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文檔簡介

實驗二徒手切片與臨時裝片的制作授課教師：鄭磊2008.12.04

實驗目的與要求

熟練掌握徒手切片技術，能夠切出只有一層細胞的切片。實驗器材與用具顯微鏡、培養皿、單面刀片、雙面刀片、載玻片、蓋玻片、毛筆、吸水紙。實驗材料與試劑實驗材料

新鮮的吊蘭莖和葉、芹菜葉柄、黃豆芽，胡蘿卜（支持物）。試劑

1%番紅水溶液、

45%醋酸。實驗原理徒手制片一般指徒手用刀片把新鮮的或固定好的植物材料切成薄片，不經染色或經簡單染色后用水封片制成臨時制片的方法。此制片法主要優點是：（1）能及時觀察研究植物生活組織的結構和天然色彩；（2）方法及用具簡單，不需切片機等機械設備，短時間即可完成。主要缺點是：（1）對于微小、柔軟、水分過多以及堅硬的材料，難以用徒手切成薄片；（2）不能制成連續的切片；（3）對于操作不熟練者，往往難以切成厚薄均勻和完整的切片。實驗方法材料的準備和修整

將植物莖切成2~3cm長的小段，并將其切面削平；若為質地較軟而薄的材料，如葉片，可沿主脈兩側切成寬5~6mm、長1~1.5cm的小塊，夾在支持物中進行切片。支持物通常為蘿卜、胡蘿卜、馬鈴薯、通心草等。先將支持物切成高3~5cm、長、寬0.5cm的立方體小塊，將其中部縱切一縫，然后將修整好的材料夾在其中。

切片

切片前在培養皿內盛放適量清水。以左手拇指、食指、中指捏住材料，拇指應低于食指，以免切傷手指，材料高出食指2~3mm。切片前，用水潤濕刀片，以減少切片阻力。右手執刀，將刀片平放在左手食指上，刀口朝內，刀面與材料斷面平行，然后以均勻快捷的動作自左前方向右后方以臂力帶動刀片水平切割，不要用腕力。同時還要注意，切時動作要迅速，材料一次切下，切忌停頓或拉鋸式切割。切下數片后，用濕毛筆輕輕將薄片移入清水中，防止材料萎蔫。染色與鏡檢若要觀察植物組織的天然色彩：挑選薄而透明、平整的切片，放在載玻片上，水封，制成臨時裝片。若想染色以觀察更清楚的切片：采用單染色，即用1%番紅水溶液染色3~5min，用蒸餾水洗去浮色，水封，鏡檢。觀察材料剃刀雙面刀片拿材料的手勢胡蘿卜木髓切取標本切取的標本擦拭載玻片滴水放置標本加蓋蓋玻片葉的橫切玉米莖橫切南瓜莖橫切南瓜莖縱切任務與要求

1.制作

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