(全國通用)18屆高考生物二輪復習基因工程和細胞工程專題卷1LtDPAGE14PAGE4。。。內部文件，版權追溯內部文件，版權追溯基因工程和細胞工程一、單選題1．A．有絲分裂B．減數分裂 C．細胞脫分化 D．細胞再分化【答案】B【解析】2．1958年，美國科學家通過培養一種什么植物的什么部位細胞，證明植物細胞具有全能性：A.洋蔥、鱗片葉肉細胞 B.胡蘿卜、韌皮部細胞C.水稻、葉肉細胞 D.小麥、莖的皮層細胞【答案】B隆羊多利是英國科學家培育而成的，沒有我國科學家參與，④錯誤；⑤人類基因組計劃是由美國、英國、法國、德國、日本和我國科學家共同參與的，⑤正確。考點：生物科學史6．某同學在學習“細胞工程”時，列表比較了動植物細胞工程的有關內容，你認為有幾處是不正確的（）植物細胞工程動物細胞工程技術手段植物組織培養，植物體細胞雜交動物細胞培養和融合，單克隆抗體的制備，動物體細胞核移植特殊處理鹽酸解離去除細胞壁胰蛋白酶處理，制細胞懸浮液融合方法物理方法，化學方法物理方法，化學方法，生物方法典型應用人工種子，雜種植物單克隆抗體的制備培養液區別蔗糖是離體組織賴以生長的成分動物血清不可缺少A.0B.1C.2D.3【答案】B【解析】制備原生質體時，除去細胞壁，應使用纖維素酶和果膠酶。使用鹽酸除去細胞壁會損傷原生質體。7．細胞工程是一門綜合科學技術。下列哪項技術不屬于細胞工程A．有性雜交 B．植物體細胞雜交C.植物組織培養 D.細胞核移植【答案】A【解析】本題考查的是細胞工程的有關內容。細胞工程是指應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法，通過某種工程學手段，在細胞整體水平或細胞器水平上，按照人們的意愿來改變細胞內的遺傳物質或獲得細胞產品的一門綜合科學技術。植物體細胞雜交、植物組織培養、細胞核移植均屬于細胞工程。而有性雜交是通過基因重組的原理來完成的，不屬于細胞工程。故本題選A。8．下列對動物細胞融合、植物體細胞雜交和生物個體雜交的比較中，不正確的是A．動物細胞融合與植物體細胞雜交都可以克服不同種生物之間的種間障礙B．植物體細胞雜交與動物細胞融合涉及到的技術不完全相同C．生物個體雜交屬于有性生殖，而植物體細胞雜交屬于無性生殖D．動物細胞融合與植物體細胞雜交的基本原理相同，均是細胞全能性的表達【答案】D【解析】動物細胞融合的原理是動物細胞膜的流動性，植物體細胞雜交的原理是植物細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。9．關于動物細胞培養的敘述，不正確的是A.培養基中應加入動物血清B.培養基添加胰島素可促進細胞對葡萄糖的攝取C.胰蛋白酶能分散動物細胞D.動物細胞培養的原理是細胞具有全能性【答案】D【解析】略10．下列生物學過程中體現了細胞全能性的是（）A.轉基因玉米種子萌發長成新植株B.小鼠的造血干細胞形成各種血細胞C.小麥花粉培育成愈傷組織D.經體細胞雜交獲得白菜-甘藍雜種植株【答案】D【解析】玉米種子不是一個細胞，因此玉米種子萌發長成新植株的過程不能體現細胞全能性，A錯誤；小鼠骨髓造血干細胞形成各種血細胞，但沒有形成完整的個體，因此該過程不能體現細胞全能性，B錯誤；小麥花粉培育成愈傷組織，但沒有形成完整的個體，該過程不能體現細胞全能性，C錯誤；體細胞雜交培育成白菜-甘藍雜種植株能體現植物細胞的全能性，D正確。【點睛】解答本題關鍵能理清全能性的體現判斷方法，確定是否表現細胞全能性的實例時，要注意“起點”和“終點”以及條件，判斷方法如下：一看起點起點是“已分化的細胞”二看終點終點是“個體”，而不是“組織器官”11．單克隆抗體技術在疾病診斷和治療以及生命科學研究中具有廣泛的應用。下列關于單克隆抗體的敘述，錯誤的是（）A.與抗癌藥物結合可制成生物導彈B.體外培養B淋巴細胞可大量分泌單克隆抗體C.特異性強、靈敏度高D.由漿細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞分泌【答案】B【解析】試題分析：A.