選修三現代生物科技專題

專題一基因工程第一小節DNA重組技術的基本工具選修三現代生物科技專題

專題一基因工程第一小1ThecamelecowThecamelecow2為什么能把一種生物的基因“嫁接”到

另一種生物上并成功表達？1、大多數生物的遺傳物質都是DNA，且主要為雙螺旋結構，即不同生物的DNA分子基本結構是相同的，都遵循堿基互補配對原則。所以不同的生物DNA可以嫁接2、地球上的所有生物共用一套遺傳密碼，所以，一種生物的基因可以在另外一種生物體內得以表達為什么能把一種生物的基因“嫁接”到

另一種生物上并成功表達？3基因工程：又叫做基因拼接技術或DNA重組技術。通俗的說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。原理：操作水平：結果(目的）：基因重組DNA分子水平定向地改造生物的遺傳性狀，獲得人類所需要的品種。（一）基因工程的概念基因工程：又叫做基因拼接技術或DNA重組技術。通俗的說，就是4基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：（一）基因工程的概念普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌提取抗蟲基因棉花細胞(含抗蟲基因)棉花植株(有抗蟲特性)上述培育抗蟲棉的關鍵步驟是什么？重組DNA導入形成基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：（一）基因工程的概念普通棉花(5（一）基因工程的概念基因工程培育抗蟲棉的關鍵步驟：關鍵步驟一：從蘇云金芽孢桿菌細胞內提取出抗蟲基因關鍵步驟二：形成重組DNA關鍵步驟三：重組DNA導入受體(棉花)細胞（一）基因工程的概念基因工程培育抗蟲棉的關鍵步驟：關鍵步驟一6解決培育抗蟲棉的關鍵步驟需要哪些工具？（二）DNA重組技術的基本工具

關鍵步驟一的工具：

關鍵步驟二的工具：

關鍵步驟三的工具：分子手術刀—限制性內切酶分子縫合針—DNA連接酶

分子運輸車—運載體解決培育抗蟲棉的關鍵步驟需要哪些工具？（二）DNA重組技術的7閱讀課本4-5頁“限制性核酸內切酶——分子手術刀”的相關內容，填寫下表自主學習主要從原核生物中分離純化而來已經分離出大約4000種1、識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列2、使每一條鏈中特定部位的特定兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。形成兩種末端：黏性末端或平末端閱讀課本4-5頁“限制性核酸內切酶——分子手術刀”的相關內容8G1’2’3’4’5’1’2’3’4’5’A3’,5’-磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵G1’2’3’4’5’1’2’3’4’5’A3’,59（一）限制酶——“分子手術刀”12345（一）限制酶——“分子手術刀”1234510中軸線在G與A之間切割大腸桿菌的一種限制酶(EcoRⅠ)只能識別GAATTC序列，并在G和A之間切開。EcoRI限制酶的作用中軸線在G與A之間切割大腸桿菌的一種限制酶(EcoRⅠ)只能11“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（二）基因操作的工具限制酶“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（二）基因操作的工具限制酶12什么叫黏性末端？（二）基因操作的工具

被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，他們之間正好互補配對，這樣的切口叫黏性末端。什么叫黏性末端？（二）基因操作的工具被限制酶13SmaI只能識別CCCGGG序列，并在C和G之間切開。中軸線SmaI限制酶的作用在G與C之間切割SmaI只能識別CCCGGG序列，并在中軸線SmaI限制酶的14平末端平末端SmaI限制酶的切割當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時，切開的DNA兩條單鏈的切口，是平整的，這樣的切口叫平末端。平末端平末端SmaI限制酶的切割當限制酶從識別序列的中15G

AA

TT

CC

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AA

GEcoRⅠ中軸線CCCGGGG

GG

CC

CSmaⅠ黏性末端平末端平末端黏性末端GAATTCCTTAA1611DNA重組技術的基本工具課件(人教版選修III)21718仔細觀察各限制酶識別的特定序列有何特點？限制酶的識別序列限制酶所識別的序列的特點是：呈現堿基互補對稱，無論是6個堿基還是4個堿基，都可以找到一條中心軸線，中軸線兩側的雙鏈DNA上的堿基是反向對稱重復排列的，稱為回文序列18仔細觀察各限制酶識別的特定序列有何特點？限制酶的識別序列18目的基因所在的DNA分子SmaⅠ識別序列及切割的位點為CCC↓GGGEcoRⅠ識別序列及切割的位點G↓AATTC

