標準解讀

《GB/T 29393-2012 柑桔黃龍病菌的檢疫檢測與鑒定》是一項國家標準，旨在為柑桔黃龍病菌（Candidatus Liberibacter asiaticus）的檢疫檢測提供科學依據和技術指導。該標準適用于進出境植物及其產品的檢疫以及國內植物檢疫過程中對柑桔黃龍病菌的檢測和鑒定。

根據此標準，明確了柑桔黃龍病菌檢測的方法選擇原則，包括但不限于分子生物學方法如PCR技術的應用、血清學方法等，并且規定了不同檢測方法的具體操作步驟。對于樣品采集，給出了詳細的采樣要求，確保所采集樣本能夠真實反映待檢植株或果實的狀態。此外，還涵蓋了實驗室安全操作規范，以防止實驗過程中可能發生的污染或交叉感染問題。


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....

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  • 2012-12-31 頒布
  • 2013-03-01 實施
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文檔簡介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T29393—2012

柑桔黃龍病菌的檢疫檢測與鑒定

DetectionandidentificationofCandidatusliberobacterasiaticum

2012-12-31發布2013-03-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T29393—2012

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位全國農業技術推廣服務中心浙江省植物保護檢疫局

:、。

本標準主要起草人吳立峰嚴鐵林云彪項宇朱景全朱莉

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T29393—2012

柑桔黃龍病菌的檢疫檢測與鑒定

1范圍

本標準規定了柑桔黃龍病菌亞洲種Candidatusliberobacterasiaticum的檢測與鑒

jagoueixetal.

定方法

。

本標準適用于植物檢疫過程中對柑桔黃龍病菌亞洲種的檢測與鑒定

。

2病菌基本信息

中文名柑桔黃龍病菌

:。

學名Candidatusliberobacterasiaticum

:jagoueixetal.

病害英文名

:CitrusHuanglongbingHLB。

屬薄壁菌門韌皮部桿菌屬Liberobacter

Gracilicutes、。

3方法原理

根據柑桔黃龍病菌侵染柑桔植株發病典型癥狀進行田間鑒定經嫁接或經柑桔木虱Diahorina

;(p

citri傳病后可根據木本指示植物發病癥狀鑒定聚合酶鏈反應檢

),;(PolymeraseChainReaction,PCR)

測技術對柑桔黃龍病菌進行體外擴增可得到快速有效的鑒定結果

DNA,、。

4儀器及用具

紫外線透射儀或凝膠成像系統離心機核酸電泳儀計移液器

,,,pH,:10μL、20μL、100μL、

儀水浴器超純水系統電子天平

1000μL,PCR,、,。

5試劑與材料

緩沖液三羥甲基氨基甲烷鹽酸乙二胺四乙酸十二烷基硫酸鈉

TAE,()-(Tris-HCl),(EDTA),

乙酸鈉Taq酶緩沖液鎂離子2+脫氧核苷三

(SDS),(NaAc),,10×PCR,25mmol/L(Mg),20mmol/L

磷酸熒光染料瓊脂糖溴酚藍高錳酸鉀三氯甲烷氯仿異戊醇異丙醇

(dNTP),5μLDNA(GV),,,,(),,,

乙醇

。

6癥狀識別法

柑桔黃龍病主要鑒定依據是田間出現的葉片斑駁型黃化和黃梢葉片斑駁型黃化即葉片轉綠

“”“”。

后從主側脈附近和葉片基部開始黃化黃化部分擴展形成黃綠相間分布不均的斑駁后來可以全葉黃

、,,

化黃梢即在發病初期綠色樹冠上少部分新梢枝葉片黃化有些柑桔結果樹果實呈紅鼻子果在

。,。“”。

柑桔黃龍病區符合上述典型癥狀的病苗病樹可直接鑒定為柑桔黃龍病

、。

對難以下結論的疑似病苗病樹可根

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