞此方式有洗針功能，“針清洗〞一般選擇為“沖洗端口，時間3.0秒〞。3.6柱溫箱參數設定:

在“溫度〞下面，如無特別規定，左側、右側設置成同樣溫度，使柱箱溫度左右一致。

3.7DAD檢測器參數設定:

檢測波長:254nm，帶寬=4nm，參比波長=360nm，帶寬=100nm;

檢測波長：一般選擇最大吸收處的波長。樣品帶寬：一般選擇最大吸收值一半處的整個寬度。參比波長：一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區域。參比帶寬：至少要與樣品信號的帶寬相等，大量狀況下用100nm作為缺省值。峰寬（響應時間）：其值盡可能接近要測的窄峰峰寬。狹縫-狹縫窄，光譜分辯率高；寬時，噪音低。同時可以輸入采集光譜方式，步長，范圍，閾值。選中所用的燈。可以開啟光學單元溫度控制；可以設定8通道信號等。3.8保存方法

從“方法〞菜單，選中“方法另存為?〞，輸入一方法名，如“測試〞，點擊“確定。

4.單次樣品運行

從“運行控制〞菜單中，選擇“樣品信息〞選項，輸入操名稱，如“安裝工程師〞；在“數據文件〞中選擇“手動〞或“前綴/計數器〞；在“樣品參數〞中填入“樣品位置〞、“樣品名稱〞。

點擊“確定〞，在“儀器〞菜單項選擇擇“系統開啟〞。

等儀器準備好，基線平穩，從“運行控制〞菜單中選擇“運行方法〞，進樣。5.面積百分比數據處理5.1選擇界面

退出“儀器1聯機〞界面，雙擊“儀器1脫機〞圖標，進入數據分析畫面。5.2調用信號

從“文件〞菜單項選擇擇“調用信號〞，選中您的數據文件名。點擊“確定〞，則數據被調出。

5.3做譜圖優化：

從“圖形〞菜單中選擇“信號選項〞。從“范圍〞中選擇“滿量程〞或“自動量程〞及適合的時間范圍或選擇“自定義量程〞調整。反復進行，直到圖的比例適合為止。點擊“確定〞。5.4積分優化:

從“積分〞菜單中選擇“積分事件〞選項。選擇適合的“斜率靈敏度〞、“峰寬〞、“最小峰面積〞、“最小峰高〞。

從“積分〞菜單中選擇“積分〞選項，則數據被積分。

如積分結果不理想，則修改相應的積分參數，直到滿意為止。點擊左邊“√〞圖標，將積分參數存入方法。5.5打印報告:

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維和藥業標題安捷倫1290Infinity型超高效液相色譜儀使用、維護、保養規程頒發部門質量管理部編號SOP-ZL(WB)091-02從“報告〞菜單中選擇“設定報告〞選項。點擊“定量結果〞框中“定量〞右側的黑三角，選中“面積百分比〞，其它選項不變。點擊“確定〞。

從“報告〞菜單中選擇“打印報告〞，則報告結果將打印到屏幕上，如想輸出到打印機上，則點擊“報告〞頂部的“打印〞鈕。6.關機

關機前，先關燈，用相應的溶劑充分沖洗系統。

退出化學工作站，依提醒關泵，及其它窗口，關閉計算機。關閉Agilent1290各模塊電源開關。關閉穩壓器。7.定量數據處理

7.1點擊“方法〞菜單，選擇“調用方法L..〞，在方法目錄中選擇要進行定量設定的方法，

該方法是經過積分和譜圖優化過的方法。點擊“確定〞，則選擇的方法被調出。7.2從“文件〞菜單中選擇“調用信號?〞選項，選中標樣的數據文件名，點擊“確定〞，則數據被調出。檢查確認積分和譜圖優化的參數是否適合。

7.3從“校正〞菜單中選擇，“新建校正表〞按鈕，確認選項在“自動設定〞，級別為“1〞，點擊“確定〞。若要信號單獨計算，則選擇“校正模式〞中的“每個信號單獨計算〞。