請選擇合適的限制酶切割目的基因目的基因所在的DNA分子SmaⅠ識別序列及切割的位點為CCC19要想獲得某個特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產生幾個黏性末端？（二）基因操作的工具要切兩個切口，產生四個黏性末端。如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，會怎樣呢？

會產生相同的黏性末端，然后讓兩者的黏性末端黏合起來，就似乎可以合成重組的DNA分子了。要想獲得某個特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產生幾20限制性內切酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制性內切酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。在質粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側各有一個酶Ⅱ的切點。（1）請畫出質粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。（2）請畫出目的基因兩側被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。（3）在DNA連接酶作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接？為什么？

可以連接。因為由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互補的）小試身手限制性內切酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制性內211．下圖所示限制性核酸內切酶切割某DNA的過程，從圖中可知，該限制性核酸內切酶能識別的堿基序列及切點是()A．CTTAAG，切點在C和T之間B．CTTAAG，切點在G和A之間C．GAATTC，切點在G和A之間D．CTTAAG，切點在C和T之間C

1．下圖所示限制性核酸內切酶切割某DNA的過程，A．CTTA222.下列關于限制酶的說法正確的是A．限制酶廣泛存在于各種生物中，但原核生物中很少B．一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA后都會形成黏性末端 D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵

B2.下列關于限制酶的說法正確的是B2324類型來源功能相同點差別E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶大腸桿菌T4噬菌體恢復磷酸二酯鍵只能連接黏性末端能連接黏性末端和平末端(效率較低)閱讀課本第5頁“分子縫合針”——DNA連接酶的相關內容，填寫下表自主學習24類型來源功能相同點差別E·coliDNA連接酶T4DNA24把切下來的DNA片段拼接成新的DNA，即將脫氧核糖和磷酸連接起來催化形成磷酸二酯鍵DNA連接酶的作用把切下來的DNA片段拼接成新的DNA，即將脫氧核糖和磷酸連接25兩DNA片段要具有互補的黏性末端才能拼起來DNA連接酶的縫合作用可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，注意：DNA連接酶可連接雙鏈DNA中的DNA單鏈缺口，但不能連接單鏈DNA！兩DNA片段要具有互補的黏性末端才能拼起來DNA連接酶的縫合26DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效率較低DNA連接酶的縫合作用DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？T4DNA連接酶還可27AATTGCAATTAATTDNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶的作用返回AATTGC28都能催化形成磷酸二酯鍵都是蛋白質

不需要需要形成完整的重組DNA分子形成DNA的一條鏈基因工程DNA復制DNA連接酶與DNA聚合酶的比較只能將單個核苷酸連接到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯鍵在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵都能催化形成磷酸二酯鍵都是蛋白質 不需要需要形成完整的重組D294．據下圖所示，有關工具酶功能的敘述錯誤的是()A．限制性核酸內切酶可以切斷a處B．DNA聚合酶可以連接a處C．解旋酶可以使b處解開D．DNA連接酶可以連接c處D

4．據下圖所示，有關工具酶功能的敘述錯誤的是()A．限制30？目的基因受體細胞運載體問：運載體具備什么特點才能完成此操作？基因很難進入受體細胞中。運載體的作用：將外源基因送入受體細胞。

？目的基因受體細胞運載體問：運載體具備什么特點才能完成此操作31運載體的特點1：

能進入并在宿主細胞內穩定保存并大量復制；

問題1：假如目的基因導入受體細胞后不能復制將怎樣？運載體的特點1：能進入并在宿主細胞內穩定保存并大量復制；32問題2：作為載體沒有切割位點將怎樣？問題2：作為載體沒有切割位點將怎樣？33？重組質粒DNA連接酶受體細胞運載體的特點2：

相同限制酶……CTTAAGCTTAAGCTTAAGCTTAAG目的基因具多個限制酶切點，以便與外源基因連接。？重組質粒DNA連接酶受體細胞運載體的特點2：相同限制酶…34目的基因所在片段運載體PStⅠDNA連接酶重組DNA運載體自連目的基因自連CTTAAGCTTAAGCTTAACTTAAGGPStⅠ問題3：目的基因是否進入受體細胞，你如何去察覺？目的基因所在片段運載體PStⅠDNA連接酶重組DNA運載體自35有標記基因，以便于鑒定與選擇如抗菌素的抗性基因、產物具有顏色反應的基因等。運載體的特點3：

