標準解讀

《GB/T 38132-2019 轉基因植物品系定量檢測數字PCR法》是一項國家標準，旨在通過數字PCR技術對轉基因植物中的特定品系進行準確的定量分析。該標準適用于含有已知序列信息的轉基因植物品系DNA含量的測定。

根據此標準，首先需要準備樣品DNA，并確保其質量符合后續實驗的要求。接下來，選擇合適的引物和探針設計對于目標轉基因成分至關重要，這些設計需基于已知的目標序列來進行，以保證特異性與靈敏度。此外，還應設置適當的對照組，包括但不限于陽性對照、陰性對照以及內參基因等，以驗證實驗的有效性和可靠性。

在完成上述準備工作后，按照數字PCR的操作流程進行擴增反應，這通常涉及到將樣品分成大量獨立的小體積反應單元，在每個小單元中進行PCR擴增。通過統計含有目標序列的陽性微滴數量來計算原始樣本中目標分子的數量，從而實現對轉基因成分的定量。

整個過程中，還需要注意控制實驗條件的一致性，比如溫度循環參數、酶活性等因素，以減少實驗誤差。同時，對于結果的數據處理也有明確要求，包括如何使用軟件分析數據、報告形式等，確保最終得出的結果能夠準確反映樣品中轉基因成分的真實水平。

該標準為轉基因植物品系的定量檢測提供了科學、規范的方法指導，有助于提高相關領域研究工作的準確性和可比性。


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....

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  • 2019-10-18 頒布
  • 2019-10-18 實施
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文檔簡介

ICS07080

A40.

中華人民共和國國家標準

GB/T38132—2019

轉基因植物品系定量檢測數字PCR法

QuantitativedeterminationofgeneticallymodifiedplantsbydigitalPCRmethod

2019-10-18發布2019-10-18實施

國家市場監督管理總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T38132—2019

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國生化檢測標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標準起草單位上海市計量測試技術研究院蘇州百源基因技術有限公司中國檢驗檢疫科學研

:、、

究院中國農業科學院生物技術研究所中國測試技術研究院生物研究所甘肅國研檢驗檢測有限公司

、、、、

四川出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心中國科學院上海高等研究院

、。

本標準主要起草人梁文付偉李亮劉剛李妍車團結周李華林華楊鎮州朱鵬宇馬麗俠

:、、、、、、、、、、、

樊春海王麗華張瑩

、、。

Ⅰ

GB/T38132—2019

轉基因植物品系定量檢測數字PCR法

1范圍

本標準規定了轉基因植物品系的數字定量檢測方法

PCR。

本標準適用于種子及物理加工種子樣品中轉基因玉米品系品系

MON810、MON89034、MIR162

品系轉基因大豆品系轉基因水稻克螟稻品系轉基因棉花品系轉基因油菜

,GTS-40-3-2,,GHB119,

品系的數字法定量檢測

RT73PCR。

本方法的定量檢測限為質量分數

0.1%()。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規格和試驗方法

GB/T6682

轉基因產品檢測通用要求和定義

GB/T19495.1

轉基因產品檢測核酸提取純化方法

GB/T19495.3

轉基因產品檢測抽樣和制樣方法

GB/T19495.7

所有部分轉基因大米定量檢測數字法

SN/T4853()PCR

3術語和定義縮略語

、

31術語和定義

.

下列術語和定義適用于本文件

。

311

..

品系特異序列eventspecificsequence

外源片段插入受體作物基因組后重組產生的鄰接區序列

DNA。

32縮略語

.

下列縮略語適用于本文件

。

玉米乙醇脫氫酶基因

Adh-1:(Alcoholdehydrogenase1)

乙醇脫氫酶基因

Adhc:C(AlcoholdehydrogenaseCgene)

聚合酶鏈式反應

PCR:(Polymerasechainreaction)

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因

PEP:(Phosphoenolpyruvatecarboxylasegene)

磷脂酰膽堿磷脂水解酶基因

PLD:(PhospholipaseDgene)

4原理

數字其技術原理是通過將原始反應體系進行分割進而對所有小的反應體系進行擴增

PCRPCR,

并后續檢測通過對反應體系進行有限的分割從而使整個反應體系可以更加耐受核酸抑制因子并且

。,

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