標準解讀
《GB/T 35337-2017 葡萄黃點類病毒檢疫鑒定方法》是針對葡萄黃點類病毒(Grapevine yellow speckle viroid, GYSVd)制定的一份國家標準,主要應用于進出口貿易、國內流通以及科學研究等領域中對該病毒的檢測與鑒定。該標準詳細規定了從樣品采集到最終結果判定的一系列操作流程和技術要求。
在樣品采集方面,標準明確了采樣時間應選擇在發病高峰期或癥狀明顯期進行;對于田間植株,推薦選取具有典型病癥特征的新鮮葉片作為待檢材料;同時強調了樣品保存條件的重要性,比如需要將采集到的樣本迅速放入保鮮袋內,并盡快送至實驗室處理,以保證后續實驗的有效性。
關于樣品制備部分,《GB/T 35337-2017》提供了兩種不同的核酸提取方法供使用者選擇:一種是基于硅膠膜柱的商業試劑盒法,另一種則是傳統的酚/氯仿抽提結合異丙醇沉淀技術。無論采用哪種方式,都需嚴格按照說明書或既定步驟執行,確保獲得高質量的RNA用于后續分析。
該標準還介紹了RT-PCR擴增反應的具體參數設置及優化建議,包括引物設計原則、退火溫度控制等關鍵因素,旨在提高目標序列特異性擴增效率的同時降低非特異性產物生成的可能性。此外,為了進一步驗證陽性結果的真實性,標準建議使用巢式PCR或者直接測序的方法來進行確認。
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....
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- 現行
- 正在執行有效
- 2017-12-29 頒布
- 2018-07-01 實施



文檔簡介
ICS6502001
B16..
中華人民共和國國家標準
GB/T35337—2017
葡萄黃點類病毒檢疫鑒定方法
DetectionandidentificationofGrapevineyellowspeckleviroid
2017-12-29發布2018-07-01實施
中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布
中國國家標準化管理委員會
GB/T35337—2017
前言
本標準按照給出的規則起草
GB/T1.1—2009。
請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發布機構不承擔識別這些專利的責任
。。
本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口
(SAC/TC271)。
本標準起草單位中國檢驗檢疫科學研究院中華人民共和國北京出入境檢驗檢疫局中國農業科
:、、
學院植物保護研究所
。
本標準主要起草人張永江鄧叢良駱衛峰趙曉麗呂玉峰張志想辛言言
:、、、、、、。
Ⅰ
GB/T35337—2017
葡萄黃點類病毒檢疫鑒定方法
1范圍
本標準規定了葡萄黃點類病毒的檢疫鑒定方法
。
本標準適用于可能帶有葡萄黃點類病毒的葡萄繁殖材料的檢疫鑒定
。
2規范性引用文件
下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
分析實驗室用水規格和試驗方法
GB/T6682
3葡萄黃點類病毒基本信息
學名Graevineellowseckleviroid
:pyp。
縮寫
:GYSVd。
異名葡萄黃斑類病毒葡萄黃痘類病毒
:、。
分類地位馬鈴薯紡錘塊莖類病毒科Posiviroidae蘋果銹果類病毒屬Ascaviroid
:(p)、(p)。
葡萄黃點類病毒的其他信息參見附錄
A。
4方法原理
類病毒檢測主要針對其核酸序列主要的方法有和核酸分子雜交
。RT-PCR。
5儀器設備主要用具和主要試劑
、
51儀器設備
.
電子天平感量普通天平感量高速冷凍離心機小型瞬時離心機普通冰箱超
(0.001g)、(0.1g)、、、、
低溫冰箱制冰機渦旋振蕩器磁力攪拌器高壓滅菌鍋計儀微波爐電泳儀電
(-80℃)、、、、、pH、PCR、、、
泳槽凝膠分析成像系統實時熒光儀雜交爐塑料薄膜封口機紫外交聯儀暗箱搖床恒溫水
、、PCR、、、、、、
浴鍋組織破碎儀等
、。
52主要用具
.
可調移液器無酶吸頭
(2.5μL、10μL、20μL、200μL、1000μL、5000μL)、RNA(10μL、20μL、
無離心管研缽研棒磁性分離架
200μL、1000μL、5000μL)、RNase(1.5mL、5mL、10mL)、、、、PCR
反應管實時熒光孔反應板雜交瓶雜交膜雜交袋光片
(200μL)、96、、、、X。
53主要試劑
.
除另有規定外所有試劑均為分析純實驗用水應符合中相關規定
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