第一次實驗

細菌(xìjūn)的形態和結構觀察介紹實驗室有關的內容實驗(shíyàn)內容實驗小結

228963373/23/20231第一頁，共四十七頁。學習(xuéxí)要求1、初步了解病原生物學和免疫學實驗技術的概念和內容；2、熟悉(shúxī)病原生物學實驗室的注意事項；3、掌握顯微鏡的使用和保護方法；4、掌握細菌的基本形態和特殊結構；5、掌握細菌的革蘭染色法；6、了解細菌的運動特點。3/23/20232第二頁，共四十七頁。介紹實驗室有關(yǒuguān)的內容

1、總論微生物實驗寄生蟲實驗免疫學技術2、實驗室注意事項評分標準清潔衛生操作規程(cāozuòguīchéng)顯微鏡管理等3/23/20233第三頁，共四十七頁。實驗(shíyàn)內容1、顯微鏡使用和保護(bǎohù)（錄像）2、細菌的鏡下形態觀察（學生操作）3、細菌的特殊結構（學生操作）4、革蘭染色（學生操作）5、細菌的動力觀察錄像（教師示教）3/23/20234第四頁，共四十七頁。3/23/20235第五頁，共四十七頁。實驗(shíyàn)小結1、顯微鏡油鏡的使用和保護2、細菌的基本形態①球菌②桿菌③螺形菌

3、細菌的特殊結構①莢膜②鞭毛③芽胞④菌毛4、細菌的革蘭染色法5、注意事項：評分、衛生、操作(cāozuò)、管理。3/23/20236第六頁，共四十七頁。end3/23/20237第七頁，共四十七頁。細菌(xìjūn)的基本形態觀察(發片)1、球菌鏡下形態：①葡萄球菌②鏈球菌③肺炎鏈球菌④腦炎(nǎoyán)奈瑟菌2、桿菌鏡下形態：①大腸埃希菌②破傷風梭菌③產氣莢膜梭菌④變形桿菌3、螺形菌革蘭染色片：

霍亂弧菌或水弧菌

3/23/20238第八頁，共四十七頁。細菌(xìjūn)的特殊結構(示教片)1．肺炎球菌莢膜染色(rǎnsè)示教片（示莢膜）2．變形桿菌鞭毛染色示教片（示鞭毛）3．破傷風梭菌芽胞染色或革蘭染色示教片（示芽胞）3/23/20239第九頁，共四十七頁。

細菌(xìjūn)的革蘭染色革蘭染色法是細菌檢驗中最常用的一種染色法。利用革蘭染色法，可將細菌分為兩大類，有助于鑒別細菌和選擇用藥等。1、革蘭染色法原理

2、革蘭染色法操作步驟3、革蘭染色結果通過革蘭染色可以觀察到什么？細菌的形態(xíngtài)、排列、莢膜、芽胞3/23/202310第十頁，共四十七頁。革蘭蘭陰陰性性菌菌因其其細細胞胞壁壁中中肽肽聚聚糖糖含含量量少少，，結結構構疏疏松松，，脂脂類類物物質質含含量量高高而而被被酒酒精精脫脫色色(tuōōsèè)，經經復復染染呈呈紅紅色色。。革蘭蘭染染色色(rǎǎnsèè)原理理：：革蘭蘭陽陽性性菌菌因細細胞胞壁壁中中含含有有大大量量的的肽肽聚聚糖糖和和磷磷壁壁酸酸，，且且結結構構致致密密，，可可保保留留結結晶晶紫紫與與碘碘的的復復合合物物，，并并不不被被酒酒精精(jiǔǔjīīng)脫色色而而顯顯示示為為紫紫藍藍色色。。1/16/202311第十一頁頁，共四四十七頁頁。

