《中國藥典》2010年版附錄通用檢測方法和指導原則主要增修訂內容凌大奎一、主要報告內容1、附錄增修訂原則2、擬增修訂項目3、主要增訂項目內容4、主要修訂項目內容5、評價與展望二、附錄增修訂原則1、新增通用檢測方法應是目前藥品檢驗檢測急需的、能解決目前存在突出問題的，并能引導藥品檢驗檢測水平不斷增高，能充分反映現階段國內和國際藥品質量控制先進技術的成熟可靠的方法。急需、前瞻、先進、成熟2、指導原則的增訂，理由和意義要充分，應對藥品質量標準和質量控制有實際指導意義。3、修訂內容應緊密圍繞藥品標準以及藥品監督管理工作，修訂必須有充分的理由和科學依據，不輕易修改。三、擬增修訂項目1、一部共16項，其中新增6項：電泳測定法滲透壓摩爾濃度測定法等離子體發射光譜法大孔樹脂有機殘留物測定法聚合酶鏈式反應法中藥特征圖譜指導原則三、擬增修訂項目2、二部共45項，新增12項：核磁共振波譜法離子色譜法電導率測定法錐入度檢查法2-乙基己酸測定法光學顯微鏡法拉曼光譜法指導原則溶出度測定指導原則藥物多晶型研究指導原則蛋白質含量測定法合成多肽中醋酸測定法氨基酸測定指導原則四、主要增訂項目內容核磁共振波譜法1、未知物的結構測定2、已知物的結構確證功能團分析異構體分析打假工作（肝素鈉中的摻偽物在2.16ppm有特征信號）3、含量分析（多組份抗生素）四、主要增訂項目內容離子色譜法1、有機、無機陰陽離子和低分子量親水性有機分子的分離測定2、氨基酸不經衍生化直接測定3、某些抗生素的有關物質檢查4、金屬的形態與價態分析四、主要增訂項目內容拉曼光譜法指導原則1、與紅外光譜一樣，同為分子的振動光譜IR與偶極矩變化相關│Mnm│=Raman與極化率變化相關│(aij)nm│=2、兩者選一律互為補充3、拉曼光譜測定快速、準確，樣品制備簡單甚至無需制備4、拉曼光譜通常處于可見與近紅外區可以有效地用光導纖維將各光學元件聯結樣品可以包封在對激光光源透明的玻璃、塑料中或將樣品溶于水中5、一些特殊的拉曼技術，如共振拉曼和表面增強拉曼光譜可以使譜帶強度增加103～106倍，使痕量物質的結構研究成為可能。四、主要增訂項目內容重金屬檢查與測定法1、重金屬檢查法（化學法）一法硫代乙酰胺比色法適用于溶于水、稀酸或乙醇等的藥物甲（Pb）乙（樣品）加設監控管丙（Pb+樣品）要求丙＞甲＞乙合格如丙＜甲采第二法二法熾灼后的硫代乙酰胺比色法適用于含芳環、芳雜環以及難溶于水、稀酸或有機溶劑的藥物。配成溶液后同一法操作。三法硫化鈉比色法適用于堿溶性藥物，同原附錄未加監控管。四、主要增訂項目內容2、原子吸收與光焰光度法無實質修改3、等離子體質譜修訂附錄完善了原附錄增加了干擾與校正，樣品溶液的制備以及測定方法中增加了標準加入法等段落。本法是重金屬測定中最靈敏的一個方法（10-12～10-15）4、等離子體發射光譜新增附錄本法靈敏（10-9～10-12）、準確、線性范圍寬、元素覆蓋范圍寬、可實現多種元素同時測定。5、離子色譜新增附錄可實施金屬的形態與價態分析6、原子熒光未收載與ICP-MS和ICP-AES比差與AA比相仿四、主要增增訂項目內內容制藥用水1、生產工工藝純化水飲飲用水水經蒸餾、、離子交換換、反滲透透等方法注射用水純純化化水經蒸餾餾滅菌注射用用水注注射射用水按注注射劑生產產工藝制備備2、修訂后后質量標準準增二項檢檢查電導率檢查查新增增附錄用于于檢查各種種陰陽離子子的污染程程度總有機碳檢檢查控控制有機污污染（有機機小分子、、微生物））修訂附錄：：（1）除控控制水中TOC外，，增加了對對制水系統統的流程監監控作用（2）對TOC測量量的各種原原理和方法法不作任何何褒貶，只只強調技術術要求四、主要增增訂項目內內容a、能區分分水中的有有機碳與無無機碳，并并能排除無無機碳的干擾b、應滿足足系統適用用性試驗要要求85%＜（（rss-rw）/（rs-rw）×100＜115%c、具有足足夠的靈敏敏度（0.05mg/L）（3）TOC測量的的意義控控制化學學污染與微微生物污染染ATOCmeasurementisnotareplacementtestforendotoxinormicrobiologicalcontrol.Whiletherecanbeaqualitativerelationshipbetweenafoodsouce(TOC)andmicrobiologicalactivity.thereisnodirectnumericalcorrelation.