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文檔簡介
放射免疫試驗詳解演示文稿現在是1頁\一共有38頁\編輯于星期四(優選)放射免疫試驗現在是2頁\一共有38頁\編輯于星期四引言放射免疫試驗以放射性核素為特征,通過測定放射性強度評估抗原-抗體反應的強度,從而實現對待測物質的定量(或定性)分析。放射免疫試驗將放射性核素的高靈敏性與抗原-抗體間的高特異性結合于一體,具有較高的分析敏感性和分析特異性。現在是3頁\一共有38頁\編輯于星期四引言放射免疫試驗創立了兩種重要標記免疫分析模式即競爭性免疫分析(放射免疫分析方法)和非競爭性免疫分析(免疫放射分析方法),同時,也創立了固相吸附分離方法,以及劑量-反應曲線的數學處理模型,為酶免疫試驗和發光免疫試驗奠定理論和實踐基礎?,F在是4頁\一共有38頁\編輯于星期四本章目錄第一節放射免疫分析方法第二節免疫放射分析方法第三節兩種方法比較第四節臨床應用第五節關鍵因素現在是5頁\一共有38頁\編輯于星期四重點提示放射免疫分析方法(原理)免疫放射分析方法(原理)現在是6頁\一共有38頁\編輯于星期四第一節放射免疫分析方法現在是7頁\一共有38頁\編輯于星期四相關知識放射免疫分析方法radioimmunoassay,RIA;首個用于超微量物質定量的標記免疫分析技術;發明人:Yalow
andBerson1959現在是8頁\一共有38頁\編輯于星期四一、分析原理放射免疫分析方法競爭性免疫分析模式標記抗原和待檢抗原同質分析體系中的抗體限量現在是9頁\一共有38頁\編輯于星期四分析原理圖:放射免疫分析方法原理示意圖(1)現在是10頁\一共有38頁\編輯于星期四圖:放射免疫分析方法原理示意圖(2)現在是11頁\一共有38頁\編輯于星期四技術(操作)要點抗原抗體反應標本與試劑混合并溫浴分離技術分離結合標記物與游離標記物發射性測量數據處理現在是12頁\一共有38頁\編輯于星期四二、抗原-抗體反應競爭模式平衡法非平衡法溫浴條件溫度酸堿度基質圖:非平衡法現在是13頁\一共有38頁\編輯于星期四三、分離技術非均相免疫分析結合標記物(Bind,B)游離標記物(Free,F)分離方法聚乙二醇沉淀法雙抗體法現在是14頁\一共有38頁\編輯于星期四分離技術圖:聚乙二醇-雙抗體法(特異性和低成本)現在是15頁\一共有38頁\編輯于星期四四、放射性測量和數據處理抗原-抗體(溫浴)分離結合標記物放射性測量數據處理現在是16頁\一共有38頁\編輯于星期四放射性測量放射性核素
125Iγ射線測量儀器采用γ計數器現在是17頁\一共有38頁\編輯于星期四
圖:標準曲線實例:現在是18頁\一共有38頁\編輯于星期四第二節免疫放射分析方法現在是19頁\一共有38頁\編輯于星期四相關知識免疫放射分析
immunoradiometricassay,IRMA非競爭性免疫分析發明人:Miles
andHales1968現在是20頁\一共有38頁\編輯于星期四一、分析原理(1)免疫放射分析單位點法適合測定小分子抗原雙位點法適合測定小分子抗原現在是21頁\一共有38頁\編輯于星期四一、分析原理(2)圖:免疫放射分析(單位點法)測定原理示意圖現在是22頁\一共有38頁\編輯于星期四一、分析原理(3)圖:免疫放射分析(雙位點法)測定原理示意圖現在是23頁\一共有38頁\編輯于星期四一、分析原理(4)雙位點法一對互相匹配的抗體捕獲抗體(與固相載體連接)檢測抗體(標記放射性核素)非競爭性免疫分析模式體系中抗體保持過量現在是24頁\一共有38頁\編輯于星期四技術要點抗原抗體反應B、F的分離放射性測量數據處理現在是25頁\一共有38頁\編輯于星期四二、分離技術固相吸附分離法固相材料捕獲抗體將結合標記物捕獲于固相材料表面,而游離標記物分布于液相中,經洗滌去除液相中的游離標記物。現在是26頁\一共有38頁\編輯于星期四固相吸附技術現在是27頁\一共有38頁\編輯于星期四固相吸附技術包被
Coating將捕獲抗體吸附于固相材料表面的過程封閉blocking用高溶度蛋白溶液封閉空白結合位點現在是28頁\一共有38頁\編輯于星期四數據處理(實例)圖:標準曲線現在是29頁\一共有38頁\編輯于星期四第三節兩種方法的比較現在是30頁\一共有38頁\編輯于星期四RIA&IRMA現在是31頁\一共有38頁\編輯于星期四RIA&IRMA放射免疫分析液相狀態的抗原與抗體反應免疫放射分析固相表面與液相狀態之間的抗原抗體反應抗體固相化對抗體結構和功能的影響現在是32頁\一共有38頁\編輯于星期四第四節臨床應用現在是33頁\一共有38頁\編輯于星期四歷史地位方法建立
20世紀60年代快速發展
20世紀80年代~90年代現在是34頁\一共有38頁\編輯于星期四臨床應用體內激素水平
病原體抗原或抗體腫瘤標志物藥物測定現在是35頁\一共有38頁\編輯于星期四臨床應用現存檢測項目反三碘甲狀腺原氨酸(分子量651Da)、胃泌素(分子量2098Da)、醛固酮(分子量364Da)、血管緊張素-I(分子量1200Da)和血管緊張素-Ⅱ(分子量1046Da)現在是36頁\一共有38頁\編輯于星期四第五節關鍵因素現在是37頁\
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