生物分離技巧一、名詞解釋1．凝聚：在電解質作用下，破壞細胞菌體和蛋白質等膠體粒子的分散狀態，使膠體粒子聚集的過程。2．分配系數：在一定溫度、壓力下，溶質分子分布在兩個互不相溶的溶劑里，達到平衡后，它在兩相的濃度為一常數叫分配系數。3．絮凝：指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團的過程4．萃取過程：利用在兩個互不相溶的液相中各種組分（包括目的產物）溶解度的不同，從而達到分離的目的5．吸附：是利用吸附劑對液體或氣體中某一組分具有選擇性吸附的能力，使其富集在吸附劑表面的過程。6．離子交換：利用離子交換樹脂作為吸附劑，將溶液中的待分離組分，依據其電荷差異，依靠庫侖力吸附在樹脂上，然后利用合適的洗脫劑將吸附質從樹脂上洗脫下來，達到分離的目的。7．助濾劑：助濾劑是一種具有特殊性能的細粉或纖維，它能使某些難以過濾的物料變得容易過濾。8．色譜技術：是一組相關分離方法的總稱，色譜柱的一般結構含有固定相（多孔介質）和流動相，根據物質在兩相間的分配行為不同（由于親和力差異），經過多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），達到分離的目的。9．等電點沉淀：調節體系pH值，使兩性電解質的溶解度下降，析出的操作稱為等電點沉淀。10．膜分離：利用膜的選擇性（孔徑大小），以膜的兩側存在的能量差作為推動力，由于溶液中各組分透過膜的遷移率不同而實現分離的一種技術。11．超臨界流體：超臨界流體是狀態超過氣液共存時的最高壓力和最高溫度下物質特有的點——臨界點后的流體。12．反滲透：在只有溶劑能通過的滲透膜的兩側，形成大于滲透壓的壓力差，就可以使溶劑發生倒流，使溶液達到濃縮的效果，這種操作成為反滲透。13．膜的濃差極化：是指但溶劑透過膜，而溶質留在膜上，因而使膜面濃度增大，并高于主體中濃度。14．鹽析：是利用不同物質在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異，向溶液中加入一定量的中性鹽，使原溶解的物質沉淀析出的分離技術。15．反相色譜：是指固定相的極性低于流動相的極性，在這種層析過程中，極性大的分子比極性小的分子移動的速度快而先從柱中流出。16．親和層析：是利用生物活性物質之間的專一親和吸附作用而進行的層析方法。是近年來發展的純化酶和其他高分子的一種特殊的層析技術。二、選擇1．HPLC是哪種色譜的簡稱（C）。A．離子交換色譜B.氣相色譜C.高效液相色譜D.凝膠色譜2．針對配基的生物學特異性的蛋白質分離方法是（C）。A.凝膠過濾B.離子交換層析C.親和層析D.紙層析3．鹽析法沉淀蛋白質的原理是（B）A.降低蛋白質溶液的介電常數B.中和電荷，破壞水膜C.與蛋白質結合成不溶性蛋白D.調節蛋白質溶液pH到等電點4．從組織中提取酶時，最理想的結果是（C）A.蛋白產量最高B.酶活力單位數值很大C.比活力最高D.Km最小5．適合于親脂性物質的分離的吸附劑是（B）。A．活性炭B.氧化鋁C.硅膠D.磷酸鈣6．下列哪項酶的特性對利用酶作為親和層析固定相的分析工具是必需的？（B）A.該酶的活力高B.對底物有高度特異親合性C.酶能被抑制劑抑制D.最適溫度高E.酶具有多個亞基7．用于蛋白質分離過程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是（C）A．離子交換色譜B.親和色譜C.凝膠過濾色譜D.反相色譜8．鹽析法沉淀蛋白質的原理是（B）A.降低蛋白質溶液的介電常數B.中和電荷，破壞水膜C.