單克隆抗體+放射性同位素、化學藥物或細胞毒素可制成生物導彈，借助單克隆抗體的定位導向作用將藥物定向帶到癌細胞，在原位殺死癌細胞。療效高，副作用小，位置準確；正確。B.B淋巴細胞：能產生特異性抗體，在體外不能無限繁殖；體外培養雜交瘤細胞不可大量分泌單克隆抗體；錯誤。C.特單克隆抗體的優點：特異性強、靈敏度高，并可能大量制備；正確。D.由漿細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞，既能大量增殖，又能產生特異性抗體；正確考點：單克隆抗體制備。點評：考查基本，來自課本，是基礎知識考試的理想題目，學生應理解加記憶。12．下圖所示為植物體細胞雜交技術的過程，錯誤的是（）A．A和B細胞誘導融合前要先去除細胞壁，可用纖維素酶和果膠酶處理B．從A和B細胞到C細胞的過程中，常用離心、振動、電刺激、聚乙二醇（PEG）作為誘導劑C．A和B細胞融合完成的標志是再生出新的細胞壁D．植物體細胞雜交技術的目的是獲得雜種細胞【答案】D【解析】試題分析：植物細胞最外層是細胞壁，所以要誘導植物細胞融合，先用纖維素酶和果膠酶出去細胞壁；A正確。誘導原生質體融合常用離心、振動、電刺激、聚乙二醇（PEG）作為誘導劑；B正確。植物細胞融合完成的標志是再生出新的細胞壁；C正確。植物體細胞雜交技術的目的是獲得雜種植物；D錯誤。考點：本題考查植物體細胞雜交技術的相關知識，意在考查識記及理解應用知識的能力。13．下列關于生物工程中常見的幾種酶的敘述，正確的是A．DNA連接酶可把目的基因與載體的黏性末端的堿基黏合，形成重組DNAB．限制性核酸內切酶將一個DNA分子片段切成兩個片段需消耗一個水分子C．Taq酶是用PCR儀對DNA分子擴增過程中常用的一種耐高溫的DNA聚合酶D．纖維素酶和果膠酶處理植物細胞獲得原生質體，便于植物雜交育種【答案】C【解析】試題分析：DNA連接酶可把目的基因與載體的黏性末端的黏合，形成磷酸二酯鍵，形成重組DNA，A錯誤；限制性核酸內切酶將一個DNA分子片段切成兩個片段破壞2個磷酸二酯鍵，需消耗兩個水分子，B錯誤；Taq酶是用PCR儀對DNA分子擴增過程中常用的一種耐高溫的DNA聚合酶，C正確；纖維素酶和果膠酶處理植物細胞獲得原生質體，便于原生質體融合，D錯誤。考點：本題考查生物工程中酶的相關知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成知識網絡的能力。14．下列說法不正確的是A.干擾素幾乎能抵抗所有病毒引起的感染B.采用農桿菌轉化法，不能將目的基因導入多數單子葉植物細胞，關鍵原因是多數單子葉植物細胞不能合成酚類化合物C.基因探針的工作原理是堿基互補配對，基因探針既可以檢測DNA分子，又可以檢測基因轉錄產物RNAD.啟動子位于mRNA上，是RNA聚合酶識別和結合的部位【答案】D【解析】干擾素是動物或人體細胞受到病毒侵染后產生的一種糖蛋白，它幾乎能抵抗所有病毒引起的感染，是一種抗病毒的特效藥，A正確；農桿菌易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力，原因是多數單子葉植物細胞不能合成酚類化合物，B正確；基因探針是單鏈DNA，既可以檢測DNA分子，又可以檢測基因轉錄產物RNA，C正確；啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，能啟動轉錄過程，位于DNA上，D錯誤。【點睛】易錯混淆，誤認為啟動子存在于mRNA上，其實啟動子和終止子都存在于DNA上，起始密碼子和終止密碼子才存在于mRNA上。15．下圖為生長素和細胞分裂素在植物組織培養中的相互作用圖，其中圖甲為對照。圖乙愈傷組織分化出根說明培養基中（）A.細胞分裂素多，生長素少B.細胞分裂素少，生長素多C.細胞分裂素和生長素相等D.