新版CNAS對臨床基因擴增分析前的要求要素分析前階段定義CNAS-CL02定義（ISO15189同等引用）按時間順序自醫生申請至分析檢驗啟動的過程，包括檢驗申請、患者準備和識別、原始樣品采集、運送和實驗室內傳遞等。（檢驗前過程/分析前階段）檢驗申請患者準備

和識別原始樣品采集原始樣品運送實驗室內傳遞全面質量控制分子診斷分析前質量控制特點環節眾多包括檢驗申請、患者準備、標本采集、標本運送、標本接收及處理、保存等參與人員復雜包括醫生、患者、護士、標本運送人員以及檢驗技師等難以標準化不同醫院、同一醫院不同科室條件不同，人員熟練程度不一致，難以標準化標本類型多、運輸及保存條件復雜分子診斷分析前要求的要素5.1人員5.2設施和環境條件5.3實驗室設備、試劑和耗材5.4檢驗前過程分析前前階段人員人員資質PCR上崗證（《醫療機構臨床基因擴增實驗室管理辦法》的規定）員工能力評審新員工培訓、考核與授權離崗6個月以上的人員培訓設施和環境條件實驗室原則上分四個分隔開的工作區域實驗室各分區應配置固定和移動紫外線燈，標本制備區應配置二級生物安全柜制定實驗室溫濕度的要求并監測制定實驗室用水的要求并定期監測實驗室設施與環境條件標準化5分區PCR實驗室，各區之間物理分隔、空氣單向流動、可適當合并,具體分區，視實驗室所開展的項目定，以工作空間夠用，不影響報告時間，操作互不干擾，防止污染為基本原則傳遞倉傳遞標本和試劑生物安全柜內操作，避免污染環境設施和環境條件基因擴增檢驗各工作區域應有明確的標記，不同工作區域內的設備、物品不能混用應有足夠的、溫度適宜的儲存空間（如冰箱），用以保存臨床樣品和試劑，設置目標溫度和允許范圍，并記錄。應有溫度失控時的處理措施，并記錄。

冷鏈系統面臨風險冷鏈停止工作，溫度快速升高，導致試劑失效，樣本損壞突然停電工作制冷壓縮機故障無人值守，非工作時間很難快速發現故障試劑庫標本庫生物樣本庫軟件來解決！冷鏈監控系統通過終端采集的實時數據，設定報警范圍，選擇報警方式（短信或郵件），選擇接收報警信息的人員系統終端采集到報警數據時，自動向相關人員發出報警信息，并提醒工作人員及時處理智能化監控，實時處理！實驗室設備、試劑及耗材從事RNA的檢測，應配備高速冷凍離心機應按國家法規要求對強檢設備進行檢定（PCR儀、加樣器、溫度計和恒溫設備等）應對試劑和耗材進行合格性驗收，故障后修復的設備應對其性能進行驗證案例：HPV基因分型試劑驗證不合格試劑失效，Globin值普遍在200左右原因分析：試劑運輸途中熒光染料失效（SA-PE），導致Globin值偏低采取措施：新批（貨）次試劑與老批（貨）次試劑比對CNAS-CL02:2012檢驗前過程要素5.4.1總則5.4.2提供給患者和用戶的信息5.4.3申請單信息5.4.4原始樣品采集和處理5.4.5樣品運送5.4.6樣品接收5.4.7檢驗前處理、準備和儲存質量控制關鍵點實驗室應制定檢驗前活動的文件化程序和信息，以保證檢驗結果的有效性患者知情同意要求（例如：需要委托檢驗時，同意向相關醫療專家公開臨床信息和家族史）與患者和申請項目相關的臨床資料，用于檢驗操作和解釋檢驗結果目的總則科室《原是樣品采集和運送管理程序》《標本核收、處理和儲存程序》《原始樣品采集手冊》專業組《實驗室標本接收與處理程序》

