網(wǎng)址：本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用！請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途！-上海液質(zhì)檢測技術(shù)有限公司第第頁ABTS自由基清除能力檢測試劑盒說明書貨號：UPLC-MS-4570規(guī)格：50T/24S

可見分光光度法產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時(shí)聯(lián)系工作人員。試劑名稱規(guī)格保存條件提取液液體60mL×1瓶2-8℃保存試劑一液體80mL×1瓶2-8℃保存試劑二粉劑×1瓶2-8℃保存試劑三液體20μL×1支2-8℃保存試劑四液體1.5mL×1支-20℃保存試劑五粉劑×1支2-8℃保存溶液的配制：1、試劑二：臨用前加入3mL蒸餾水，充分溶解；用不完的試劑可分裝后保存，-20℃可保存四周，避免反復(fù)凍融；、試劑三工作液的配制：液體置于試劑瓶內(nèi)EP管中。臨用前根據(jù)樣本量按試劑三（μL）：蒸餾水（mL）=1μL:12mL4h之內(nèi)用完；3、試劑四工作液的配制：可先將試劑四-20℃分裝保存。臨用前根據(jù)樣本量按試劑四：試劑一（V:V）=1:9的比例配成試劑四工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用，現(xiàn)配現(xiàn)用，用不完的試劑放于-20℃可保存兩周。45mgC2.8mL提取液，充分振蕩溶解；10mmol/LC溶液，用于陽性對照。2-8℃可保存兩周。5、ABTS工作液的配制：臨用前根據(jù)樣本量按試劑一：試劑二：試劑三工作液（V:V:V）=76:5:4的比例配成ABTS工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配，室溫避光保存，務(wù)必在30分鐘內(nèi)使用。產(chǎn)品說明：ABTSABTS經(jīng)氧化后生成穩(wěn)ABTS405nm734nmABTSABTSnmABTS自由基的能力。ABTS

H2O2

ABTS·+(405nm)

Antioxidants

ABTS注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。需自備的儀器和用品：可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、研缽/粉碎機(jī)、烘干箱、30~50目篩、冰、蒸餾水。操作步驟：一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）160℃（或粉碎機(jī)粉碎30~500.05g1mL40℃30min；10000rpm10min，取上清，置于冰上待測。2、紅酒、果汁等液體樣本：吸取100μL樣本溶液加入900μL提取液，旋渦振蕩混勻，室溫10000rpm離心10min，取上清，置冰上待測。3、提取物或者藥物：可用提取液配制成一定濃度，如5mg/mL。注意：ABTS自由基的能力可能相差很大，為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，樣本要根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整（90%5%，建議加大烘干樣本質(zhì)量或液體樣本體積進(jìn)行提取。二、測定步驟1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至405nm，蒸餾水調(diào)零。210mmol/LC、0.1mmol/LC90%10mmol/L維生素C溶液用提取液配制成大于1.5mmol/L的維生素C溶液待用。序號稀釋前濃度（mmol/L）C（μL）提取液體積（μL）稀釋后濃度（mmol/L）110100900121160400.831120800.641801200.451401600.261201800.1備注：實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需50μL維生素C溶液。3、操作表：在EP管中分別加入下列試劑：試劑名稱（μL）空白管測定管對照管陽性對照管上清液-5050-不同濃度的VC溶液50蒸餾水50試劑四工作液100100-100ABTS工作液850850-850試劑一--950-6min405nmAAAA陽性對照，陽性對照標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測照，陽性對照標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測1-2次。三、ABTS自由基清除率的計(jì)算陽性對照的自由基清除率計(jì)算公式：ABTS自由基清除率DVC%=[(A空白-A陽性對照)÷A空白]×100%。樣本