與蛋白質結合成不溶性蛋白D.調節蛋白質溶液pH到等電點9．蛋白質分子量的測定可采用（C）方法。A．離子交換層析B.親和層析C.凝膠層析D.聚酰胺層析10．氨基酸的結晶純化是根據氨基酸的（A）性質。A.溶解度和等電點B.分子量C.酸堿性D.生產方式11．離子交換劑不適用于提取（D）物質。A．抗生素B.氨基酸C.有機酸D.蛋白質12．陰離子交換劑（C）。A、可交換的為陰、陽離子B、可交換的為蛋白質C、可交換的為陰離子D、可交換的為陽離子13．工業上強酸型和強堿型離子交換樹脂在使用時為了減少酸堿用量且避免設備腐蝕，一般先將其轉變為（B）。A、鈉型和磺酸型B、鈉型和氯型C、銨型和磺酸型D、銨型和氯型14．哪種細胞破碎方法適用工業生產（A）A.高壓勻漿B超聲波破碎C.滲透壓沖擊法D.酶解法15.在葡聚糖與聚乙二醇形成的雙水相體系中，目標蛋白質存在于（A）A.上相B下相C.葡聚糖相D.以上都有可能16.下列關于固相析出說法正確的是（B）A.沉淀和晶體會同時生成B析出速度慢產生的是結晶C.和析出速度無關D.析出速度慢產生的是沉淀17.若兩性物質結合了較多陽離子，則等電點pH會（A）A.升高B降低C.不變D.以上均有可能18.通過改變pH值從而使與離子交換劑結合的各個組分被洗脫下來，可使用（A）A.陽離子交換劑一般是pH值從低到高洗脫B陽離子交換劑一般是pH值從高到低洗脫C.陰離子交換劑一般是pH值從低到高D.以上都不對19．結晶過程中，溶質過飽和度大小（A）。A、不僅會影響晶核的形成速度，而且會影響晶體的長大速度B、只會影響晶核的形成速度，但不會影響晶體的長大速度C、不會影響晶核的形成速度，但會影響晶體的長大速度D、不會影響晶核的形成速度，而且不會影響晶體的長大速度20．在蛋白質初步提取的過程中，不能使用的方法（C）。A、雙水相萃取B、超臨界流體萃取C、有機溶劑萃取D、反膠團萃取21．在液膜分離的操作過程中，（B）主要起到穩定液膜的作用。A、載體B、表面活性劑C、增強劑D、膜溶劑22．離子交換法是應用離子交換劑作為吸附劑，通過（A）將溶液中帶相反電荷的物質吸附在離子交換劑上。A、靜電作用B、疏水作用C、氫鍵作用D、范德華力23．用來提取產物的溶劑稱（C）。A、料液B、萃取液C、萃取劑D、萃余液。24．洗脫體積是（C）。A、凝膠顆粒之間空隙的總體積B、溶質進入凝膠內部的體積C、與該溶質保留時間相對應的流動相體積D、溶質從柱中流出時所用的流動相體積25．顆粒與流體的密度差越小，顆粒的沉降速度（A）A.越小B.越大C.不變D.無法確定26．工業上常用的過濾介質不包括（D）A.織物介質B.堆積介質C.多孔固體介質D.真空介質27．下列物質屬于絮凝劑的有（A）。A、明礬B、石灰C、聚丙烯類D、硫酸亞鐵28．下列哪項不是蛋白質的濃度測定的方法（D）。A、凱氏定氮法B.雙縮脲法C.福林-酚法D.核磁共振29．發酵液的預處理方法不包括（C）A.加熱B絮凝C.離心D.調pH30．其他條件均相同時，優先選用那種固液分離手段（B）A.離心分離B過濾C.沉降D.超濾31．關于萃取下列說法正確的是（C）A.酸性物質在酸性條件下萃取B堿性物質在堿性條件下萃取C.兩性電解質在等電點時進行提取D.兩性電解質偏離等電點時進行提取32．超臨界流體萃取中，如何降低溶質的溶解度達到分離的目的（C）A.降溫B升高壓力C.升溫D.加入夾帶劑33．有機溶劑為什么能夠沉淀蛋白質（B）A.介電常數大B介電常數小C.中和電荷D.與蛋白質相互反應34．若兩性物質結合了較多陽離子，則等電點pH會（A）A.升高B降低C.不變D.以上均有可能35．