生化藥品質量分析中檢所生化藥品及基因工程藥物室

2010-31生化藥品特點2010版藥典收載生化藥品情況生化藥品質控特點肝素鈉和胸腺肽評價性抽驗質量分析2

一般系指從動、植物及微生物中提取、分離、純化、或用生物化學半合成或用現代技術制得的具有生物化學活性的一類用于臨床治療的藥物。氨基酸及其衍生物肽與蛋白酶與輔酶核苷酸及其衍生物多糖脂類組織提取的多組分生化藥物生化藥品的定義與分類3《中國藥典》2010版二部生化藥品

標準（品種)匯總4氨基酸及其衍生物-2010版藥典品種全，包含國內外所有氨基酸類產品。臨床應用方便，制劑系列化。固體制劑：片、膠囊、顆粒、散、口含片；溶液制劑：口服溶液、滴眼液、注射液、沖洗液等。增訂、修訂和統一內容、與國外同類標準接軌。增訂：檢查項中統一用TLC檢查其它氨基酸項；有關物質檢查：HPLC法。修訂：含量測定、非水滴定、比色法，及HPLC法。5核苷酸及其衍生物-2010版藥典

臨床上是主治病毒疾患，部分治療心血管及腦損傷、缺氧等疾病。如阿糖胞苷、利巴韋林、阿昔洛韋、更昔洛韋、泛昔洛韋。微生物發酵或半合成，化學結構清楚、成分明白、質量標準完善。2010版核酸類藥物品種較齊，制劑較全，少的2-3種標準；多的7-8種，最高為12種之多。如利巴韋林產品有12種：固體制劑（5種）：原料、片、口含、膠囊、顆粒；液體制劑（7種）：滴眼液、滴鼻液、口服溶液、注射劑、氯化鈉注射劑、葡萄糖注射劑、注射用。增訂的項目：在檢查項中有：有關物質，異常毒性、滲透壓、殘留溶媒。修訂的項目：含量均勻度、熱原修訂為細菌內毒素、含測方法、TCL分離度、溶液澄清度和顏色用法、用量、注射途徑、注射速度。6酶與輔酶-2010版藥典酶和輔酶是我國生化藥物中發展比較快的一類，建國以來有長足的進步。凡國外藥典有的本屆藥典都已載入。大部分是從生物體的某些組織中提取、純化和精制；少部分是從微生物經發酵、破壁、再從發酵液中提取、純化和精制而得。酶是蛋白質，具有生物活性，提取和純化過程中，既要保持活性，又要得率高，在質量指標的制定中始終密切注意其酶的總活性、比活力和純度的關系。而且每種酶均有自身的特點。增修訂內容：檢查項有溶液的顏色、高分子物質檢查、有關物質安全性普遍增加異毒，細內，微生物限度、無菌、過敏。7多肽、蛋白-2010版藥典蛋白質就是由許多氨基酸殘基組成的多肽鏈。一般以51個氨基酸殘基，分子量為5733的胰島素劃分，高于此分子量為蛋白，小于為肽。合成多肽：成份清楚、結構明確，是近年來生化藥中崛起的新品種、新技術、高水平、高質量的產品，如重組人胰島素和重組人生長激素。大部分與國際接軌，修訂的項目較全，如新增的生長抑素。從臟器提取的激素、肽，因工藝粗、純度差、雜質多、質量差、安全性沒法保障從藥典中刪去，盡管臨床仍很需要。如垂體后葉粉、注射液、縮宮素溶液、甲狀腺粉。

8多糖-2010版藥典品種來源類別劑型右旋糖酐20發酵血漿代用品原料右旋糖酐20葡萄糖注射液右酐20、葡萄糖血漿代用品注射劑右旋糖酐20氯化鈉注射液右酐20、氯化鈉血漿代用品注射劑右旋糖酐40發酵血漿代用品粉劑右旋糖酐40葡萄糖注射液右酐40、葡萄糖血漿代用品注射劑右旋糖酐40氯化鈉注射液右酐40、氯化鈉血漿代用品注射劑右旋糖酐70發酵血漿代用品原料右旋糖酐70葡萄糖注射液右酐70、葡萄糖血漿代用品注射劑右旋糖酐70氯化鈉注射液右酐70、氯化鈉血漿代用品注射劑右旋糖酐鐵絡合物抗貧血藥原料右旋糖酐鐵片右酐鐵抗貧血藥片劑右旋糖酐注射液右酐鐵抗貧血藥注射劑肝素鈉豬、牛腸粘膜抗凝血藥原料肝素鈉注射液肝素鈉抗凝血藥注射劑肝素鈉乳膏肝素鈉抗凝血藥軟膏硫酸軟骨素鈉豬喉骨、鼻中骨、氣管降血脂及鎮痛藥原料硫酸軟骨素鈉片硫酸軟骨素鈉降血脂及鎮痛藥片劑硫酸軟骨素鈉膠囊硫酸軟骨素鈉降血脂及鎮痛藥膠囊劑9脂類-2010版藥典