只有生長素【答案】B【解析】生長素和細胞分裂素的比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成，故愈傷組織分化出根，說明培養基中生長素多，細胞分裂素少。【考點定位】植物培養的條件及過程16．下圖為體細胞核移植制備轉基因小鼠的流程，相關敘述正確的是（）A．此技術體現了ES細胞核具有全能性B．過程①可以采用聚乙二醇或滅活的病毒進行誘導C．過程②需在培養基中加入抗生素和動物血清D．過程③應對代孕小鼠進行同期發情和免疫抑制處理【答案】AC【解析】試題分析：利用ES細胞核和去核普通小鼠受精卵形成重組細胞可以培育成完整的個體，能體現ES細胞核的全能性，A正確；核移植過程中不需要用聚乙二醇或滅活的病毒進行誘導，聚乙二醇或滅活的病毒是用來誘導細胞融合的，B錯誤；動物細胞培養時要保證細胞能順利生長和繁殖，需要添加血清；添加抗生素為防止細菌在培養液中生長繁殖,利于細胞的培養，C正確；同期發情處理能使兩者體內的子宮內膜的狀態、各種激素水平都具有一致性，保證移植后的胚胎具有最合適的發育環境，是胚胎移植成功的基本條件；代孕母鼠對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應，所以不需要免疫抑制處理。D錯誤。考點：本題考查的是胚胎移植和全能性概念的相關知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系的能力。17．科學家把天竺葵的原生質體和香茅草的原生質體進行誘導融合，培育出的驅蚊草含有香茅醛，能散發出一種特殊的氣味達到驅蚊且對人體無害的效果。下列關于驅蚊草培育的敘述中，錯誤的是（）A.驅蚊草的培育屬于細胞工程育種，其優點是能克服遠緣雜交不親和的障礙B.驅蚊草的培育過程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG試劑或離心、振動、電刺激等方法C.驅蚊草的培育過程是植物體細胞雜交，不同于植物組織培養，無愈傷組織和試管苗形成D.驅蚊草不能通過天竺葵和香茅草雜交而獲得，是因為不同物種間存在生殖隔離【答案】C【解析】植物體細胞雜交的優點是能克服遠緣雜交不親和的障礙，A正確；在植物的體細胞雜交過程中，需要使用纖維素酶和果膠酶去掉細胞壁，獲得原生質體，然后用聚乙二醇試劑或離心、振動、電刺激等方法誘導原生質體融合，經過植物組織培養技術，最終獲得所需要的個體，B正確，C錯誤；不同物種之間存在生殖隔離，D正確。18．單克隆抗體制備過程中所采用的生物工程技術包括（）①細胞培養②細胞融合③胚胎移植④細胞核移植A.①②B.②③C.③④D.①③【答案】A【解析】單克隆抗體制備過程需要用到動物細胞培養、動物細胞融合技術。19．通過動物體細胞核移植培育出的克隆牛，在性狀上與供體不完全相同，原因不包括（）A.環境條件影響克隆牛的性狀B.克隆牛基因可能發生了突變C.兩者細胞質基因不同D.兩者細胞核基因不同【答案】D【解析】本題考查克隆牛的遺傳物質來源分析，要求考生理解克隆牛的細胞核與細胞質中的遺傳物質來自于兩個不同的親本，因此其性狀與供體性狀有一定的差異。通過動物體細胞核移植培育出的克隆牛，其遺傳物質有兩個親本來源，即細胞核中遺傳物質來自于供核的親本，細胞質中遺傳物質來自于提供去核卵母細胞的親本，此外克隆牛在發育過程中還可能發生了突變，導致克隆牛在性狀上與供體不完全相同，因此D符合題意，ABC不符合題意。【點睛】易錯知識——克隆牛培育過程的技術手段及遺傳物質來源分析:1.克隆牛的誕生是體細胞核移植技術的應用，利用的技術手段包括細胞核移植技術、早期胚胎培養技術、胚胎移植技術等。2.克隆牛具有三個親本，一個提供核遺傳物質，一個提供細胞質遺傳物質，一個提供發育環境和營養條件，同時發育過程中細胞分裂時還可能發生基因突變和染色體變異，環境條件對表現型也會產生一定的影響，所以克隆牛的性狀與各親本都不完全相同；但由于決定性別的性染色體來自于提供細胞核的親本，故克隆牛的性別一定與供核親本相同。20．如圖為某個基因的部分片段，關于該結構的敘述，正確的是A.