若兩性物質結合了較多陰離子，則等電點pH會（B）A.升高B降低C.不變D.以上均有可能36．氣相色譜的載氣不能用（C）A.氫氣B氦氣C.氧氣D.氮氣37．關于電泳分離中遷移率描述正確的是（A）A.帶電分子所帶凈電荷成正比B分子的大小成正比C.緩沖液的黏度成正比D.以上都不對38．在什么情況下得到粗大而有規則的晶體（A）A.晶體生長速度大大超過晶核生成速度B晶體生長速度大大低于過晶核生成速度C.晶體生長速度等于晶核生成速度D.以上都不對39．恒速干燥階段與降速干燥階段，那一階段先發生（A）A.恒速干燥階段B降速干燥階段C.同時發生D.只有一種會發生40．珠磨機破碎細胞，適用于（D）A.酵母菌B大腸桿菌C.巨大芽孢桿菌D.青霉41．為加快過濾效果通常使用（C）A.電解質B高分子聚合物C.惰性助濾劑D.活性助濾劑42．不能用于固液分離的手段為（C）A.離心B過濾C.超濾D.雙水相萃取43．最常用的干燥方法有（D）A、常壓干燥B、減壓干燥C、噴霧干燥D、以上都是44．下列哪個不屬于高度純化：(B)A.層析B.吸附法C.親和層析D.凝膠層析45．酶提取液中，除所需酶外，還含有大量的雜蛋白、多糖、脂類和核酸等，為了進一步純化，可用(E)方法除去雜質。A、調pH值和加熱沉淀法B、蛋白質表面變性法C、降解或沉淀核酸法D、利用結合底物保護法除去雜蛋白E、以上都可以46．高效液相色譜儀的種類很多，但是無論何種高效液相色譜儀，基本上由（D）組成。A高壓輸液系統、進樣系統、分離系統、過濾系統、記錄系統或色譜工作站等五大部分B進樣系統、分離系統、檢測系統、記錄系統或色譜工作站四大部分C高壓輸液系統、進樣系統、分離系統、檢測系統四大部分D高壓輸液系統、進樣系統、分離系統、檢測系統、記錄系統或色譜工作站等五大部分47．氣相色譜柱主要有（C）。A填充柱B毛細管柱CA或BDA或B及其他48．超臨界流體萃取法適用于提取（B）A、極性大的成分B、極性小的成分C、離子型化合物D、能氣化的成分E、親水性成分49．反滲透膜的孔徑小于(C)A0.02～10μmB0.001～0.02μmC<2nmD<1nm50．活性炭在下列哪種溶劑中吸附能力最強？（A）A、水B、甲醇C、乙醇D、三氯甲烷三、判斷題1．助濾劑是一種可壓縮的多孔微粒。（×）2．通過加入某些反應劑是發酵液進行預處理的方法之一。（√）3．珠磨法中適當地增加研磨劑的裝量可提高細胞破碎率。（×）4．流動相為氣體則稱為氣相色譜。（√）5．在生物制劑制備中，常用的緩沖系統有磷酸鹽緩沖液；碳酸鹽緩沖液；鹽酸鹽緩沖液；醋酸鹽緩沖液等。（×）6．生物物質中最常用的干燥方法是減壓干燥。（√）7．冷凍干燥適用于高度熱敏的生物物質。（√）8．蛋白質變性，一級、二級、三級結構都被破壞。（×）9．吸附劑氧化鋁的活性與其含水量無關。（×）10．當某一蛋白質分子的酸性氨基酸殘基數目等于其堿性氨基酸殘基數目時，此蛋白質的等電點為7.0。（√）11．采用氧化鋁為吸附劑時，用洗脫劑應從高極性開始，逐漸減低，洗脫劑的極性。（×）12．有機溶劑被細胞壁吸收后，會使細胞壁膨脹或溶解，導致破裂，把細胞內產物釋放到水相中去。（√）13．不同高分子化合物的溶液相互混合可形成兩相或多相系統，如葡聚糖與聚乙二醇（PEG）按一定比例與水混合后，溶液先呈渾濁狀態，待靜置平衡后，逐漸分成互不相溶的兩相，上相富含PEG，下相富含葡聚糖。（√）14．不同高分子化合物的溶液相互混合可形成兩相或多相系統，如葡聚糖與聚乙二醇（PEG）按一定比例與水混合后，溶液先呈渾濁狀態，待靜置平衡后，逐漸分成互不相溶的兩相，下相富含PEG，上相富含葡聚糖。