案例：原始樣品采集手冊微創產前染色體非整倍體（T21/T18/T13）檢測知情同意書案例：2015年10月，一例無創產篩多條染色體數量信號異常，而B超未提示任何異常，遂于孕婦溝通結果，孕婦孕前1月有異體輸血病史乳腺癌風險評估相關基因高通量測序申請單申請單——一筆業務患者基本信息申請項目申請醫生信息流轉流程記錄采集確認標本轉運標本接收……CNAS-CL02:2012檢驗前過程要素5.4.1總則5.4.2提供給患者和用戶的信息5.4.3申請單信息5.4.4原始樣品采集和處理5.4.5樣品運送5.4.6樣品接收5.4.7檢驗前處理、準備和儲存質量控制關鍵點正確選擇原始樣本類型考慮檢測目的、原始樣本穩定性及影響因素正確采集標本考慮采集原是樣品對檢測的結果的影響正確運送標本和保存考慮運送過程中原是樣品的穩定性、生物安全等因素樣品接收初步判斷樣品是否適合檢驗，信息是否齊全標本類型適合的檢測項目全血/血漿/血清HBV、HCV、CMV等血液病毒定量、定型、突變檢測，血流感染細菌/真菌等鼻咽拭子H7N9、H5N1等呼吸道病毒檢測女性陰道拭子NG、UU、CT、HPV基因分型乳汁CMV、HBV、HCV等腦脊液HSV、CMV、EBV、VZV感染性疾病分子診斷標本類型選擇遺傳病分子診斷標本類型選擇標本類型適合的檢測項目采集容器/量全血遺傳病診斷，微創產前篩查紫頭管/2-3ml羊水產前遺傳病診斷無菌容器/最少10ml/雙份絨毛膜產前遺傳病診斷無菌容器/15mg以上腫瘤個體化醫療標本類型選擇標本類型適合的檢測項目血液乳腺癌基因（CYP2D6，BRCA1/2），血液系統疾病(JAK2)，嘌呤類化療藥物等骨髓血液系統疾病（融合基因篩查）石蠟組織切片/新鮮組織1、鉑類/紫杉類/氟類/嘌呤類化療藥物，吉西他濱個體化用藥；2、結腸癌(KRAS/BRAF)、非小細胞肺癌（EGFR/EML4-ALK）、乳腺癌（PI3KCA/HER2）、胃間質瘤（KIT/PDGFRA）、腦膠質瘤（1p/19q、IDH1/2）脫落細胞（胸腹水、支氣管肺泡灌洗液等）結腸癌(KRAS)、非小細胞肺癌(EGFR)等甲狀腺癌(RET)、乳腺癌(BRCA1/2)等口腔黏膜細胞乳腺癌基因（CYP2D6，BRCA1/2）血清Vs.血漿HBV熒光定量檢測結果可相差10倍Vs.盡管行業規范文件以及試劑說明書規定，HBV-DNA定量既可以用血清也可以用血漿標本，實驗室為減少臨床醫生和患者對結果的誤解，應盡量規定單一標本類型全血、血清、血漿全血/血漿推薦采用EDTA抗凝HIV或HCV等RNA病毒檢測的標本需在4h離心分離血漿，含分離膠采血管可原管運送、血漿標本2-8℃可穩定5天，-20℃或-70℃可穩定更長時間實驗室應評估反復凍融次數對檢測目標的影響全血、血清、血漿DNA檢測全血標本提取核酸之前室溫可穩定24h，2-8℃可穩定72h，RNA檢測的全血標本需加入核酸穩定劑血清應該在干冰上運輸，血漿應該在2-8℃條件下運輸，并在-20℃以下存放血漿標本保存不應使用自動除霜的冰箱骨髓推薦以EDTA作為抗凝劑（不可使用肝素）DNA分析時核酸提取之前應放置在2-8℃環境下，必須在72h內完成核酸的提取，RNA分析時，骨髓標本中應加入核酸穩定劑、冰上運輸至實驗室，2-8℃保存應在4h內提取核酸不能按時提取核酸應將標本保存在-20℃條件下，可穩定數月建議凍存前先分離出有核細胞，避免因凍融紅細胞裂解釋放亞鐵血紅素抑制PCR新鮮組織以DNA為分析目標冰上運輸至實驗室DNA在新鮮組織中2-8℃可穩定24h、-20℃可穩定2w、-70℃以下可穩定至少2年實體組織富含內源性核酸酶，處理前需盡快保存于-70℃或更低溫度帶血的組織凍存之前應用無菌生理鹽水充分洗凈組織凍存應盡量以液氮或-70℃的低溫凍存效果最好不可使用自動除霜冰箱保存新鮮組織對于進行FISH檢測的新鮮組織，應包埋于最佳切割溫度復合物中，直至檢測開始新鮮組織以RNA為分析目標時新鮮組織應以干冰運輸至實驗室RNA如果不能在1-4h內完成提取必須在-70℃凍存，如無條件保存應盡快完成RNA抽提，保存RNA，-20℃條件下RNA酶仍然有活性所有冷凍過程都應該是快速冷凍標本保存容器必須是無菌、疏水性的塑料容器產前標本超聲引導下穿刺采集絨毛膜：洗凈后15mg以上（去除母體雜質）羊水：最少10ml推薦同時采集母親外周血，供實驗室排除母體基因組的影響絨毛膜運輸必須使用惰性組織培養基或者生理鹽水緩沖液培養細胞必須雙瓶，且75%融合，對于未達到75%融合的樣本，應繼續培養，如滿足要求應當天處理絨毛膜/羊水細胞樣本檢測前需通過顯微鏡評價是否母體污染，應盡量去除，如不能當天處理，必須放置2-8℃保存，次日提取DNA干血片干血片適用于DNA分析，血片不應放置在密封的塑料袋中，濕氣會是血片長菌，如果放置塑料袋或容器中，應配備足夠的干燥劑和指示劑不同血片之間應用玻璃紙或隔開以避免交叉污染，可室溫保存和運輸，可穩定至少19個月其它標本支氣管肺泡盥洗液，室溫運輸，穩定24h、2-8℃穩定72h，更長時間保存需放置-20℃或-70℃、用于結核分枝桿菌檢測的標本凍存之前需經過消化去除污染男性尿道標本應使用聚酯拭子標本采集女性子宮頸標本或者尿道標本可以聚酯拭子或者人造絲拭子、運輸需采用轉運培養基HPV檢測標本的采集和轉運應按照試劑生產商的要求進行口腔黏膜細胞石蠟組織切片脫落細胞其它標本脫落細胞：胸水，無菌容器40-50ml；細