①所圈定的部位是腺嘌呤B.DNA連接酶作用于②處C.限制酶作用于③處D.解旋酶作用于④處【答案】B【解析】①所圈定的部位是腺嘌呤脫氧核苷酸，A項錯誤；限制酶和DNA連接酶作用于兩個脫氧核苷酸之間的化學鍵②處，B項正確，C項錯誤；解旋酶作用于堿基對之間的氫鍵③處，D項錯誤。二、非選擇題21．根據圖示回答相關問題。(1)①過程中使用了________酶，以使植物原生質體相互分離，此處使用的溶液濃度較大，保證植物細胞會發生________，以保護細胞原生質體不被破壞；在動物細胞培養技術中，使細胞分離開來的酶是________。(2)③處的細胞與④處的細胞相比，最大的區別是不具有________；動物細胞與④處的細胞相比，在功能上的特點是不具有________。(3)過程________屬于再分化；動植物細胞發生分化的根本原因都是________。(4)③處的細胞在化學藥劑________的作用下，會發生細胞融合；動物細胞融合方法與植物細胞不相同的是______________________。【答案】(1)纖維素酶和果膠質壁分離胰蛋白酶(2)細胞壁分化的全能性(3)⑨⑩基因的選擇性表達(4)聚乙二醇可以使用滅活的病毒【解析】試題分析：根據題意和圖示分析可知：①過程是使用含有纖維素酶和果膠酶的高濃度溶液處理植物葉片的細胞，使植物葉片的細胞發生質壁分離且原生質體相互分離；②處植物細胞的部分細胞壁已經被水解；③處是去除了細胞壁的植物細胞原生質體；④處是再生出細胞壁的植物細胞；⑤處是再生出細胞壁的植物細胞進行了第一次分裂；⑥處是再生出細胞壁的植物細胞進行了第二次分裂；⑦處是再生出細胞壁的植物細胞經過多次分裂形成了集群的細胞團；⑧處是形成的愈傷組織；⑨是發生再分化的過程；⑩是胚狀體繼續分化的過程。在動物細胞培養技術中，用胰蛋白酶使細胞分離開來；植物細胞具有全能性，動物細胞的細胞核具有全能性；動植物細胞發生分化的根本原因都是基因的選擇性表達；聚乙二醇能促進動植物細胞發生融合，用滅活的病毒只能促進動物細胞融合。考點：本題考查植物組織培養的相關知識，意在考查學生理解所學知識的要點，要求能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論的能力及能從圖示中獲取相關的生物學信息的能力。22．【生物——選修3：現代生物科技專題】我國一科研團隊將小麥液泡膜Na+/K+逆向轉運蛋白基因（TaNHX2基因）轉移到水稻細胞內，獲得了轉基因耐鹽水稻新品種。回答下列有關問題：（1）為保證目的基因在水稻細胞中能夠表達，運載體上應含有特定的______________。A.復制原點B.啟動子C.標記基因（2）水稻的轉化過程為：將水稻幼胚接種到誘導培養基上，經過___________傷組織，然后用___________法，將目的基因和相關功能片段整合到愈傷組織細胞的染色體DNA上，最后誘導愈傷組織形成水稻植株。（3）為驗證外源基因整合到水稻基因組后是否轉錄，可從轉基因植株的細胞中提取所有mRNA并反轉錄成___________，再以反轉錄產物為模板，利用TaNHX2基因特異引物，通過__________方法進行基因擴增。若以根細胞為材料擴增結果為陽性（有產物生成），以葉細胞為材料擴增結果為陰性（無產物生成)，則說明_________________________________。（4）將生長至4葉期的轉基因幼苗轉入高濃度的NaCl溶液中培養，進行耐鹽實驗，用非轉基因幼苗作為對照。培養30天后觀察現象，若_______________________________則說明轉基因植株獲得了耐鹽特性。【答案】啟動子脫分化農桿菌轉化法cDNA（互補DNA）PCR目的基因（TaNHX2基因）僅在根細胞中轉錄，未在葉細胞中轉錄（回答“基因選擇性表達”不給分）轉基因植株存活率高于非轉基因植株（轉基因植株葉片不變黃，非轉基因植株葉片變黃，其它答案合理可給分）【解析】分析：植物組織培養過程：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進而形成完整的植株。