（×）15．超臨界流體溫度不變條件下，溶解度隨密度（或壓力）的增加而增加，而在壓力不變時，溫度增加情況下，溶解度有可能增加或下降。（√）16．硫酸銨在堿性環境中可以應用。（×）17．若兩性物質結合了較多陽離子，則等電點pH降低。（×）18．色譜分離技術中被檢測物質的峰越寬越好。（×）19．制備型HPLC對儀器的要求不像分析型HPLC那樣苛刻。（√）20．在聚丙烯酰胺凝膠中加入陰離子去污劑十二烷基硫酸鈉（SDS），影響凝膠的形成。（×）21．等電聚焦電泳會形成的一個由陽極到陰極逐步遞減的pH梯度。（×）22．在恒速干燥階段，過程速度由水分從物料內部移動到表面的速度即內擴散所控制。（×）23．在降速干燥階段，干燥速度由水的表面汽化速度即外擴散所控制法。（×）24．滲透壓沖擊是各種細胞破碎法中最為溫和的一種，適用于易于破碎的細胞，如動物細胞和革蘭氏陽性菌。（×）25．等密度梯度離心中，梯度液的密度要包含所有被分離物質的密度。（√）26．可以用紙色譜的方法來選擇、設計液-液萃取分離物質的最佳方案。（√）27．SephadexLH-20的分離原理主要是分子篩和正相分配色譜。（√）28．酸性、中性、堿性氨基酸在強堿性陰離子交換樹脂柱上的吸附順序是堿性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸（×）29．凝膠層析會使得大分子物質后流出，小分子物質先流出。（×）30．透析設備簡單、操作容易，可用于工業化生產（×）31．鹽析反應完全需要一定時間，一般硫酸銨全部加完后，應放置30min以上才可進行固-液分離。（√）32．層析點樣時用一根毛細管，吸取樣品溶液，在距薄層一端1.5^-2cm的起始線上點樣，樣品點直徑小于3mm。（√）33．疏水柱層析可直接分離鹽析后或高鹽洗脫下來的蛋白質、酶等生物大分子溶液（√）34．某結晶物質經硅膠薄層色譜，用一種展開劑展開，顯示單一斑點，所以該晶體為一單體。（×）35．水提醇沉法時根據物質溶解度差別進行分離的方法。（√）36．采用溶劑提取法提取中草藥有效成分時，選擇溶劑的原則是“相似相溶原則”。（√）37．凝聚與絮凝作用的原理是相同的，只是沉淀的狀態不同。（×）38．凍結-融化法凍結的作用是破壞細胞膜的疏水鍵結構，增加其親水性和通透性來破壞細胞的。（√）39．發生乳化現象對萃取是有利的。（×）40．丙酮，介電常數較低，沉析作用大于乙醇，所以在沉析時選用丙酮較好。（×）四、簡答1．試述凝膠色譜的原理？將混合原料加在柱上并用流動相洗脫，則無法進入孔隙內部的大分子直接被洗脫下來，小分子因為可以進入孔隙內部而受到很大的阻滯，最晚被洗脫下來，而中等大小的分子，雖然可以進入孔隙內部但并不深入，受到的阻滯作用不強，因而在兩者之間被洗脫下來。2．簡述鹽析的原理及產生的現象？當中性鹽加入蛋白質分散體系時可能出現以下兩種情況：（1）“鹽溶”現象—低鹽濃度下，蛋白質溶解度增大（2）“鹽析”現象—高鹽濃度下，蛋白質溶解度隨之下降，原因如下：（a）無機離子與蛋白質表面電荷中和，形成離子對，部分中和了蛋白質的電性，使蛋白質分子之間的排斥力減弱，從而能夠相互靠攏；（b）中性鹽的親水性大，使蛋白質脫去水化膜，疏水區暴露，由于疏水區的相互作用導致沉淀；3.區分滲透與反滲透？滲透是由于存在化學勢存在梯度而引起的自發擴散現象。因此，通常情況下，其結果是水從純水一側透過半透膜向溶液側滲透，使后者的液位抬高。如果在溶液一側施加壓力，外界力做功使溶液中水的化學勢升高，則純水通過膜的滲透就會逐漸減小，并最終停止（條件？），此時的壓力差就是溶液的滲透壓。