有標記基因，以便于鑒定與選擇運載體的特點3：36問題4：如果載體對受體細胞有害將怎樣？不能分離會怎樣？運載體的特點4：

對受體細胞無害、易分離。常用的運載體：

質粒、動植物病毒，噬菌體衍生物問題4：如果載體對受體細胞有害將怎樣？運載體的特點4：對受37細菌的質粒：自主復制的雙鏈、閉合、環狀DNA分子；可以在細胞間轉移細菌的質粒：自主復制的雙鏈、閉合、環狀DNA分子；可以在細胞38pBR322質粒結構

如果外源DNA插入，氨卞青霉素抗性基因失活標記基因進行篩選限制性內切酶識別序列外源基因連接PStⅠPStⅠ自主復制pBR322質粒結構

如果外源DNA插入，氨卞青霉素抗性基因39質粒的特點1細胞染色體（或擬核DNA分子）外能自主復制的小型環狀DNA分子；2質粒的存在對宿主細胞無影響；3.質粒的復制只能在宿主細胞內完成。質粒的特點1細胞染色體（或擬核DNA分子）外能自主復制的小401.以下說法正確的是（）

A、所有的限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列

B、質粒是基因工程中唯一的運載體

C、運載體必須具備的條件之一是：具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接

D、DNA連接酶使黏性末段的堿基之間形成氫鍵C練習1.以下說法正確的是412.不屬于質粒被選為基因運載體的理由是

A、能復制（）

B、有多個限制酶切點

C、具有標記基因

D、它是環狀DNAD練習2.不屬于質粒被選為基因運載體的理由是D練習423.有關基因工程的敘述中，錯誤的是（）

A、基因工程技術能定向地改造生物的遺傳性狀，培育生物新品種

B、重組DNA的形成在細胞內完成

C、目的基因須由運載體導入受體細胞

D、質粒都可作為運載體BD練習3.有關基因工程的敘述中，錯誤的是（）BD431．下列關于DNA連接酶的敘述中，正確的是A．DNA連接酶連接的是兩條鏈堿基對之間的氫鍵B．DNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和脫氧核糖C．DNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和核糖D．同一種DNA連接酶可以切出不同的黏性末端B1．下列關于DNA連接酶的敘述中，正確的是44A2．在胰島素的基因與質粒形成重組DNA分子的過程中，下列哪組是所需要的①同一種限制酶切割兩者；②不需同一種限制酶切割兩者；③加入適量的DNA連接酶；④不需加DNA連接酶A．①③ B．①④ C．②④ D．②③A2．在胰島素的基因與質粒形成重組DNA分子的過程中，下列哪453.下列四條DNA分子，彼此間具有粘性末端的一組是