革蘭染色方法(錄像）涂片自然干燥火焰固定染色染色過程：

已固定的涂片加結晶紫1分鐘，水沖洗滴加碘液1分鐘，水沖洗95%酒精20~30秒稀釋石炭酸復紅1分鐘，水沖洗待干鏡檢初染媒染脫色復染一般用室室溫干燥燥(gānzào)，注意必必須完全全干燥(gānzào)后方可固固定。涂片在酒酒精燈火火焰上快快速通過過3～～4次以以固定細細菌，并并使其不不易從玻玻片上脫脫落。注注意不要要將涂片片直接放放在火焰焰上烤，，以免(yǐmiǎn)破壞細菌菌結構。。1/16/202312第十二頁頁，共四四十七頁頁。用滅菌的接種環環取無菌菌生理鹽鹽水1-2環，，置于玻玻片中。。接種環環滅菌，，待接種種環冷卻后，挑取適適量培養養物混合合于鹽水水中，涂涂抹均勻勻使成一一層薄膜膜（若檢檢材是液液體則不不必加生生理鹽水水）薄膜涂抹抹的面積積約1.5×2.0cm。按上法法制備(zhììbèi)大腸桿菌菌涂膜。。1/16/202313第十三頁頁，共四四十七頁頁。1/16/202314第十四頁頁，共四四十七頁頁。葡萄球菌菌(pútáoqiújūn)（革蘭染染色）1/16/202315第十五五頁，，共四四十七七頁。。葡萄球球菌(púútáoqiúújūn)（革蘭蘭染色色）1/16/202316第十六六頁，，共四四十七七頁。。葡萄球球菌(púútáoqiúújūn)電鏡照照片1/16/202317第十七七頁，，共四四十七七頁。。鏈球菌菌（革革蘭染染色(rǎǎnsè)）1/16/202318第十八八頁，，共四四十七七頁。。鏈球菌菌（革革蘭染染色(rǎǎnsè)）1/16/202319第十九九頁，，共四四十七七頁。。鏈球菌菌電鏡鏡照片片(zhàopiàn)1/16/202320第二十十頁，，共四四十七七頁。。奈瑟菌菌（革革蘭染染色(rǎǎnsè)）1/16/202321第二十十一頁頁，共共四十十七頁頁。雙球菌菌（革革蘭染染色(rǎǎnsè)）1/16/202322第二十二頁頁，共四十十七頁。雙球菌電鏡鏡照片(zhàopiàn)1/16/202323第二十三頁頁，共四十十七頁。大腸(dàcháng)埃希菌（革蘭染色））1/16/202324第二十四頁頁，共四十十七頁。大腸(dàcháng)埃希菌（革蘭染色色）1/16/202325第二十五頁頁，共四十十七頁。大腸(dàcháng)埃希菌電鏡照片1/16/202326第二十六頁頁，共四十十七頁。霍亂弧菌（（革蘭染色色(rǎnsè)）霍亂弧菌(hújūn)電鏡照片1/16/202327第二十七頁頁，共四十十七頁。莢膜莢莢膜1/16/202328第二十八頁，，共四十七頁頁。莢膜1/16/202329第二十九頁，，共四十七頁頁。莢膜1/16/202330第三十頁，共共四十七頁。。變形桿菌鞭毛毛(biānmáo)染色（示鞭毛毛(biānmáo)）1/16/202331第三十一頁，，共四十七頁頁。變形桿菌鞭毛毛(biānmáo)電鏡照片（（示鞭毛(biānmáo)）1/16/202332第三十二頁，，共四十七頁頁。破傷風梭菌（（示芽胞）革蘭染色(rǎnsèè)和芽胞染色(rǎnsèè)1/16/202333第三十三頁，，共四十七頁頁。破傷風梭菌芽芽胞染色(rǎnsèè)（示芽胞）1/16/202334第三十四頁，，共四十七頁頁。破傷風梭菌革革蘭染色(rǎnsèè)（示芽胞）1/16/202335第三十五頁，，共四十七頁頁。破傷風梭菌芽芽胞電鏡照片片(zhàopiàn)（示芽胞）1/16/202336第三十六頁，，共四十七頁頁。產氣莢膜梭菌菌革蘭染色(rǎnsèè)（示莢膜）1/16/202337第三十七頁，，共四十七頁頁。1/16/202338第三十八頁，，共四十七頁頁。1/16/202339第三十九頁，，共四十七頁頁。1/16/202340第四十頁，共共四十七頁。。1/16/202341第四十一頁，，共四十七頁頁。霍亂弧菌（革革蘭染色(rǎnsèè)）霍亂(huòluàn)弧菌電鏡照片片1/16/202342第四十二頁，，共四十七頁頁。1/16/202343第四十三頁，，共四十七頁頁。1/16/202344第四十四頁，，共四十七頁頁。1/16/202345第四四十十五五頁頁，，共共四四十十七七頁頁。。1、、實實驗驗時時不不遲遲到到、、不不早早退退。。2、、實實驗驗時時要要保保持持實實驗驗室室內內的的整整潔潔、、安安靜靜。。3、、正正確確使使用用(shǐǐyòòng)顯微微鏡鏡，，觀觀察察完完畢畢應應把把鏡鏡頭頭和和載載玻玻片片上上的的鏡鏡油油擦擦凈凈。。4、、各各實實驗驗小小組組的的實實驗驗用用品品、、由由各各組組保保管管使使用用，，不不得得隨隨意意與與他他組組調調換換或或挪挪用用。。如如需需補補發發或或增增添添，，應應說說明明原原因因。。5、、每每次次實實驗驗后后應應清清點點實實驗驗器器材材、、用用品品數數量量，，如如有有遺遺失失或或損損壞壞應應按按規規定定賠賠償償。。動動物物及及標標本本要要按按規規定定處處理理，，不不可可(bùùkěě)擅自自拿拿走走。。6、、實實驗驗結結束束后后，，各各組組應應自自覺覺清清理理實實驗驗器器材材，，值值日日生生做做好好全全室室清清潔潔工工作作，，關關好好門門窗窗、、水水電電，，經經指指導導教教師師(jiààoshīī)檢查查合合格格后后方方可可離離開開實實驗驗室室。。1、、要要按按時時完完成成實實驗驗報報告告。。2、、實實驗驗報報告告要要保保證證準準確確、、工工整整、、美美觀觀。。3、、實實驗驗課課結結束束要要將將實實驗驗報報告告交交病病原原生生物物學學實實驗驗室室評評分分存存檔檔。。1、、操操作作考考核核。。2、、大大體體標標本本考考核核。。3、、鏡鏡下下標標本本考考核核。。病原原生生物物學學與與醫醫學學免免疫疫學學實實驗驗是是獨獨立立計計分分的的學學科科總評評分分為為100分分（（平平時時成成績績40分分+考考核核成成績績60分分））1、、平平時時成成績績40分