目的基因的檢測與鑒定1，分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術；2，個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。（1）啟動子是RNA聚合酶識別和結合的位點，為保證目的基因在水稻細胞中能夠表達，運載體上應含有特定的啟動子；（2）幼胚經過脫分化過程，培養出愈傷組織，然后單子葉植物常用農桿菌轉化法用法。（3）有mRNA并反轉錄的產物是cDNA（互補DNA），PCR方法可以快速擴增目的基因。若以根細胞為材料擴增結果為陽性（有產物生成），以葉細胞為材料擴增結果為陰性（無產物生成），則說明目的基因（TaNHX2基因）僅在根細胞中轉錄，未在葉細胞中轉錄；（4）在進行個體生物學水平檢測時，若觀察發現轉基因植株存活率高于非轉基因植株，則說明轉基因植株獲得了耐鹽特性。23．綠色熒光蛋白（GFP)會發出綠色熒光，該蛋白質在生物工程中有著廣闊的應用前景。請據圖回答相關問題：（1）形成重組質粒時，如果限制性內切酶Ⅰ的識別序列和切點是一G↓GATCC—，限制性內切酶Ⅱ的識別序列和切點是一↓GATC—。在質粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因兩側各有一個酶Ⅱ的切點。在DNA連接酶和上述兩種不同限制酶的作用下，能否將質粒和目的基因連接起來？_____________理由是__________。（2）構建重組質粒時，限制酶切點應位于_____________和_____________之間，保證綠色熒光蛋白基因的正常表達。寫山該基因表達過程包含的信息傳遞圖解：______________________。（3）在②過程進行轉基因體細胞的篩選時的方法是_______________________。（4）在核移植過程中，乙兔提供的細胞應是______________________。（5）通過推測氨基酸排序，可以找到______________，造出能吸收、發出不同顏色光的熒光蛋白，并能讓它們發光更久、更強烈。【答案】可以連接由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端相同（可互補）啟動子終止子轉基因細胞發出綠色熒光減數第二次分裂中期（次級）卵母細胞對應脫氧核苷酸序列【解析】試題分析：可以看出該熒光克隆兔涉及了多項生物工程技術．首先導入目的基因的甲兔的成纖維細胞要經過動物細胞培養篩選出轉基因體細胞，然后該細胞與乙兔的卵細胞進行細胞核移植獲得重組細胞，重組細胞經過早期胚胎培養到桑葚胚或囊胚期，最后經過胚胎移植技術將早期胚胎移植到代孕母兔子宮內，最后生成熒光克隆兔．該過程中利用基因工程、動物細胞培養、細胞核移植、早期胚胎培養和胚胎移植等技術。（1）①限制性內切酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-，因此質粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端為：．②限制性內切酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-，因此目的基因兩側被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端為：．③限制性內切酶Ⅰ和限制性內切酶Ⅱ的識別序列和切點不同，但兩種切割形成的黏性末端相同，因此可在DNA連接酶的作用下連接起來，形成重組DNA分子.。（2）啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA，終止子的作用是使轉錄在所需要的地方停止，所以構建重組質粒時，限制酶切點應位于啟動子和終止子之間，保證綠色熒光蛋白基因的正常表達．