A．①②B．②③C．③④D．②④答案：D3.下列四條DNA分子，彼此間具有粘性末端的一組是答案：D464、關于限制酶的說法中，正確的是（）A、限制酶是一種酶，只識別GAATTC堿基序列B、EcoRI切割的是G—A之間的氫鍵C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNAD．限制酶只存在于原核生物中答案：C4、關于限制酶的說法中，正確的是（）答案：C47你能推測限制酶存在于原核生物中的作用是什么嗎？原核生物易受自然界外源DNA的入侵，但生物在長期的進化過程中形成了一套完善的防御機制，以防止外來病原物的侵害。限制酶就是細菌的一種防御性工具，當外源DNA侵入時，會利用限制酶將外源DNA切割掉，以保證自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，從而達到保護自身的目的。尋根問底為什么限制酶不剪切細菌本身的DNA？通過長期的進化，細菌中含有某種限制酶的細胞，其DNA分子中不具備這種限制酶的識別切割序列，或者通過甲基化酶將甲基轉移到所識別序列的堿基上，使限制酶不能將其切開。這樣，盡管細菌中含有某種限制酶也不會使自身的DNA被切斷，并且可以防止外源DNA的入侵。你能推測限制酶存在于原核生物中的作用是什么嗎？原核生物易受自483、天然的DNA分子可以直接用做基因工程載體嗎？為什么？提示：基因工程中作為載體使用的DNA分子很多都是質粒（plasmid），即獨立于細菌擬核處染色體DNA之外的一種可以自我復制、雙鏈閉環的裸露的DNA分子。是否任何質粒都可以作為基因工程載體使用呢？不是，作為基因工程使用的載體必需滿足以下條件：3、天然的DNA分子可以直接用做提示：491）載體DNA必需有一個或多個限制酶的切割位點，以便目的基因可以插入到載體上去。這些供目的基因插入的限制酶的切點所處的位置，還必須是在質粒本身需要的基因片段之外，這樣才不至于因目的基因的插入而失活。2）載體DNA必需具備自我復制的能力，或整合到受體染色體DNA上隨染色體DNA的復制而同步復制。3）載體DNA必需帶有標記基因，以便重組后進行重組子的篩選。4）載體DNA必需是安全的，不會對受體細胞有害，或不能進入到除受體細胞外的其他生物細胞中去。5）載體DNA分子大小應適合，以便提取和在體外進行操作，太大就不便操作。實際上自然存在的質粒DNA分子并不完全具備上述條件，都要進行人工改造后才能用于基因工程操作。1）載體DNA必需有一個或多個限制酶的切割位點，以便目的基504、DNA連接酶有連接單鏈DNA的本領嗎？

迄今為止，所發現的DNA連接酶都不具有連接單鏈DNA的能力，至于原因，現在還不清楚，也許將來會發現可以連接單鏈DNA的酶。4、DNA連接酶有連接單鏈DNA的本領嗎？迄今為51再見再見52選修三現代生物科技專題

專題一基因工程第一小節DNA重組技術的基本工具選修三現代生物科技專題

專題一基因工程第一小53ThecamelecowThecamelecow54為什么能把一種生物的基因“嫁接”到

另一種生物上并成功表達？1、大多數生物的遺傳物質都是DNA，且主要為雙螺旋結構，即不同生物的DNA分子基本結構是相同的，都遵循堿基互補配對原則。所以不同的生物DNA可以嫁接2、地球上的所有生物共用一套遺傳密碼，所以，一種生物的基因可以在另外一種生物體內得以表達為什么能把一種生物的基因“嫁接”到

另一種生物上并成功表達？55基因工程：又叫做基因拼接技術或DNA重組技術。通俗的說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。原理：操作水平：結果(目的）：基因重組DNA分子水平定向地改造生物的遺傳性狀，獲得人類所需要的品種。（一）基因工程的概念基因工程：又叫做基因拼接技術或DNA重組技術。通俗的說，就是56基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：（一）基因工程的概念普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌提取抗蟲基因棉花細胞(含抗蟲基因)棉花植株(有抗蟲特性)上述培育抗蟲棉的關鍵步驟是什么？重組DNA導入形成基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：（一）基因工程的概念普通棉花(57（一）基因工程的概念基因工程培育抗蟲棉的關鍵步驟：關鍵步驟一：從蘇云金芽孢桿菌細胞內提取出抗蟲基因關鍵步驟二：形成重組DNA關鍵步驟三：重組DNA導入受體(棉花)細胞（一）基因工程的概念基因工程培育抗蟲棉的關鍵步驟：關鍵步驟一58解決培育抗蟲棉的關鍵步驟需要哪些工具？（二）DNA重組技術的基本工具

關鍵步驟一的工具：

關鍵步驟二的工具：

關鍵步驟三的工具：分子手術刀—限制性內切酶分子縫合針—DNA連接酶

分子運輸車—運載體解決培育抗蟲棉的關鍵步驟需要哪些工具？（二）DNA重組技術的59閱讀課本4-5頁“限制性核酸內切酶——分子手術刀”的相關內容，填寫下表自主學習主要從原核生物中分離純化而來已經分離出大約4000種1、識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列2、使每一條鏈中特定部位的特定兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。形成兩種末端：黏性末端或平末端閱讀課本4-5頁“限制性核酸內切酶——分子手術刀”的相關內容60G1’2’3’4’5’1’2’3’4’5’A3’,5’-磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵G1’2’3’4’5’1’2’3’4’5’A3’,561（一）限制酶——“分子手術刀”12345（一）限制酶——“分子手術刀”1234562中軸線在G與A之間切割大腸桿菌的一種限制酶(EcoRⅠ)只能識別GAATTC序列，并在G和A之間切開。EcoRI限制酶的作用中軸線在G與A之間切割大腸桿菌的一種限制酶(EcoRⅠ)只能63“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（二）基因操作的工具限制酶“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（二）基因操作的工具限制酶64什么叫黏性末端？（二）基因操作的工具

