東芝生化

應用培訓2004年3月主要內容非線性定標方式的選用雙波長的設定異常結果的分析常見問題的解答非線性校準方式的選用非線性校準方式的選用非線性校準方式的選用Logit-4：4參數對數

Logit-5：5參數對數指數函數：5參數指數樣條函數:三次方的樣條函數

非線性校準方式的選用非線性校準方式的選用非線性校準方式的選用Logit-4：（4參數對數）

KcY=——————————+Y01+exp（-（a+blnX））Logit-5：（5參數對數）

KcY=————————————+Y01+exp（-（a+blnX+Xc））非線性校準方式的選用指數函數：（5參數指數）

Y=Kcexp（alnX+b（lnX）2+c（lnX）3）+Y0Y：吸光度

X：濃度

Y0：基值（標準濃度為0的值）

Kc：無限大濃度標準與Y0間的差（范圍參數）

a,b,c,d:測定非線性組分的因數

樣條函數:（三次方的樣條函數）F(X)=aX3+bX2+cX+d

用上述三次多項式采用內插法進行非線性校準方式的選用得到好的非線性校準曲線的必要條件根據實驗的校準曲線正確選擇校準方式合理選擇校準物校準曲線的形狀對實驗結果準確性的要求校準物數目越多，得到的結果越準確。校準物的濃度間隔由每種校準曲線來決定。校準物的濃度間隔影響反應準確度。校準物濃度應覆蓋測定實驗范圍。

雙波長的使用雙波長的使用雙波長的作用：用于消除反應時的干擾因素。干擾因素：1分析溶液混濁2存在較大的干擾物質的光吸收3儀器及電源的噪音雙波長的選擇：1分析溶液混濁選擇副波長時盡量接近主波長2消除干擾物質的光吸收干擾組分在兩個波長處有相同的吸光度值3儀器及電源的噪音

雙波長的使用影響結果準確的因素病人標本試劑及校準品儀器人員結果異常零或負值？？？結果異常零或負值？？？可能的原因：結果異常零或負值硬件：樣品針堵塞管路軟件：正常范圍/檢測范圍

主副波長因數（酶因數/斜率因數）定標次數反應方向輸入錯誤

結果異常零或負值其它：試劑位置是否正確該試劑是否曾冷藏結冰樣品量不足結果異常重復性不好？？？

結果異常重復性不好？？？

可能的原因：結果異常重復性不好

硬件：注加器泄露樣品針堵塞燈泡亮度不穩清洗塔是否工作正常恒溫水浴有異物檢查反應杯

重復性不好

結果異常軟件：測定時間是否合適定標因數是否過大其它：試劑是否正確試劑是否失效，有無異物交叉污染標準物是否正確

交叉污染交叉污染常見原因：1儀器清洗機構管路堵塞2清洗劑使用不當3水質不良4樣品針/試劑針不清潔5特殊樣品6相鄰試劑有干擾交叉污染解決方法：1儀器清洗機構管路堵塞

濃縮廢液管是否堵塞干燥棒是否需要更換

2清洗劑使用不當

清洗劑是否使用規定品牌定期清洗是否嚴格執行交叉污染3水質不良

進水過濾閥是否過臟純水裝置是否需要更新濾芯或交換樹脂4樣品針/試劑針/比色杯不清潔

調整分析項目的順序增加特殊清洗程序或啟動OSS功能定期對樣品針/試劑針/比色杯進行清洗

交叉污染5特殊樣品

樣品粘稠度過高6相鄰試劑有干擾

改變儀器添加試劑的順序交叉污染質控結果與病人結果不符質控數據的方法是否與該試劑相符質控品是否被反復凍溶試劑的正常值范圍是否發生變化如果有其它質控品可對比測定調整斜率因數以室間質控結果為準常見問題結果小數點的設置定標次數的設定

TBA-120FR水空白（試劑空白）設置注意大小寫（Water）TBA-120FR清洗劑位置的設定

TBA-120FRDatabase與Run畫面盤號的對應血清指數血清指數血清指數血清指數血清指數血清指數血清指數血清指數[Exampleofsetting]Testname

TestID525354LipemiaHemolysisIcterusFlagandcriteriaNOR1.5NOR50NOR2.51.5+3.550+1002.5+5.53.5++5.0100++1505.5++8.55.0+++6.0150+++2008.5+++12.5

6.04+2004+12.54+血清指數最大速率法最大速率法

首先計算實驗參數設定的讀點時間內每個測光點間的吸光度變化，并確認吸光度變化最大值。其次對此時間兩側的比色點進行檢查，確認此吸光度變化相對于最大吸光度變化落在實驗參數設定的允許最大速率值（%）內。

用此時間的數據進行最小二乘法計算每分鐘吸光度變化。然而，如果最大吸光度變化小于缺省值0.33mAbs/min，將用所有數據進行最小二乘法計算每分鐘吸光度變化，噪音將最小。

注意：加入試劑后無噪音的第一個測光點應作為測光點設定在讀點時間內，至少應設定4個測光點，必須設定允許的最大速率值（%）。最大速率法最大速率法最大速率法參數設定中常見的問題參數設定中常見的問題

超出定標范圍的結果計算：如果樣品結果超出定標范圍，計算后在樣品結果加有錯誤號碼“？”。超出定標血清濃度的定標曲線由最后兩個定標點進行延伸。用百分數設定此線的可靠范圍，假設定標曲線的吸光度（吸光度變化）范圍為100%。

AB<舉例>當設定[YES]-[50%],“YES”表示此功能使用，假設最高濃度的定標物的吸光度與試劑空白的吸光度差為100%，設定范圍A至B百分數。參數設定中常見的問題

吸光度窗口：表示常規樣品、空白和定標物在測定波長下允許的吸光度范圍的下限和上限。在測定讀點時間內超出設定范圍的數據不用于結果計算。TBA-40FRTOSHIBA[Main]->[4OPTIONS]->[2TESTPARAMETERS]TBA-40FRAbosorbanceWindowTOSHIBA●AbsTimeSR1R2●●●●●●●●●●:NotusesData●:UsesDataNormalSampleReagent-1SampleAbsorbanceWindowPrimaryWavelengthisused●TBA-40FRColorCorrectionTOSHIBAAbsTimeSR1R2●●●●●●●●●●●●●●●●●●●●:NotusesData●:UsesDataNormalSampleExHemolizedSampleAbsorbanceWindowLowerLimit●Reagent-1SampleAdjustmentPoint參數設定中常見的問題

吸光度調整點：設定的吸光度窗口可由樣品顏色的吸光度進行補償。對于參數“吸光度調整點”，用周期數設定檢查樣品顏色的點。對于雙試劑系統，建議設在“5加第二試劑前。對于單試劑系統，建議設在加樣品后。如果在每個括號內輸入“0”，不進行補償。參數設定中常見的問題

校準曲線檢查：正向斜率：上升曲線的每個定標點的吸光度為正向。負向斜率：下降曲線的每個定標點的吸光度為負向。逐漸增加：鄰近的定標點間的吸光度變化逐漸增加。逐漸降低：鄰近的定標點間的吸光度變化逐漸降低。

參數設定中常見的問題參數設定中常見的問題

校準曲線檢查：指定校準曲線的斜率方向和定標點間吸光度變化的上升或下降，檢查產生的校準曲線是否滿足這些設定。如果沒有滿足這些設定，用此曲線測定的常規樣品結果加有錯誤號碼“I”。

當設定校準曲線檢查為“0”時，不使用此功能。此時括號內無顯示。TBA-40FRTOS