該基因表達過程包含的信息傳遞圖解：。（3）在②過程進行轉基因體細胞的篩選時，比較簡易的篩選方法是轉基因細胞能否發出綠色熒光。（4）在核移植過程中，乙兔提供的細胞應是減數第二次分裂中期（次級）卵母細胞。（5）通過推測氨基酸排序，可以找到對應脫氧核苷酸序列，造出能吸收、發出不同顏色光的熒光蛋白，并能讓它們發光更久、更強烈。【答案】(1)選取香蕉外植體，通過誘導脫分化產生愈傷組織，然后通過調整植物激素比例，再分化形成芽和根，獲得大量試管苗（或通過誘導大量形成胚狀體，制成人工種子，適宜條件下萌發長成幼苗）。(2）莖尖（分生組織）組織培養；莖尖不帶病毒（或病毒在植物體內分布不均勻）；植物細胞全能性。(3)①BBTV病毒基因的檢測（DNA分子雜交技術）；②BBTV病毒蛋白的檢測（獲得抗血清，利用抗原一抗體的雜交反應，判斷病毒是否存在）。(4）①選擇NaCl溶液的合適濃度，利用DNA和其它雜質在不同NaCl溶液中溶解度不同的特性，達到分離目的；②加人一定量酒精，使部分蛋白質雜質溶解于酒精，與DNA分離；③加人蛋白酶，除去蛋白質雜質的干擾；④控制DNA提取的溫度，使大多數蛋白質雜質變性。（5)將afp基因插人土壤農桿菌的質粒，構建表達載體，通過農桿菌的轉化導人香蕉受體細胞，成功轉化的香蕉細胞通過組織培養形成植株。生態安全問題包括：①外源基因擴散到其他物種（外源基因漂移）；②轉基因植株擴散影響生態系統的結構和功能；③轉基因植株擴散對生物多樣性的影響；④轉基因植物殘體或分泌物對環境的影響。（6）體細胞雜交育種，其依據是將不同品種的香蕉體細胞利用細胞融合技術融合成雜種細胞后培育出抗寒香蕉品種（或體細胞誘變育種，其依據是利用誘變劑等方法使香蕉離體培養細胞發生基因突變，然后篩選培育出抗寒品種）。蛋白質工程方法的步驟為：①果膠裂解酶蛋白的功能分析，②果膠裂解酶蛋白的結構預測和設計，③果膠裂解酶基因的改造。【解析】脫毒植物就是培育無病毒的植物，采用植物的莖尖、芽等進行植物組織培養，可快速繁殖無病毒的植物。檢測病毒的存在可利用基因檢測、抗原—抗體反應等技術。利用植物體細胞雜交技術可將不同香蕉的優良性狀集中到雜種植株中25．育種工作者利用不同的方法進行了如下四組實驗。請據圖回答問題。（1）圖Ⅰ過程由番茄韌皮細胞形成幼苗A的過程需要經過兩個關鍵步驟，該過程依據的原理是。（2）植物組織培養除了需要提供一定的營養、、溫度和光照外，還必須在的條件下培養。（3）已知番茄的紅果(Y)對黃果(y)為顯性，少室(M)對多室(m)為顯性，控制兩對相對性狀的基因分別位于兩對同源染色體上。用紅果多室(Yymm)番茄植株的花粉進行Ⅱ、Ⅲ有關實驗，則II過程中，從花粉形成幼苗B所進行的細胞分裂方式是。Ⅲ過程中植物體C的基因型。（細胞A為兩兩融合細胞）（4）圖Ⅲ、Ⅳ過程中需要去除細胞壁，獲得具有活力的。（5）在圖中Ⅳ過程中，經過鑒別和篩選后，通常植物體D能表現出兩個親本的遺傳性狀，根本原因是。【答案】（1）脫分化和再分化植物細胞全能性（2）植物激素(生長素、細胞分裂素)無菌(1分)（3）有絲分裂YYmm或Yymm或yymm（4）原生質體（5）具有兩個親本的遺傳物質【解析】試題分析：（1）圖Ⅰ過程由番茄韌皮細胞形成幼苗A的過程需要經過脫分化和再分化兩個關鍵步驟，該過程依據的原理是植物細胞全能性。（2）植物組織培養除了需要提供一定的營養、植物激素(生長素、細胞分裂素)、溫度和光照外，還必須在無菌的條件下培養。（3）已知番茄的紅果(Y)對黃果(y)為顯性，少室(M)對多室(m)為顯性，控制兩對相對性狀的基因分別位于兩對同源染色體上。用紅果多室(Yymm)番茄植株的花粉進行Ⅱ、Ⅲ有關實驗，則II過程中，從花粉形成幼苗B所進行的細胞分裂方式是有絲分裂。Ⅲ過程中植物體C的基因型YYmm或Yymm或yymm。（細胞A為兩兩融合細胞）（4）圖Ⅲ、Ⅳ過程中需要去除細胞壁，獲得具有活力的原生質體。（5）在圖中Ⅳ過程中，經過鑒別和篩選后，通常植物體D能表現出兩個親本的遺傳性狀，根本原因是具有兩個親本的遺傳物質。