被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，他們之間正好互補配對，這樣的切口叫黏性末端。什么叫黏性末端？（二）基因操作的工具被限制酶65SmaI只能識別CCCGGG序列，并在C和G之間切開。中軸線SmaI限制酶的作用在G與C之間切割SmaI只能識別CCCGGG序列，并在中軸線SmaI限制酶的66平末端平末端SmaI限制酶的切割當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時，切開的DNA兩條單鏈的切口，是平整的，這樣的切口叫平末端。平末端平末端SmaI限制酶的切割當限制酶從識別序列的中67G

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GEcoRⅠ中軸線CCCGGGG

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CSmaⅠ黏性末端平末端平末端黏性末端GAATTCCTTAA6811DNA重組技術的基本工具課件(人教版選修III)26970仔細觀察各限制酶識別的特定序列有何特點？限制酶的識別序列限制酶所識別的序列的特點是：呈現堿基互補對稱，無論是6個堿基還是4個堿基，都可以找到一條中心軸線，中軸線兩側的雙鏈DNA上的堿基是反向對稱重復排列的，稱為回文序列18仔細觀察各限制酶識別的特定序列有何特點？限制酶的識別序列70目的基因所在的DNA分子SmaⅠ識別序列及切割的位點為CCC↓GGGEcoRⅠ識別序列及切割的位點G↓AATTC

請選擇合適的限制酶切割目的基因目的基因所在的DNA分子SmaⅠ識別序列及切割的位點為CCC71要想獲得某個特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產生幾個黏性末端？（二）基因操作的工具要切兩個切口，產生四個黏性末端。如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，會怎樣呢？

會產生相同的黏性末端，然后讓兩者的黏性末端黏合起來，就似乎可以合成重組的DNA分子了。要想獲得某個特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產生幾72限制性內切酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制性內切酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。在質粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側各有一個酶Ⅱ的切點。（1）請畫出質粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。（2）請畫出目的基因兩側被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。（3）在DNA連接酶作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接？為什么？

可以連接。因為由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互補的）小試身手限制性內切酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制性內731．下圖所示限制性核酸內切酶切割某DNA的過程，從圖中可知，該限制性核酸內切酶能識別的堿基序列及切點是()A．CTTAAG，切點在C和T之間B．CTTAAG，切點在G和A之間C．GAATTC，切點在G和A之間D．CTTAAG，切點在C和T之間C

1．下圖所示限制性核酸內切酶切割某DNA的過程，A．CTTA742.下列關于限制酶的說法正確的是A．限制酶廣泛存在于各種生物中，但原核生物中很少B．一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA后都會形成黏性末端 D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵

B2.下列關于限制酶的說法正確的是B7576類型來源功能相同點差別E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶大腸桿菌T4噬菌體恢復磷酸二酯鍵只能連接黏性末端能連接黏性末端和平末端(效率較低)閱讀課本第5頁“分子縫合針”——DNA連接酶的相關內容，填寫下表自主學習24類型來源功能相同點差別E·coliDNA連接酶T4DNA76把切下來的DNA片段拼接成新的DNA，即將脫氧核糖和磷酸連接起來催化形成磷酸二酯鍵DNA連接酶的作用把切下來的DNA片段拼接成新的DNA，即將脫氧核糖和磷酸連接77兩DNA片段要具有互補的黏性末端才能拼起來DNA連接酶的縫合作用可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，注意：DNA連接酶可連接雙鏈DNA中的DNA單鏈缺口，但不能連接單鏈DNA！兩DNA片段要具有互補的黏性末端才能拼起來DNA連接酶的縫合78DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效率較低DNA連接酶的縫合作用DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？T4DNA連接酶還可79AATTGCAATTAATTDNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶的作用返回AATTGC80都能催化形成磷酸二酯鍵都是蛋白質