當時，水將從溶液一側向純水一側移動，此種滲透稱之為反滲透。4.簡述過飽和溶液形成的方法？（1）熱飽和溶液冷卻（等溶劑結晶）適用于溶解度隨溫度升高而增加的體系；同時，溶解度隨溫度變化的幅度要適中；（2）部分溶劑蒸發法（等溫結晶法）適用于溶解度隨溫度降低變化不大的體系，或隨溫度升高溶解度降低的體系；（3）真空蒸發冷卻法使溶劑在真空下迅速蒸發，并結合絕熱冷卻，是結合冷卻和部分溶劑蒸發兩種方法的一種結晶方法。（4）化學反應結晶加入反應劑產生新物質，當該新物質的溶解度超過飽和溶解度時，即有晶體析出；5.何謂等電點沉析法？蛋白質再等電點下的溶解度最低，根據這一性質，再溶液中加入一定比例的有機溶劑，破壞蛋白質表面的水化層和雙電層，降低分子間斥力，加強了蛋白質分子間的疏水相互作用，使得蛋白質分子得以聚集成團沉淀下來。6.何謂超臨界流體萃取，并簡述其分離原理？超臨界流體萃取是利用超臨界流體具有的類似氣體的擴散系數，以及類似液體的密度（溶解能力強）的特點，利用超臨界流體為萃取劑進行的萃取單元操作。其特點是安全、無毒、產品分離簡單，但設備投資較大。7.簡述結晶過程中晶體形成的條件？結晶過程包括過飽和溶液的形成、晶核的形成及晶體的生長三個過程，其中溶液達到過飽和狀態是結晶的前提，過飽和度是結晶的推動力。8.簡述凝膠色譜的分離原理？凝膠排阻色譜的分離介質（填料）具有均勻的網格結構，其分離原理是具有不同分子量的溶質分子，在流經柱床是，由于大分子難以進入凝膠內部，而從凝膠顆粒之間流出，保留時間短；而小分子溶質可以進入凝膠內部，由于凝膠多孔結構的阻滯作用，流經體積變大，保留時間延長。這樣，分子量不同的溶質分子得以分離。9.膜分離過程中，有那些原因會造成膜污染，如何處理？（1）膜污染主要有兩種情況：一是附著層被濾餅、有機物凝膠、無機物水垢膠體物質或微生物等吸附于表面；另一種是料液中溶質結晶或沉淀造成堵塞。（2）膜污染是可以預防或減輕的，措施包括料液預處理、膜性質的改善、操作條件改變等方式。（3）膜污染所引起的通量衰減往往是不可逆的，只能通過清洗的處理方式消除，包括物理方法沖洗和化學藥品溶液清洗等。10.超臨界萃取的原理及SFC-CO2萃取的優點？原理：溶質在超臨界流體中的溶解度，與其密度有關，密度越大，溶解度越大。在臨界點附近，微小的壓力增加或溫度下降，則溶劑的密度大幅度增加，對溶質的溶解度將大幅度增加，有利于溶質的萃取。而在臨界點附近，微小的壓力下降或溫度上升，則溶劑的密度大幅度減少，對溶質的溶解度將大幅減少，有利于溶質的分離和溶劑的回收。優點：無毒無腐蝕性，不可燃燒，價格低廉，傳質好萃取快，臨界溫度和臨界壓力較低適合于熱敏生物制品，可獲萃取物或萃余物11.何謂親和吸附，有何特點？親和吸附是吸附單元操作的一種，它是利用親和吸附劑與目標物之間的特殊的化學作用實現的高效分離手段。親和吸附劑的組成包括：惰性載體、手臂鏈、特異性親和配基。親和吸附的特點是高效、簡便、適用范圍廣、分離速度快、條件溫和，但載體制備難度大，通用性差，成本較高。12.試比較凝聚和絮凝兩過程的異同？凝聚和絮凝——在電介質作用下，破壞溶質膠體顆粒表面的雙電層，破壞膠體系統的分散狀態，使膠體粒子聚集的過程。凝聚：簡單電解質降低膠體間的排斥力。從而范德華引力起主導作用，聚合成較大的膠粒，粒子的密度越大，越易分離。絮凝：指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團的過程13.何謂反微團，反微團萃取？其特點有哪些？膠束是表面活性劑在非極性有機溶劑中形成的一種聚集體。