考點：本題考查植物細胞工程，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成知識的網絡結構。26．[生物—選修3：現代生物科技專題]2016年9月英國《新科學家》雜志披露：美國華裔科學家張進團隊利用“三父母嬰兒”技術，使一對約旦夫婦成功產下一個健康男嬰（嬰兒母親的線粒體攜帶有亞急性壞死性腦病基因，曾導致多次流產、嬰兒夭折）。所謂“三父母嬰兒”技術，是指利用有線粒體基因缺陷的女性卵子中的健康細胞核和捐贈者去掉細胞核的卵子，“拼裝”一個新的卵子，再通過一系列現代生物技術，最終培育出正常嬰兒的技術。請回答下列問題：（1）為重新“拼裝”卵子，需要通過顯微操作進行_____。接下來他們又使用電脈沖方法來______“拼裝”的卵子。（2）在對“拼裝”卵子體外受精前，需要對收集的精子進行_______處理，哺乳動物的處理方法有化學誘導法和____________兩種。（3）受精卵形成后，應將其移入______中繼續培養。人的體外受精胚胎，即試管胚胎，可在8—16個細胞階段進行__________________。（4）張進告訴記者：他們碰巧、也是故意要“制造”男孩。因為男性的線粒體_______（填“會”或“不會”）不會傳給下一代，理由是_________________________。【答案】核移植激活獲能培養法發育培養液胚胎移植不會線粒體位于精子的尾部，受精作用進行時通常是含有細胞核的頭部進入卵細胞，而尾部留在外面【解析】試題分析：根據題干信息分析，“三親嬰兒”的三親分別為捐贈者（提供去掉細胞核的卵子）、母親（提供一半細胞核基因）、父親（提供一半細胞核基因）。（1）重新“拼裝”卵子指的是將母親卵細胞的核移植到捐贈者的去核卵細胞中，而后還需要用電脈沖方法來激活“拼裝”的卵子。。（2）精子獲能后才能與“拼裝”的卵子進行體外受精，誘導體外受精常用的方法有化學誘導法和培養法兩種。（3）受精卵形成后，應將其移入發育培養液中繼續培養，培養到大約8—16個細胞的胚胎時，進行胚胎移植。（4）線粒體位于精子的尾部，受精作用進行時通常是含有細胞核的頭部進入卵細胞，而尾部留在外面，所以受精作用時男性的線粒體不會傳給下一代。27．請回答基因工程方面的問題：（1）基因工程中目的基因的來源是_______________和______________________。（2）實踐中常用某些病毒的載體做為基因工程的工具，除具備普通質粒載體的條件外，還應具備的條件是__________________、____________________（答出兩點即可），定性檢測基因表達的產物可采用_____________________方法。（3）為使干擾素基因在大腸桿菌細胞中正確表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體__________和___________之間。若將該基因表達載體導入牛受精卵細胞中常用的方法是__________________。（4）采用_________________技術可檢測干擾素基因是否成功導入大腸桿菌的DNA上。【答案】自然界中現存生物體內的基因人工合成能自我復制具有多個限制酶的酶切位點抗原-抗體雜交啟動子終止子顯微注射技術DNA分子雜交技術【解析】【試題分析】本題考查基因工程的相關知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成知識的網絡結構能力。考生可根據題意梳理所學知識，對各小題進行分析作答。（1）基因工程中目的基因的來源是從自然界中現存生物體內的基因和人工合成。（2）實踐中常用某些病毒的載體做為基因工程的工具，除具備普通質粒載體的條件外，還應具備的條件是能自我復制、具有多個限制酶的酶切位點；定性檢測基因表達的產物可采用抗原-抗體雜交方法。（3）目的基因表達需要啟動子和終止子。