ICS65.020.30B41中華人民共和國國家標準GB/T19167—2003傳染性襄病診斷技術Diagnostictechniquesforinfectiousbursaldisease2003-06-02發布2003-11-01實施中華人民共和國發布國家質量監督檢驗檢疫總局

GB/T19167-2003前傳染性囊病(IBD)又名雞傳染性法氏囊病、腔上囊炎、甘布羅病,是由雙RNA病毒科禽雙RNA病毒屬的傳染性襄病病毒(IBDV)引起的雞和火雞的一種急性、高度接觸傳染性疫病。本標準參考了世界動物衛生組織WorldOrganizationforAnimalHealth(英）.OfficeInternationaldesEpizooties(法),OIE]的《哺乳動物、禽、蜜蜂A和B類疾病診斷試驗和疫苗標準手冊》所推薦的方法。本標準的附錄A為規范性附錄。本標準由中華人民共和國農業部提出。本標準由全國動物檢疫標準化技術委員會歸口。本標準由北京市農林科學院畜牧獸醫研究所負責起草，由廣西獸醫研究所協作起草。本標準主要起草人:劉有昌、劉爵、周蚊、姚煒光、張方亮、賀榮蓮、吳健敏、蘭美益、黃紅梅、蔣冬福韋志鋒

GB/T19167-2003傳染性囊病診斷技術范圍本標準規定了傳染性囊病病毒的病原分離、抗原的檢測和檢測特異性抗體的瓊脂凝膠免疫擴散試驗、病毒血清微量中和試驗、酶聯免疫吸附試驗的技術要求。本標準適用于傳染性囊病的診斷與檢疫。病毒的分離及其鑒定2.1材料準備滅菌組織研磨器、離心機、37℃溫箱、孵化器、滅菌吸管、橡膠吸頭、滅菌小瓶、滅菌6*針頭、滅菌注時器、石蠟。2.2病料的采集和處理采集具有病變的新鮮法氏囊,用加有抗生素(3000IU/mL青霉素和3000g/mL鏈霉素)的胺蛋白酶磷酸緩沖液或生理鹽水制成20%的組織勾漿液,在37℃作用30min～60min,1500r/min離心20min,收集上清液。經菌檢培養為陰性后作為接種材料2.3雞胚接種2.3.1接種將收集的上清液以每只0.2mL的量經絨毛尿囊膜接種9日齡～11日齡無傳染性囊病母源抗體雞胚或SPF雞胚(無特定病原體雞胚),接種后用石蠟封住接種孔。37C孵育，每天照蛋檢查，棄去24h內死亡的雞胚、2.3.2雞胚部檢結果判定2.3.2.1標準IBDV分離物接種后判定：標準的IBDV分離物接種雞胚后3d～5d可致雞胚死亡。死亡雞胚充血，在羽毛囊、趾關節和大腦有血斑性出血。肝臟多可見壞死，也可見色淡似熟肉樣。2.3.2.2IBDV變異棟分離物接種后判定：IBDV變異林經絨毛尿囊膜接種雞胚，一般不致死雞胚，接種后5d～6d部檢,可見雞胚大腦和腹部皮下水腫、發育遲緩、呈灰白色或奶油色，肝臟常有膽汁著色或壞死，牌臟通常腫大2倍～3倍.但顏色無明顯變化2.4易感維雞接種試驗2.4.1接種取2.2述及的病料上清液0.5mL,經點眼、口服感染5只14日齡～21日齡無IBDV母源抗體雞或SPF雞。同時設健康對照組。接種3d后將雞部殺，檢查法氏囊及牌臟。2.4.2刮檢接種結果2.4.2.1標準IBDV接種結果：接種后偶見雞死亡,部檢可見接種雞法氏囊水腫、色黃，有時可見出血：牌臟有時可見輕度腫大，表面有灰色點狀病變。健康雞則正常。2.4.2.2IBDV變異林接種結果：接種后不出現死亡.3d部檢可見法氏囊菱縮、質度硬，牌臟可見腫大1倍～2倍。健康雞則正常。2.5IBD病毒的鑒定2.5.1瓊脂凝膠免疫擴散(AGID)試驗用已知的特異性的雞傳染性囊病標準陽性血清，用分離株