ICS65.020B05榆DB6108林市地方標準DBT—2022chnicalRegulationforArtificialInseminationofHuSheep榆林市市場監督管理局發布IDB6108/T38—2022前言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件由榆林市榆陽區農業投資開發有限公司提出。本文件由榆林市農業農村局歸口。本文件起草單位：榆林市榆陽區農業投資開發有限公司、榆林市農產品質量安全中心、榆林學院、陜西新中盛農牧發展有限公司、榆陽區動物疫病預防控制中心、神木市動物疫病預防控制中心、府谷縣動物疫病預防控制中心、綏德縣動物疫病預防控制中心。本文件主要起草人：翟軍軍、劉健鵬、姬陽、陳敏艷、張彥飛、魏澤玉、米耀云、賀玉勝、韓斌、袁溶英、劉錦旺、敬曉棋、延慶飛、張利、焦霞、王磊、溫志醫、蘇翠英、崔曉霞、鐘巧梅、曹勇、白崇生、王峰、李河林、武燕、郝婷婷、馬杰、馬飛、薛琳玨、崔珊、劉歡、王雅媛、霍延媛、高艷、張紅梅、張艷、王艷鳳、蘇翠英、張彥、白淑珍。本文件由榆林市榆陽區農業投資開發有限公司負責解釋。本文件首次發布。聯系信息如下：單位：榆林市榆陽區農業投資開發有限公司電話址：榆林市榆陽區長樂路58號郵編：7190001DB6108/T38—2022湖羊人工授精技術規范1范圍本文件規定了人工授精采精準備、采精操作、精液品質要求、精液的稀釋與保存、輸精等內容。本文件適用于榆林市湖羊人工授精操作。2規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。NY530—2002牛、羊用采精器3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1通過臺羊，利用假陰道等器具人為采集種公羊精液的技術。3.2精液稀釋液Semendiluter由雙蒸水、精子營養物和精子保護劑等配制而成，用于精液稀釋的液體。3.3精子活率Activespermrate精液中直線前進運動的精子數與總精子數的比值。3.4精子密度Spermconcentration單位體積(mL)的精液中所含的總精子數。3.5精子畸形率Spermabnormalityrate精液中畸形精子占總精子數的百分比。3.6臺羊Dummy2DB6108/T38—2022種公羊采精時，被種公羊爬跨的支撐羊，包括發情母羊和假臺羊。4采精準備4.1場地選擇要求房舍寬敞、地面平坦不滑、干凈衛生、周圍無噪音。露天采精時應選擇干燥背風處。4.2假陰道準備假陰道質量應符合NY530—2002的規定。4.3清洗使用前，先用洗滌劑將其洗刷干凈，然后用自來水反復沖洗，最后再用蒸餾水沖洗3遍，自然干燥。4.4消毒假陰道接觸精液的內胎腔面和集精杯玻璃杯內壁均需要進行消毒，具體可用75%酒精棉球進行擦拭消毒，也可用紫外線照射30min以上進行消毒。紫外線消毒時，應將內胎腔面翻出在外，并保證所有腔面均照射30min以上。4.5安裝將消毒好的內胎放入假陰道外殼(光面向里，粗面向外)，兩頭反轉套在外殼上，兩端用橡皮圈固定。要求內胎松緊適中、平整、無皺折和扭轉。4.6注水充氣使用時，一端裝上已消毒的集精杯，并根據室內溫度，在假陰道夾層內注入50℃左右的熱水150mL~180mL，使內胎溫度保持在38℃~40℃，同時在內胎腔前1/2段涂以滅菌潤滑劑，再吹入適量空氣，使內胎一端中央呈“Y”字形，內胎管腔剛好閉合而不向外突出。5采精操作5.1臺羊準備將臺羊的頸部固定在采精架上，用0.1%高錳酸鉀溶液噴灑消毒母羊的外陰部，然后用滅菌紗布或毛巾擦干。5.2種公羊準備用0.1%高錳酸鉀溶液噴灑消毒公羊的包皮周圍，然后用滅菌紗布或毛巾擦干。5.3采精員準備采精員蹲在臺羊右后側，右手持已準備好的假陰道，使假陰道與地面約呈35°~40°，并氣嘴向下。5.4采精3DB6108/T38—20225.4.1當種公羊爬跨臺羊而陰莖未觸及臺羊后驅時，用左手輕輕地將陰莖導入假陰道內，待公羊挺腰抬臀射精完畢后，陰莖自假陰道中自行脫出時，立即將假陰道直立，使集精杯向下，打開氣嘴放氣，待射出精液全部流入集精杯后取下集精杯，送往實驗室進行精液品質評定。5.4.2操作時要避免假陰道內的水流入集精杯。6鮮精品質要求湖羊鮮精品質的評價指標包括有射精量、顏色、氣味、精子活率、精子密度以及精子畸形率，合格指標見表1。表1湖羊鮮精品質指標要求指標正常范圍指標正常范圍射精量0.5mL~2.5mL精子活率≥0.7顏色乳白或淡黃精子密度20億/mL~30億/mL氣味稍有腥膻味精子畸形率14%7精液的稀釋與保存7.1稀釋液的配制稀釋液一般有以下三種配置方法：agg至100mL，混勻成基礎液。基礎液經高壓滅菌30min后，可放入4℃冰箱保存。用時取基礎液80mL，加新鮮蛋黃20mL、青霉素10萬IU、鏈霉素100mg；b)脫脂羊奶。將鮮羊奶煮沸，去除表層乳脂后，裝入鹽水瓶，高壓滅菌30min，置于4℃冰箱中保存；c)果糖0.5g，Tris3.63g，檸檬酸1.99g，加雙蒸水至100ml，混勻成基礎液。基礎液經高壓滅IU鏈霉素100mg。7.2鮮精的稀釋精液稀釋的最終總體積根據射精量、精子密度和精子活率來計算，要求稀釋后的精子密度不低于5億/mL，計算見公示(1)和公示(2)：稀釋精液最終總體積(mL)=射精量(mL)×精子密度(億/mL)×精子活率÷5億/mL ()1稀釋液的加入量(mL)=稀釋精液最終總體積(mL)—射精量(mL) ()27.3稀釋方法將與精液等溫的稀釋液沿管壁緩慢加入精液中，且邊加邊混合，每次加入的稀釋液不得多于原精液的體積。高倍稀釋時，可分次進行，直至達到最終的稀釋體積。7.4保存4DB6108/T38—2022將裝有稀釋精液的瓶子包裹上8層~12層紗布緩慢降溫，放入4℃冰箱冷藏室保存，時間不超過5天。8輸精8.1輸精前的準備8.1.1低溫精液升溫低溫保存精液應在35℃左右的溫水中升溫1min~2min。8.1.2精子活率檢查鏡檢待輸的稀釋精液，精子活率在0.5以上時，可用于輸精。8.1.3輸精管消毒手指擠壓酒精棉球，將棉球中擠出的酒精液滴入豎直的尾部向上的輸精管管腔內，讓酒精流過輸精管管腔，然后用酒精棉球擦拭輸精管外壁。酒精消毒過的輸精管管腔需用生理鹽水沖洗3遍。8.1.4母羊保定將母羊置于保定架內，前低后高，身體縱軸與地面呈45°。8.2輸精8.2.1輸精量和有效精子數每次輸入的精液量應為0.05mL~0.5mL，有效精子數應≥0.5億。8.2.2輸精時間和輸精次數經產母羊第一次輸精時間為發情后12小時，間隔12小時進行第二次輸精。8.2.3輸精方法8.2.