不需要需要形成完整的重組DNA分子形成DNA的一條鏈基因工程DNA復制DNA連接酶與DNA聚合酶的比較只能將單個核苷酸連接到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯鍵在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵都能催化形成磷酸二酯鍵都是蛋白質 不需要需要形成完整的重組D814．據下圖所示，有關工具酶功能的敘述錯誤的是()A．限制性核酸內切酶可以切斷a處B．DNA聚合酶可以連接a處C．解旋酶可以使b處解開D．DNA連接酶可以連接c處D

4．據下圖所示，有關工具酶功能的敘述錯誤的是()A．限制82？目的基因受體細胞運載體問：運載體具備什么特點才能完成此操作？基因很難進入受體細胞中。運載體的作用：將外源基因送入受體細胞。

？目的基因受體細胞運載體問：運載體具備什么特點才能完成此操作83運載體的特點1：

能進入并在宿主細胞內穩定保存并大量復制；

問題1：假如目的基因導入受體細胞后不能復制將怎樣？運載體的特點1：能進入并在宿主細胞內穩定保存并大量復制；84問題2：作為載體沒有切割位點將怎樣？問題2：作為載體沒有切割位點將怎樣？85？重組質粒DNA連接酶受體細胞運載體的特點2：

相同限制酶……CTTAAGCTTAAGCTTAAGCTTAAG目的基因具多個限制酶切點，以便與外源基因連接。？重組質粒DNA連接酶受體細胞運載體的特點2：相同限制酶…86目的基因所在片段運載體PStⅠDNA連接酶重組DNA運載體自連目的基因自連CTTAAGCTTAAGCTTAACTTAAGGPStⅠ問題3：目的基因是否進入受體細胞，你如何去察覺？目的基因所在片段運載體PStⅠDNA連接酶重組DNA運載體自87有標記基因，以便于鑒定與選擇如抗菌素的抗性基因、產物具有顏色反應的基因等。運載體的特點3：

有標記基因，以便于鑒定與選擇運載體的特點3：88問題4：如果載體對受體細胞有害將怎樣？不能分離會怎樣？運載體的特點4：

對受體細胞無害、易分離。常用的運載體：

質粒、動植物病毒，噬菌體衍生物問題4：如果載體對受體細胞有害將怎樣？運載體的特點4：對受89細菌的質粒：自主復制的雙鏈、閉合、環狀DNA分子；可以在細胞間轉移細菌的質粒：自主復制的雙鏈、閉合、環狀DNA分子；可以在細胞90pBR322質粒結構

如果外源DNA插入，氨卞青霉素抗性基因失活標記基因進行篩選限制性內切酶識別序列外源基因連接PStⅠPStⅠ自主復制pBR322質粒結構

如果外源DNA插入，氨卞青霉素抗性基因91質粒的特點1細胞染色體（或擬核DNA分子）外能自主復制的小型環狀DNA分子；2質粒的存在對宿主細胞無影響；3.質粒的復制只能在宿主細胞內完成。質粒的特點1細胞染色體（或擬核DNA分子）外能自主復制的小921.以下說法正確的是（）

A、所有的限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列

B、質粒是基因工程中唯一的運載體

C、運載體必須具備的條件之一是：具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接

D、DNA連接酶使黏性末段的堿基之間形成氫鍵C練習1.以下說法正確的是932.不屬于質粒被選為基因運載體的理由是

A、能復制（）

B、有多個限制酶切點

C、具有標記基因

D、它是環狀DNAD練習2.不屬于質粒被選為基因運載體的理由是D練習943.有關基因工程的敘述中，錯誤的是（）

A、基因工程技術能定向地改造生物的遺傳性狀，培育生物新品種

B、重組DNA的形成在細胞內完成

C、目的基因須由運載體導入受體細胞

D、質粒都可作為運載體BD練習3.有關基因工程的敘述中，錯誤的是（）BD951．下列關于DNA連接酶的敘述中，正確的是A．DNA連接酶連接的是兩條鏈堿基對之間的氫鍵B．DNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和脫氧核糖C．DNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和核糖D．同一種DNA連接酶可以切出不同的黏性末端B1．下列關于DNA連接酶的敘述中，正確的是96A2．在胰島素的基因與質粒形成重組DNA分子的過程中，下列哪組是所需要的①同一種限制