前列地爾，注射用前列地爾多烯酸乙酯軟膠囊采用新的質控指標使多烯酸乙酯的質量與EP，JP一致。10存在問題：缺乏原材料的來源要求及質控標準缺乏提取物溶液的質控標準各企業的生產工藝差異較大缺乏病毒工藝驗證缺乏專屬性的鑒別項目缺乏有效性的檢測指標（如活性測定）含量沒有上限組織提取的多組分生化藥物11組織提取的多組分生化藥物建議：1、由于多組分生化藥注射劑的組成、質量與原材料和制備工藝密切相關，因此質量標準難以進行全面控制，建議將原材料、中間體及原液的質量要求及工藝過程收入終產品質量標準，以盡可能控制起始原料、制備工藝對終產品的組成和含量的影響，實現全過程控制。2、多組分肽注射劑的組分復雜，難以確定其有效成分，建議增加活性測定，通過活性測定指標來反映產品的有效性。3、有多家企業生產、同時執行相同的標準的品種，建議統一生產工藝。4、參照中藥的指紋圖譜，開展多組分生化藥品的反相特征圖譜研究，通過特征圖譜來鑒別產品真偽及確保產品的批與批之間的一致性。12生化藥品質控特點原材料質量控制培養或提取過程的質量控制純化工藝過程的質量控制制劑工藝過程的質量控制終產品的質量控制對生產全過程進行質量分析與控制13生化藥品中的生物測定和安全性檢查采用生物測定的約20品種約占總數的28%（酶與輔酶，多肽、蛋白、少數多糖）包括：在體生物測定、體外生物測定安全性檢查------覆蓋幾乎所有生化藥品有待改進的品種：肝素納：效價測定仍沿用兔全血法和羊血漿法USP新版已改為理化測定分光光度法，測定抗FⅩa和抗FⅡa取代生物測定本實驗室參加了WHO組織的針對這一替代方法的肝素鈉6thIS的國際協作標定，為肝素納的理化測定替代生物測定積累經驗硫酸魚精蛋白：

EP6.0已經、USP即將采用滴定法以分光光度法測試終點，理化測定取代了生物測定14安全性檢查試驗（無菌、微生物限度、熱原、細菌內毒素、異常毒性、降壓物質、過敏等）考慮生化藥來源于人、動物組織，或通過發酵而得產品成分復雜、有關物質成分有的不明確來源、工藝等任何環節的微小變化可能會引發不可預測的不良反應少量生化藥注冊上市的歷史過程復雜，其安全性和有效性尚不確切我國GMP實施的現狀近年來藥害事件的教訓2010版對生化藥終產品嚴格質量控制、采取更嚴厲措施

除2005版原有指標外，原標準沒有的大部分都增修訂生物安全檢查項15安全性檢查試驗

-------制法要求、特殊安全性檢查16肝素鈉注射液；胸腺肽注射液和注射用胸腺肽評價性抽驗質量分析介紹17肝素鈉注射液背景：肝素是高度硫酸化的糖胺聚糖，為抗凝血藥，主要從豬的腸粘膜中提取得到。自上世紀三十年代應用于臨床，已經使用了七十多年；我國是肝素生產大國，為肝素原料的主要出口國。肝素產品是一大類產品，包括肝素鈉（鈣）、低分子肝素鈉（鈣）、類肝素等等。一直以來，我國的肝素產品存在著原料出口而制劑進口的問題；2008年年初，美國百特公司生產的肝素鈉注射液在美國發生了嚴重的不良反應；對我國的肝素鈉注射液進行評價性抽驗，可以更好的了解我國肝素鈉注射液的生產情況和質量情況，對新的檢驗檢測技術進行研究，可以提高我國肝素的檢驗檢測水平，與國際接軌。這對推動我國肝素產業的發展有深遠的意義。18法定檢驗小結：按法定標準檢驗，發現樣品在可見異物、pH值、裝量等方面的一些問題，在一定程度上反映產品質量。但目前的法定標準缺乏專屬性鑒別反應、雜質檢查方法及對輔料的檢查方法等，所以還不能全面反映和控制產品質量。肝素鈉注射液19探索性研究：1、離子色譜法檢查有關雜質2、毛細管電泳法檢查有關雜質3、體積排阻色譜法檢查樣品純度4、反相色譜法檢查防腐劑苯酚含量5、旋光度測定檢查樣品純度6、微量生色底物法測定抗FXa和抗FIIa活性7、滲透壓測定考察處方及工藝穩定性肝素鈉注射液20通過質量分析發現的主要問題：質量標準方面（1）法定檢驗標準缺乏專屬的鑒別反應,有關物質檢查,對輔料的檢查。（2）抗凝效價不能完全反映樣品中含有雜質的情況，建議使用抗FXa因子和抗FⅡa因子效價。（3）建議修訂藥典pH值限度，從“5.5～8.5”修訂為“5.5～8.0”。（4）建議修訂裝量檢查限度，從“不少于標示量”修訂為“2.0ml～2.2ml”肝素鈉注射液21肝素鈉注射液原材料

