標準解讀
GB/T 14926.56-2001 是一項中國國家標準,全稱為《實驗動物 狂犬病病毒檢測方法》。這項標準規定了對實驗動物進行狂犬病病毒檢測的具體操作規程、技術要求及判定標準,旨在確保實驗動物的質量控制和生物安全,預防狂犬病在實驗動物群體中的傳播,同時也為相關科研活動和疾病監測提供科學依據。
標準內容概覽:
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范圍:明確了該標準適用于各種實驗動物(如鼠、兔、猴等)體內狂犬病病毒的檢測。
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規范性引用文件:列出了實施該標準時需要參考的其他相關國家標準或國際標準文獻。
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術語和定義:對標準中使用的專業術語進行了明確界定,包括狂犬病病毒、抗原、抗體等關鍵概念。
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檢測方法概述:介紹了標準推薦的幾種檢測技術,主要包括直接檢測病毒抗原的方法(如免疫熒光試驗IFT)、檢測病毒核酸的分子生物學方法(如PCR)以及血清學方法檢測特異性抗體等。
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樣本采集與處理:詳細說明了不同種類實驗動物樣本(如腦組織、血液)的采集部位、采集方法、保存條件及預處理步驟,以確保樣本質量滿足檢測要求。
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檢測步驟:
- 免疫熒光試驗(IFT):詳細步驟包括樣本固定、抗體標記、熒光顯微鏡觀察等,用于直接檢測樣本中的病毒抗原。
- PCR檢測:涵蓋核酸提取、引物設計、擴增條件設定及結果分析,用以檢測病毒核酸的存在。
- 血清學檢測:如酶聯免疫吸附試驗(ELISA)或快速免疫層析試驗,用于檢測動物血清中的狂犬病病毒抗體。
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結果判定:提供了每種檢測方法的具體陽性、陰性判定標準,確保檢測結果的準確性和可比性。
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質量控制:強調了實驗室應執行的質量控制措施,包括使用陽性和陰性對照、定期校準儀器設備、操作人員培訓等,以保證檢測結果的可靠性。
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安全防護:提醒執行檢測的操作人員應采取適當的安全措施,防止樣本處理過程中狂犬病病毒的感染風險。
實施意義:
該標準的實施有助于統一實驗動物狂犬病病毒檢測的技術流程和判定標準,提升檢測效率與準確性,為實驗動物管理和公共衛生安全提供重要技術支撐。通過規范化的檢測手段,能有效監控實驗動物群中狂犬病的流行情況,保障科學研究的順利進行及人類健康安全。
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文檔簡介
ICS65.020.30B44中華人民共和國國家標準GB/Tr14926.56—2001實驗動物狂犬病病毒檢測方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofrabiesvirus(RV)2001-08-29發布2002-05-01實施中華人民共和國發布國家質量監督檢驗檢疫總局
GB/T14926.56-2001前本標準規定了狂犬病病毒的檢測方法。狂犬病病毒屬人獸共患病原。是普通級犬和SPF犬的必檢項目,因此增加該病毒的檢測方法。本標準由中華人民共和國科學技術部提出并歸口。本標準起草單位:中國實驗動物學會。本標準主要起草人:田克恭。
中華人民共和國國家標準實驗GB/T14926.56-2001狂犬病病毒檢測方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofrabicsvirus(RV)1范圍本標準規定了狂犬病病毒(RV)的檢測方法、試劑等本標準適用于犬RV的檢測。)引用標準下列標準所包含的條文.通過在本標準中引用而構成為本標準的條文。本標準出版時.所示版本均為有效。所有標準都會被修訂,使用本標準的各方應探討使用下列標準最新版本的可能性。GB/T14926.50—2001實驗動物酶聯免疫吸附試驗GB/T14926.54—2001實驗動物血凝抑制試驗原理根據免疫學原理.采用RV抗原檢測犬血清中RV抗體:或根據RV在一定的條件下,能凝集鵝紅細胞·這種凝集紅細胞的能力可被特異性抗體所抑制的原理,檢測犬血清中RV抗體、4主要試劑和器材4.1試劑4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特異性抗原在生物安全柜內,用RV感染BHK21細胞,接種6d后,當病變達十十十~一十十十十時收獲。凍融三次或超聲波處理后,低速離心去除細胞碎片,上清液再經超速離心濃縮后制成ELISA抗原。4.1.1.2正常抗原BHK21細胞凍融破碎后·經低速離心去除細胞碎片而獲得的上清液4.1.2血凝素RV接種BHK21細胞,培養4~5d.當病變達土十~+十土時收獲。。凍融三次或超聲波處理后,低速離心去除細胞碎片,上清液分裝后低溫保存。4.1.3陽性血清RRV弱毒株抗原免疫的犬血清。4.1.4陰性血清無RV感染、未經免
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