7.4在覆蓋現有校準表中對話框中，選擇“是（Y）〞。若方法中沒有舊的校準表，無此項。

7.5則所有積過分的峰，其保存時間、峰面積按序顯示在校準表中。依次輸入化合物的名稱、含量，校準曲線顯示在右下方。可以設定參考峰等。若用內標方法定量，還須選擇內標，點擊“內標“下的區域，選擇那個峰作為內標峰，指定每個色譜峰以那個內標為參比。點擊“確定〞。

7.6在刪除含量為零的行對話框中選擇“是（Y）〞。則校準表中未輸入含量的峰從表中刪除。

7.7點擊“校正〞菜單，選擇“校正設置〞按鈕，輸入單位：如“mg/ml〞；其它項不變。點擊“確定〞。7.8打印報告:

從“報告〞菜單中選擇“設定報告（R）?〞選項。點擊“定量結果〞框中“定量〞右側的黑三角，選中“外標法〞，其它選項不變。點擊“確定〞。若是用內標法定量，則選“內標法〞。

從“報告〞菜單中選擇“打印報告“，則報告結果將打印到屏幕上，如想輸出到打印機上，則點擊“報告〞頂部的“打印〞鈕。可以選擇打印到文件中，如PDF格式。7.9若有多個濃度標樣，則依次調出校正數據，調出每一個校正數據后，點擊“校正〞菜單，選擇“添加級別“，第2級數入〞2“，類推。在校準表中輸入每級的組份濃度。7.10在方法菜單中，選擇“運行時選項表〞，確認“標準數據分析選項〞也被選中，點擊“確定〞。點擊“保存〞按鈕，存儲修改的方法。此方法包含校準表，建立完畢。8.使用后填寫使用登記。

9.HPLC使用過程中的本卷須知

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維和藥業標題安捷倫1290Infinity型超高效液相色譜儀使用、維護、保養規程頒發部門質量管理部編號SOP-ZL(WB)091-029.1滾動相使用中的問題9.1.1要求使用色譜純級的溶劑。

9.1.2HPLC應使用超純水，混合水溶液需用＜0.2μm的濾膜過濾。水必需放在棕色瓶中，使用前要經過超聲處理。由于水長時間放置易滋生細菌，因此應盡量使用新鮮制得的純水。當有機溶劑的比例低于10%時，最好現用現配，放置不應超過三天。當純水做為單獨一元溶劑時，應每天更換。且長時間不用，該管道及濾頭應保存在有機溶劑中。9.1.3注意過濾水相或有機相時選用不同的濾膜。常用0.45μm的濾膜，假使使用亞二微米顆粒色譜柱，檢驗使用0.2μm的濾膜。

9.1.4四氫呋喃、醚類等有機溶劑應放在棕色瓶中，以防光照變質。9.1.5注意要定期更換、過濾容積，特別是水相或緩沖鹽滾動相。9.2溶劑轉換問題

9.2.1反相色譜中溶劑轉換

若系統及柱子中為純甲醇（或乙腈），如需換到緩沖液滾動相，則至少應以20-30ml90%的水/甲醇（或乙腈）作為過渡，以免滾動相中的緩沖鹽析出，造成系統壓力過高，甚而可能堵塞管路及色譜柱。當試驗終止，沖洗柱子時，同樣也應當注意沖洗的溶劑與滾動相的兼容性。

9.2.2反相色譜與正相色譜的轉換

一般兩種條件的轉換中間一定要充足的溶劑轉換，一般會選用與水和正己烷均能以任意比例混溶的異丙醇沖洗。假使異丙醇沖洗的時間不夠，則可能會在檢測器內形成油珠狀液滴。出現類似檢測器內有氣泡的病癥。9.3避免的溶劑

9.3.1鹵化物堿金屬溶液對不銹鋼有腐蝕性的酸溶液。9.3.2高濃度的無機酸，例如：硝酸和硫