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文檔簡(jiǎn)介

章病毒感染的檢查方法與防治原則詳解演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有39頁\編輯于星期二(優(yōu)選)章病毒感染的檢查方法與防治原則現(xiàn)在是2頁\一共有39頁\編輯于星期二標(biāo)本的采集與送檢

1.標(biāo)本中常加入抗生素。2.低溫保存,盡快送檢。3.血清學(xué)標(biāo)本:兩份現(xiàn)在是3頁\一共有39頁\編輯于星期二二、病毒的分離與鑒定標(biāo)本分離培養(yǎng)動(dòng)物接種雞胚培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)病毒形態(tài)觀察光鏡電鏡包涵體病毒體CPETCID50,PFU現(xiàn)在是4頁\一共有39頁\編輯于星期二(一)病毒的分離培養(yǎng)

1.動(dòng)物接種

應(yīng)用:尚無敏感細(xì)胞的病毒培養(yǎng)動(dòng)物:兔、鼠、黑猩猩、猴等優(yōu)點(diǎn):結(jié)果易觀察,可建立動(dòng)物模型缺點(diǎn):有飼養(yǎng)條件要求,費(fèi)用高,動(dòng)物體內(nèi)常帶有潛伏病毒現(xiàn)在是5頁\一共有39頁\編輯于星期二動(dòng)物接種現(xiàn)在是6頁\一共有39頁\編輯于星期二2.雞胚培養(yǎng)

采用孵化9-14天的雞胚

絨毛尿囊膜(allantocherion)痘苗病毒、人類皰疹病毒

尿囊腔(allantoiccavity)接種部位流感病毒、腮腺炎病毒

羊膜腔(amnioticcavity)流感病毒的初次分離

卵黃囊(yolksac)嗜神經(jīng)病毒現(xiàn)在是7頁\一共有39頁\編輯于星期二現(xiàn)在是8頁\一共有39頁\編輯于星期二優(yōu)點(diǎn):易管理,不帶微生物,成本較低缺點(diǎn):操作程序復(fù)雜現(xiàn)在是9頁\一共有39頁\編輯于星期二現(xiàn)在是10頁\一共有39頁\編輯于星期二3.細(xì)胞培養(yǎng)

單層細(xì)胞培養(yǎng)(monolayercellculture)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)(suspendedcellculture)

原代細(xì)胞(primarycell)細(xì)胞種類二倍體細(xì)胞(diploidcell)傳代細(xì)胞系(continuouscellline)現(xiàn)在是11頁\一共有39頁\編輯于星期二病毒的細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)瓶單層細(xì)胞現(xiàn)在是12頁\一共有39頁\編輯于星期二

病毒增殖的指征

1.細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathiceffect,CPE)

①細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等(多數(shù)病毒);②形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞(麻疹病毒、巨細(xì)胞病毒、呼吸道合胞病毒等);③在培養(yǎng)細(xì)胞中形成包涵體(狂犬病病毒、麻疹病毒等)。現(xiàn)在是13頁\一共有39頁\編輯于星期二現(xiàn)在是14頁\一共有39頁\編輯于星期二麻疹病毒感染細(xì)胞呼吸道合胞病毒感染細(xì)胞形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞現(xiàn)在是15頁\一共有39頁\編輯于星期二形成包涵體(inclusionbody)現(xiàn)在是16頁\一共有39頁\編輯于星期二腮腺炎病毒感染細(xì)胞2.紅細(xì)胞吸附(hemadsorption)病毒囊膜表面血凝素(HA)+紅細(xì)胞表面HA受體現(xiàn)在是17頁\一共有39頁\編輯于星期二3.干擾現(xiàn)象(interference)4.細(xì)胞代謝改變

細(xì)胞代謝變慢pH變化減慢現(xiàn)在是18頁\一共有39頁\編輯于星期二

(二)病毒的鑒定

病毒形態(tài)學(xué)鑒定病毒血清學(xué)鑒定

病毒分子生物學(xué)鑒定現(xiàn)在是19頁\一共有39頁\編輯于星期二(三)病毒數(shù)量與感染性測(cè)定1.血凝試驗(yàn):病毒總量(活病毒+死病毒)2.空斑形成試驗(yàn)(plaqueformationtest)3.50%組織細(xì)胞感染量(50%tissuecultureinfectiousdose,TCID50)感染性病毒量現(xiàn)在是20頁\一共有39頁\編輯于星期二空斑試驗(yàn)現(xiàn)在是21頁\一共有39頁\編輯于星期二三、病毒感染的血清學(xué)診斷應(yīng)用:①采取標(biāo)本分離病毒為時(shí)已晚②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒③為證實(shí)所分離的病毒的臨床意義④進(jìn)行血清流行病學(xué)調(diào)查等現(xiàn)在是22頁\一共有39頁\編輯于星期二1.中和試驗(yàn)(neutralizingtest)病毒+中和抗體病毒失去感染性

特點(diǎn):特異性高,抗體維持時(shí)間長(zhǎng)應(yīng)用:人群免疫情況的調(diào)查臨床診斷少用現(xiàn)在是23頁\一共有39頁\編輯于星期二

2.血凝抑制試驗(yàn)(hemagglutinationinhibitiontest)—正粘病毒型與亞型鑒定

病毒+雞紅細(xì)胞=凝集(血凝試驗(yàn))

病毒+特異性抗體+雞紅細(xì)胞=不凝集(血凝抑制試驗(yàn))

現(xiàn)在是24頁\一共有39頁\編輯于星期二3.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)

(complementfixationtest)

用已知病毒可溶性補(bǔ)體抗原檢測(cè)病人血清中相應(yīng)的補(bǔ)體抗體

特點(diǎn):特異性低,抗體出現(xiàn)早,消失快應(yīng)用:近期感染指標(biāo)?,F(xiàn)在是25頁\一共有39頁\編輯于星期二四、病毒感染的快速診斷數(shù)小時(shí)內(nèi)出結(jié)果病毒顆粒病毒成分(抗原或核酸)早期抗體檢測(cè)(IgM)現(xiàn)在是26頁\一共有39頁\編輯于星期二(一)形態(tài)學(xué)檢查電鏡和免疫電鏡檢查普通光學(xué)顯微鏡檢查包涵體現(xiàn)在是27頁\一共有39頁\編輯于星期二(二)病毒成分檢測(cè)1.病毒蛋白抗原檢測(cè)

免疫標(biāo)記技術(shù)2.病毒核酸檢測(cè)

核酸擴(kuò)增技術(shù)核酸雜交技術(shù)基因芯片技術(shù)基因測(cè)序現(xiàn)在是28頁\一共有39頁\編輯于星期二(三)早期抗體檢測(cè)

可診斷急性感染特異性IgM抗體:孕婦感染風(fēng)疹病毒EBV早期抗原抗體

現(xiàn)在是29頁\一共有39頁\編輯于星期二第二節(jié)病毒感染的特異性預(yù)防現(xiàn)在是30頁\一共有39頁\編輯于星期二人工主動(dòng)免疫(artificialactiveimmunization):將疫苗(vaccine)或類毒素(toxoid)接種于人體,使機(jī)體主動(dòng)產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施。主要用于預(yù)防現(xiàn)在是31頁\一共有39頁\編輯于星期二疫苗

第一代疫苗第二代疫苗第三代疫苗死疫苗活疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗重組載體疫苗合成肽疫苗DNA疫苗轉(zhuǎn)基因植物疫苗現(xiàn)在是32頁\一共有39頁\編輯于星期二現(xiàn)在是33頁\一共有39頁\編輯于星期二*載體疫苗

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