部分批次樣品中含有較高含量的多硫酸軟骨素和硫酸皮膚素。生產工藝（1）對可見異物的控制不夠，出廠檢驗時可見異物存在漏檢現象。（2）樣品批間差異較大，質量穩定性不夠。（3）同一個企業產品有的批次含苯酚，有的不含苯酚，生產工藝有一定的隨意性。處方

生產企業的處方不統一，處方合理性還有待探討。包裝有的企業安瓿包裝紙盒不夠牢固，安瓿破損率較高。22建議：1.肝素鈉注射液標準修訂增加雜質檢查方法增加防腐劑檢查增加滲透壓檢查修訂pH值檢查限度修訂裝量檢查限度修訂效價測定方法為底物法2.規范肝素鈉注射液的生產工藝和處方3.注重對肝素原料的質量控制（粗品、精品)4.繼續肝素的質量研究工作雜質分析、結構分析（核磁、離子色譜法單糖組成、游離和結合硫酸根含量等）、分子量與分子量分布測定等工作肝素鈉注射液23胸腺肽背景：胸腺肽是從健康豬或牛胸腺中提取的分子量小于10000道爾頓的的混合多肽類藥物；具有調節人體細胞免疫功能的作用，能促進T－淋巴細胞成熟。用于各種原發性或繼發性T細胞缺陷、各種細胞免疫功能低下的疾病和腫瘤的輔助治療；臨床上常用的制劑有：胸腺肽注射液、注射用胸腺肽，臨床上使用：皮下或肌肉注射、靜脈滴注；目前在臨床用藥的過程中胸腺肽注射劑還存在過敏等不良反應，該品種的質量及其標準還有待于進一步提高和完善；對胸腺肽注射劑進行評價性抽驗，可以更好地了解我國胸腺肽注射劑的生產和質量情況，發現存在的問題，進一步提高藥品質量和進一步完善質量標準。24胸腺肽胸腺肽是從健康豬或小牛胸腺組織提取的分子量小于10000道爾頓的混合多肽，其中的多肽數量多達數十種，主要包括：胸腺肽α家族：α1～α10、其中胸腺肽α1為一個含有28氨基酸殘基的多肽。胸腺肽β家族：β1～β10其他胸腺激素：胸腺體液因子（THF）、血清胸腺因子（FTS）、胸腺生成素等其中胸腺生成素為一個含有49個氨基殘基的多肽，胸腺五肽是胸腺生成素肽段的一部分，即位于胸腺生成素活性部位的第32～36位氨基酸序列。胸腺肽具有調節和增強人體細胞免疫功能的作用，其體內生物學活性是胸腺產生的眾多肽類激素的綜合作用結果。胸腺肽注射劑在我國臨床應用已有20多年的歷史，2000年以前該品種執行的標準為地方標準，由于各種制劑的生產工藝，標準不同，產品質量及臨床療效也有較大的差異。直到2000年將該品種的地方標準上升為國家標準后，情況逐漸好轉。

25胸腺肽法定檢驗小結：

目前執行的國家藥品標準基本可行，但部分檢驗項目尚存在問題：胸腺肽溶液的鑒別（1）中加入的硫酸銅溶液量太多，導致藍色過剩掩蓋雙縮脲反應的紫紅色。注射用胸腺肽標準的鑒別（1）中由于規格不同，供試品溶液的濃度會產生較大的差異，導致顯色反應具有較大的差異。胸腺肽α1的檢查方法專屬性較差等。26胸腺肽探索性研究：1、降壓物質檢查2、胸腺肽α1測定方法比較及胸腺肽α1含量與活性關系研究3、特征圖譜分析