當表面活性劑濃度超過臨界微團濃度時，表面活性劑會在水溶液中形成聚集體。微團和反微團a.微團：表面活性劑的極性頭朝外，疏水的尾部朝內，中間形成非極性的“核”b.反微團：表面活性劑的極性頭朝內，疏水的尾部向外，中間形成極性的“核”c.反微團的優點（1）極性“水核”具有較強的溶解能力。（2）生物大分子由于具有較強的極性，可溶解于極性水核中，防止與外界有機溶劑接觸，減少變性作用。（3）由于“水核”的尺度效應，可以穩定蛋白質的立體結構，增加其結構的剛性，提高其反應性能。因此，可作為酶固定化體系，用于水不溶性底物的生物催化14.簡述有機溶劑沉析的原理？a.概念：在含有溶質的水溶液中加入一定量親水的有機溶劑，降低溶質的溶解度，使其沉淀析出。b.原理：（1）降低了溶質的介電常數，使溶質之間的靜電引力增加，從而出現聚集現象，導致沉淀。（2）由于有機溶劑的水合作用，降低了自由水的濃度，降低了親水溶質表面水化層的厚度，降低了親水性，導致脫水凝聚。15.生物分離技術的特點？a.產物的快速分離純化。b.對原料液進行高度濃縮。c.借助新型的分離技術d.除去有害人類健康的物質e.采用利于保持目標產物產品質量的操作條件16.試列舉常見的吸附劑。（1）活性炭（2）白陶土（白土、陶土、高嶺土）（3）磷酸鈣凝膠（4）氫氧化鋁凝膠（5）氧化鋁（6）硅膠（7）滑石粉（8）硅藻土（9）皂土（10）沸石（11）聚酰胺粉（12）大網格聚合物吸附劑17.生物分離技術的基本涵義及內容？基本涵義：生物分離技術是指從動植物與微生物的有機體或器官、生物工程產物（發酵液、培養液）及其生物化學產品中提取、分離、純化有用物質的技術過程。內容主要包括：離心分離、過濾分離、泡沫分離、萃取分離、沉淀（析）分離、膜分離、層析（色譜）分離、電泳分離技術以及產品的濃縮、結晶、干燥等技術。18.根據溶解度不同，蛋白質有幾種分離純化方法。利用蛋白質溶解度的差異是分離蛋白質的常用方法之一。影響蛋白質溶解度的主要因素有溶液的pH值、離子強度、溶劑的介電常數和溫度等。1)等電點沉淀蛋白質在等電點時溶解度最小。單純使用此法不易使蛋白質沉淀完全，常與其他方法配合使用。2)鹽析沉淀中性鹽對蛋白質膠體的穩定性有顯著的影響。一定濃度的中性鹽可破壞蛋白質膠體的穩定因素而使蛋白質鹽析沉淀。鹽析沉淀的蛋白質一般保持著天然構象而不變性。有時不同的鹽濃度可有效地使蛋白質分級沉淀。通常單價離子的中性鹽(NaCl)比二價離子的中性鹽[(NH4)2SO4]對蛋白質溶解度的影響要小。3)低溫有機溶劑沉淀法在一定量的有機溶劑中，蛋白質分子間極性基團的靜電引力增加，而水化作用降低，促使蛋白質聚集沉淀。此法沉淀蛋白質的選擇性較高，且不需脫鹽，但溫度高時可引起蛋白質變性，故應注意低溫條件。一般在0～40℃之間，多數球狀蛋白的溶解度隨溫度的升高而增加；40～50℃以上，多數蛋白質不穩定，并開始變性。因此對蛋白質的沉淀一般要求低溫條件。六、論述1.簡述pH對發酵液過濾特性的影響，并舉例說明。（1）pH直接影響發酵液中某些物質的電離程度和電荷性質，因此適當調節pH值可以改善發酵液的過濾特性。（2）氨基酸和蛋白質在酸性條件下帶正電，堿性條件下帶負電，等電點時凈電荷為零，兩性物質在等電點下的溶解度最小，等電點沉淀法在生物工業分離中廣泛使用。（3）如味精生產，利用等電點沉淀法提取谷氨酸，一般蛋白質也在酸性范圍達到等電點；膜分離中可通過調整pH值改變易吸附分子的電荷性質，減少膜堵塞和膜污染；此外，細胞、細胞碎片及某些膠體物質等在特定pH下也可能趨于絮凝而成為較大顆粒，有利于過濾進行。2.以胞內酶提取為例，簡要說明雙水相系統