第十章免疫毒理學一、概述1.免疫毒理學的發展及定義早期的免疫損傷現象：青霉素過敏、面包師皰疹1977年：Vos將外源化學物對免疫系統損傷與毒理學聯系起來1984年：國際化學品安全規劃署歐共體委員會免疫系統是毒性損傷的靶的研討會immunotoxicology免疫毒理學：immunotoxicology是應用毒理學與免疫學的理論及實驗手段研究外來化學物等有害因素對機體免疫系統結構和功能的影響及其作用機制，并評價這些有害因素的免疫毒性和／或針對其損害提供防治措施的科學。二、免疫系統對外源化學物的毒性反應與機制免疫系統的組成免疫器官：胸腺、骨髓、脾、淋巴結、彌散的淋巴組織免疫細胞：T細胞、B細胞、NK細胞單核吞噬細胞免疫分子：免疫球蛋白IgA,IgM,IgA,IgD,IgE

補體細胞因子:IL-1~12,IFN-αβγ,TNF1.免疫系統的組成和功能免疫系統的功能①.識別并清除入侵的病原體及毒素②.清除體內產生的腫瘤細胞維持內環境的穩定1.免疫抑制:主要表現：抗感染能力腫瘤易感性2.常見的免疫化合物:

多鹵代芳烴、多環芳烴、藥物、農藥、嗜好品等（一）免疫抑制3.化學毒物的免疫機制直接作用：①損傷免疫細胞：

損傷骨髓干細胞，使免疫細胞生成減少：苯可導致白細胞減少和種類平衡失調

損傷中樞和外周免疫器官的淋巴細胞：許多重金屬可直接損傷B細胞，抑制體液免疫②干擾免疫應答過程：

影響細胞膜表面分子：（受體、酶、表面特征分子）

干擾細胞因子網絡調空系統間接作用：①影響神經內分泌系統神經系統內分泌系統免疫系統免疫調節（二）超敏反應1.過敏反應的類型:①速發型：致敏細胞釋放血管活性物質毛細血管通透性改變導致腺體分泌增強哮喘、鼻炎②細胞毒型：IgGorIgM帶有相應抗原靶細胞結合，活化補體，溶解細胞貧血、血小板減少免疫復合物組織中沉淀④遲發型：致敏TD細胞釋放淋巴因子單核巨噬細胞浸慢性炎癥如：接觸性皮炎③免疫復合型：抗原抗體浸潤、釋放水解酶如：慢性腎小球腎炎2.超敏反應的主要表現：過敏性皮炎：“面包師皰疹”職業性哮喘：甲苯二異氰酸酯3.超敏反應的機制自身免疫疾病1.自身免疫的主要表現外源化學物自身免疫應答遺傳、營養

器官特異性疾病胰島素依賴性糖尿病多發性硬化癥非器官特異性疾病系統性紅斑狼瘡類風濕性關節炎是否針對某一器官是否2.常見的外源化學物藥物：青霉素、本妥英、普魯卡因工業化學物：氯乙烯、石英環境化學物：多氯聯苯、多溴聯苯、重金屬3.發生機制化學毒物使機體失去自身銀免疫耐受自身抗體或自身應答性TC免疫復合物或免疫損傷自身免疫性疾病針對血細胞溶血抗自身甲狀腺素受體甲抗抗腎小球基底膜Ⅳ膠原抗體腎小球腎炎常見病三.免疫毒性檢測方案檢測方案原則:能全面反映化學毒物對免疫系統的損傷評價藥物的免疫損傷包括免疫抑制過敏反應自身免疫免疫源性不良免疫刺激1.免疫抑制骨髓抑制免疫器官重量和組織學改變血清球蛋白降低感染反生率增加腫瘤發生率增加免疫功能檢測溶血空斑試驗ELISAS試驗免疫原性：immunogenecity是指外源化學物引起免疫反映的能力。免疫原性與分子量有關：分子量免疫原性＞10,000強5,000---10,000稍弱

1,000---5,000難估計＜1,000半抗原2.免疫原性Ⅱ、Ⅲ超敏反應沒有很好的檢測方法：

Ⅳ：豚鼠最大值試驗和Buecher試驗（局部封閉涂皮法）豚鼠最大值試驗：豚鼠頸背脊柱兩側脫毛福氏完全佐劑（FCA）受試物受試物與FCA的等量混合物

注射部位涂受試物第二次致敏用涂以受試物的濾紙，再次貼敷在上背部兩，激發接觸進行皮膚反應強度評分4.自身免疫檢測目前還沒有預測藥物自身免疫反應的方法，但常用的有：鼠國窩淋巴結試驗和局部淋巴結試驗5.不良免疫刺激指化學物對免疫系統某些成分的任何抗原非特意性的、不適當的或難以控制的活化作用。2.免疫功能評價①NK細胞活性的測定接觸外源化學物脾細胞和未接觸外源化學物脾細胞Cr標記的細胞測量培養液中核素強度，評估NK細胞的活性②巨噬細胞功能檢測:巨噬細胞貼壁生長51Cr--雞紅細胞共同孵育棄去上清夜加氯化銨短暫培養，去除未倍吞噬的雞紅細胞加NaOH溶解紅細胞，測量核素強度③體液免疫功能的評價：受試物免疫動物，然后檢測抗體的生成量或抗體形成細胞數④細胞功能評價:常用方法有細胞毒性T細胞殺傷實驗遲發型超敏反應淋巴細胞增殖試驗細胞毒性T細胞殺傷實驗:目的:評價脾T細胞識別和溶解經抗原處理靶細胞的能力經絲裂霉素Ｃ處理的P815肥大細胞脾淋巴細胞收集致敏細胞毒性T淋巴細胞51Cr-P815肥大細胞測量培養液中放射性強度⑤宿主抵抗力試驗檢測對不同病原體和同種移植腫瘤的能力3.超敏反應和自身免疫反應檢測Ⅰ型超敏反應主動皮膚過敏實驗被動皮膚過敏試驗主動皮膚過