標準解讀

《GB/T 36810-2018 草莓枯萎病菌檢疫鑒定方法》是一項國家標準，旨在為草莓枯萎病菌（Verticillium dahliae）的檢疫和鑒定提供科學依據和技術指導。該標準詳細規定了從樣品采集到最終鑒定結果報告的一系列步驟與要求。

首先，在樣品采集方面，標準明確了如何正確選取具有典型癥狀的草莓植株作為檢測對象，并對采樣工具、采樣時間以及樣品保存條件等做了具體說明，確保所采集樣本能夠準確反映目標病原體的存在情況。

其次，關于病原物分離純化部分，《GB/T 36810-2018》介紹了利用特定培養基進行病原真菌的初篩及后續純化過程。通過觀察菌落形態特征、生長速度等指標來初步判斷是否為疑似草莓枯萎病菌。

接著，在分子生物學鑒定環節中，該標準推薦使用PCR擴增技術結合序列分析法對分離得到的真菌進行基因水平上的確認。此方法不僅提高了檢測準確性，還縮短了整個鑒定周期。

此外，對于難以直接從植物組織中獲得足夠量DNA的情況，《GB/T 36810-2018》也給出了基于免疫學原理的ELISA試劑盒檢測方案作為補充手段之一。


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....

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  • 現行
  • 正在執行有效
  • 2018-09-17 頒布
  • 2019-04-01 實施
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文檔簡介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T36810—2018

草莓枯萎病菌檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofFusariumoxysporumSchlecht.f.s.

()p

FragariaeWinks&Williams

2018-09-17發布2019-04-01實施

國家市場監督管理總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T36810—2018

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫局

:。

本標準主要起草人劉躍庭羅加鳳牛春敬崔鐵軍廖芳

:、、、、。

Ⅰ

GB/T36810—2018

草莓枯萎病菌檢疫鑒定方法

1范圍

本標準規定了草莓枯萎病菌的檢疫鑒定方法

。

本標準適用于草莓苗中及其攜帶土壤中草莓枯萎病菌的檢疫鑒定

。

2草莓枯萎病菌的基本信息

中文名草莓枯萎病菌

:

學名Fusariumoxysporumfragariae

:(Schlecht.)f.sp.Winks&Williams

英文名

:fusariumwiltofstrawberry

分類地位草莓枯萎病菌屬真菌界子囊菌門盤菌亞門

:(Fungi),(Ascomycota),(Pezizomycotina),

糞殼菌綱肉座菌目叢赤殼科鐮刀菌屬Fusarium

(Sordariomycetes),(Hypocreales),(Nectriaceae),()。

傳播途徑病菌依靠帶菌種苗和土壤進行遠距離傳播

:。

草莓枯萎病菌的其他信息參見附錄

A。

3方法原理

病原菌的為害癥狀分離培養性狀形態特征及特異性擴增片段作為草莓枯萎病菌的檢疫鑒

、、PCR

定依據

。

4儀器用具和主要試劑

41儀器用具

.

顯微鏡超凈工作臺生物培養箱電子天平高壓滅菌鍋常規冰箱擴增儀電泳

、、、、、(-20℃)。PCR、

儀凝膠成像儀高速冷凍離心機恒溫水浴鍋

、、、。

培養皿三角瓶鑷子手術剪手術刀接種針移液器酒精燈

、、、、、、、。

42主要試劑

.

乙二胺四乙酸十二烷基磺酸鈉異戊醇三氯甲烷無水乙醇乙

(EDTA)、(SDS)、Tris-HCl、、、、70%

醇氯化鉀氯化鎂蛋白酶引物Taq聚合酶等分子生物學試劑或用植物組織及

、、、K、FofraF/FofraR、。

真菌基因組提取試劑盒提取蔗糖葡萄糖瓊脂青霉素鏈霉素次氯酸鈉

DNA。、、、、、0.5%(NaClO)。

馬鈴薯蔗糖培養基馬鈴薯葡萄糖培養基的制備參見附錄

(PSA)、(PDA)B。

5病菌的鑒定

51癥狀檢查

.

取待檢植株觀察植株有無生長不良矮小衰弱及腐爛癥狀下部葉片是否變紫紅色萎蔫

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