為使干擾素基因在大腸桿菌細胞中正確表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體啟動子和終止子之間。若將該基因表達載體導入牛受精卵細胞中常用的方法是顯微注射技術。（4）采用DNA分子雜交技術可檢測干擾素基因是否成功導入大腸桿菌的DNA上。28．很久以前科學家在土壤中發現了某種細菌能制造一種對昆蟲有毒的蛋白質，當時許多人就想把編碼這一蛋白質的基因（抗蟲基因）轉移到農作物中，以降低昆蟲對農作物造成的危害。20世紀90年代，美國科學家采用基因工程技術首次培育出抗蟲玉米新品種。下圖為這一轉基因玉米的主要培育過程。（1）獲得特定目的基因的途徑除了從該細菌中直接分離抗蟲基因外，還可以。將目的基因與運載體結合時必須用酶和DNA連接酶。在基因工程中，常用的運載體有等，而作為運載體必須具備相應的條件，例如應具有以便進行篩選。（2）由轉基因玉米細胞經過形成愈傷組織，然后發育成胚狀體和試管苗。若要制備轉基因玉米的人工種子，可選擇上述實驗過程中的再包裹合適的人工種皮等。【答案】（6分）（1）人工合成同種限制質粒（或動植物病毒或噬菌體等）標記基因（2）脫分化（或去分化）胚狀體【解析】目的基因獲取通常有直接分離出目的基因，從基因文庫中提取，也可以人工合成，目的基因和運載體通常用同一種限制酶來切，常用的運載體有質粒和動植物病毒或噬菌體，作用運載體通常要有標記基因便于對目的基因是否導入進行篩選，轉基因植物通常經脫分化形成愈傷組織，再分化形成胚狀體和試管苗，人工種子通常對胚狀體進行包裝。29．如圖為利用人成纖維細胞（具分裂能力、能在HAT培養基上存活）和小鼠骨髓瘤細胞（具分裂能力、不能在HAT培養基上存活）進行人類基因定位的操作示意圖，請回答相關問題。（1）圖示方法應用的技術有和。（2）操作所用的成纖維細胞應傳代代以內，誘導融合時需要加入的促融劑是。（3）HAT培養基起作用，培養時溫度應為36.5±0.5℃，操作中加入烏本苷的目的是。（4）如表所示為雜交細胞A、B、C中存在的人類染色體及人類特有的4種酶（“＋”表示存在，“一”表示不存在），這4種酶均為單基因編碼產生，據表判斷，編碼酶和酶的基因位于染色體2上，呈線性排列。雜交細胞ABC人類染色體1－＋＋2＋－＋3＋＋－酶m＋－＋n－＋＋p＋－＋q－＋＋【答案】（1）動物細胞融合動物細胞培養（2）10PEG或滅活的病毒（3）選擇除去成纖維細胞（4）mp【解析】（1）分析過程圖可知，圖中利用促融劑誘導兩細胞融合的技術屬于動物細胞融合技術；經篩選后的雜交細胞培養利用的是動物細胞培養技術。（2）操作所用的成纖維細胞應傳代10代以內，以保證其維持正常的二倍體核型；誘導動物細胞融合時需要加入的促融劑是PEG或滅活的病毒。（3）過程圖中，融合后的細胞類型有AA、BB和AB型，用HAT培養基進行選擇培養時，小鼠骨髓瘤細胞自身融合的BB型細胞不能存活，但人成纖維細胞自身融合的AA型細胞及人成纖維細胞與小鼠骨髓瘤細胞相互融合的AB型細胞均能存活；然后換用含烏本苷的培養基選擇培養時，人成纖維細胞自身融合的AA型細胞及人成纖維細胞均不能存活，故經兩次篩選可得到人成纖維細胞與小鼠骨髓瘤細胞相互融合的AB型細胞。（4）分析表中記錄可見，C細胞內不含3號染色體但卻含有控制4種酶合成的基因，說明控制4種酶合成的基因均不在3號染色體上；A細胞不含1號染色體但卻含有m和p兩種基因，說明m和p兩種基因均不在1號染色體上；結合C細胞核A細胞的結果可知m和p兩種基因不在3號和1號染色體上，故可能在2號染色體上；B細胞不含2號染色體但同時含有m和p兩種基因，進一步證明了m和p兩種基因，均位于2號染色體上，故兩者在2號染色體上呈線性排列。【考點定位】動物細胞融合、動物細胞培養及基因定位等技術【名師點睛】1.加入促融劑誘導兩動物細胞融合時，融合后的細胞類型有AA、BB和AB型，用HAT培養基進行選擇培養時，小鼠骨髓瘤細胞自身融合的BB型細胞不能存活，但人成纖維細胞自身融合的AA型細胞及人成纖維細胞與小鼠骨髓瘤細胞相互融合的AB型細胞均能存活；然后換用含烏本苷的培養基選擇培