關于人工抗體的制備第一頁，共十七頁，2022年，8月28日第一節(jié)多克隆抗體一、概念：采用傳統(tǒng)免疫方法，將抗原物質經(jīng)不同途徑注入動物體內，數(shù)次免疫后采血，分離血清，由此獲得抗血清即為多克隆抗體。簡稱多抗。第二頁，共十七頁，2022年，8月28日二、多克隆抗體用途1.用于抗原物質的鑒別、定位、分析和提純。2.作為疾病的診斷、檢疫試劑。3.作為人和動物的某些疾病的治療制劑。第三頁，共十七頁，2022年，8月28日三、多克隆抗體制備過程第四頁，共十七頁，2022年，8月28日第二節(jié)單克隆抗體一、概念：

是指由一個B細胞分化增殖的子代細胞（漿細胞）產生的針對單一抗原決定簇的抗體，簡稱單抗。

特點：高特異性、高均一性第五頁，共十七頁，2022年，8月28日二、單抗與多抗的比較

特性多抗

單抗

對免疫原的要求免疫原純度高，不純的抗原即可抗體純度才高產生高純度抗體

抗體產生細胞多克隆性單克隆性

同質性高度異質高度同質

特異性較高，與抗原上高，與特定多種決定簇結合決定簇結合

穩(wěn)定性較好較差

標準化較難簡單

交叉反應很常見不常見

沉淀反應有大多數(shù)沒有第六頁，共十七頁，2022年，8月28日二、單抗與多抗的比較

特性多抗

單抗

適用的血清學實驗適用大多數(shù)需適當選擇抗體純度才高產生高純度抗體

供應量有限無限

有效抗體含量

0.1~1.0懸浮培養(yǎng)：0.01~0.05

（mg/mL）中空纖維：1.0~5.0

小鼠腹水：1.0~5.0

無關Ig含量

10~15體外培養(yǎng)液：無

（mg/mL）小鼠腹水：0.5~1.0

其他血清蛋白有體外培養(yǎng)：少量牛血清白蛋白小鼠腹水：少量雜蛋白第七頁，共十七頁，2022年，8月28日三、建立B細胞雜交瘤與單克隆抗體生產基本過程第八頁，共十七頁，2022年，8月28日四、單克隆抗體的優(yōu)勢

高度均一性：純度很高的均一性抗體

高度專一性：只對抗原分子上某一抗原決定簇起反應。

大量產生及穩(wěn)定性：雜交瘤細胞能在體內外無限繁殖之傳代。

第九頁，共十七頁，2022年，8月28日五、單克隆抗體的應用（一）在血清學技術方面。（二）在免疫學基礎研究方面。（三）在腫瘤治療方面。如生物導彈。（四）在抗原純化方面。（五）用于制備抗獨特型抗體疫苗。第十頁，共十七頁，2022年，8月28日第三節(jié)基因工程抗體一、概念：利用基因工程技術制備的抗體分子，稱為基因工程抗體。這是分子水平的抗體。優(yōu)勢：去除或減少無關結構，保留或增加天然抗體特異性和生物學活性。

第十一頁，共十七頁，2022年，8月28日

基本制備過程：第十二頁，共十七頁，2022年，8月28日

是指在同一抗體分子中含有不同種屬來源抗體分子片段的抗體。

嵌合抗體多為“鼠-人”類型。一、嵌合抗體：

第十三頁，共十七頁，2022年，8月28日

將鼠抗體超變區(qū)基因嵌入人抗體Fab骨架區(qū)編碼基因中，再將此DNA片段與人Ig恒定區(qū)基因相連，轉染雜交瘤細胞，并表達嵌合的V區(qū)抗體。

二、重構抗體：

三、單鏈抗體：

是將Ig的H鏈和L鏈的V區(qū)基因相連，轉染大腸桿菌表達的抗體分子，又稱單鏈FV分子。

第十四頁，共十七頁，2022年，8月28日

如:Ig相關分子：將抗體分子部分片段連接到與抗體無關的序列上得到。

噬菌體抗體：將已知特異性的抗體分子的所有V區(qū)基因在噬菌體中構建基因庫，用噬菌體感染細菌，模擬免疫選擇過程，使具有相應特異性的重鏈和輕鏈可變區(qū)在噬菌體表面呈現(xiàn)出來。四、其他基因工程抗體：

五、全套抗體基因庫

第十五頁，共十七頁，2022年，8月28日