五、主要修修訂項目內內容紫外-可見見分光光度度法1、波長校校正增增加了高氯氯酸鈥溶液液的校正（（以10%高氯酸為溶溶劑，配制制含4%氧氧化鈥的溶溶液）λmaxnm：241.13，278.10，287.18，333.44，，345.47，361.31，416.28，，451.30，485.29，536.64，640.52nm。2、波長允允差紫紫外區±±1nm500nm±±2nm700nm±±4.8nm五、主要修修訂項目內內容紅外光譜1、原料藥藥鑒別遇遇多晶干干擾（1）按規規定對樣品品進行預處處理（重結結晶與干燥燥）（2）采用用對照品平平行操作（3）采用用溶液法2、制劑鑒鑒別（1）提取取（溶劑的的選擇）輔料無干擾擾，晶型不不變直直接接與標準光光譜比對輔料無干擾擾，晶型有有變與與對對照品同法法處理后比比對輔料有干擾擾，晶型不不變在在指指紋區選擇擇3～5個個特征譜帶帶波數允差為為0.5%輔料有干擾擾，晶型有有變不不宜宜采用紅外外鑒別五、主要修修訂項目內內容3、多組份份原料藥的的鑒別可可借鑒制劑劑鑒別的方法4、混晶中中無效或低低效晶型的的限度控制制采用基線密密度法計算算指定譜帶帶的吸光度度后再計算各晶晶型的相對對含量（甲甲苯咪唑和和棕櫚氯霉素））五、主要修修訂項目內內容高效液相色色譜法1、色譜柱柱（1）常用用色譜柱填填料粒徑3～10μm（2）微徑徑柱填料粒粒徑約約2μm（UPLC或UFLC）硬件須匹配配色譜條件可可適當調整整以品種正文文規定條件件的測定結結果為準2、柱溫（1）通常常為室溫（2）以硅硅膠為載體體的普通色色譜柱，最最高使用溫溫度不得超超過60℃，（（HTLC）五、主要修修訂項目內內容3、有些色色譜條件可可適當調整整，但流動動相比例的的調整有明明確規定。組分比比例較低者者（＜50%）相對對于自身的的改變量不不超過±30%，相當當于總量的的改變量不不超過±10%。如如±30%的的相對改變變量超過總總量的10%時，則則以后者為為準。4、系統適適用性試驗驗（1）理論論板數nn=16（（））2或n=5.54（））2（2）分離離度R（關關鍵指標））R=2或或R=5、拖尾因因子必必要要時，應規規定拖尾因因子五、主要修修訂項目內內容pH值測定定法1、pH的的含義pH=-logaH+2、pH值值的測定pH=pHs+（E-Es）/RR=0.05916+0.000198（t-25℃））影響pH值值測定的因因素表觀pH值值3、弱緩沖沖液的pH測定除除另有規規定外，按按下法測定定先用苯二甲甲酸鹽緩沖沖液（pH4.01）校正儀儀器，1min內pH改變＜＜0.05時讀數，，再用硼砂砂緩沖液（（pH9.18）校校正儀器，1min內內pH改變變＜0.05時讀數數，取二次次讀數的平均值。4、水的pH值測定定加KCl適量量（由制藥藥用水正文文自行規定定）五、主要修修訂項目內內容電位滴定1、作圖法法零階E～V曲曲線突躍部部的中點或或拐點所對應的滴定定液體積一階導數一一級微微商（△E/△V））的極值所對應的滴滴定液體積積二階導數二二級微微商（△2E/△V2）等于零時所對應應的滴定液液體積五、主要修修訂項目內內容2、計算法法二階導數法法較一階導導數法更準準確，故最最常用采用線性內內插法V0=V+△△V式中V0：終點時的的滴定液體體積a：二級微微商為零前前的二級微微商值b：二級微微商為零后后的二級微微商值V：：二二級級微微商商為為a時時的的滴滴定定液液體體積積V0=V+(a/a+b)△△V=34.30+[1100/(1100+3600)]××0.10=34.32mlV（ml）E(mv)△E△V△E/△V△2E/△V233.00405100.402533.404153370.203533.604225090.204533.8043175120.206034.00443400120.1012034.10455300150.1015034.204702900440.1044034.305141100550.1055034.40569-3600190.1019034.50588-800110.1011034.60599-40070.107034.70606五、、主主要要修修訂訂項項目目內內容容不溶溶性性微微粒粒檢檢查查法法1、、應應用用對對象象由由溶溶液液型型靜靜脈脈注注射射液液擴擴大大至至溶溶液液型型靜靜脈脈注注射射液，，注注射射用用無無菌菌粉粉末末、、注注射射用用濃濃溶溶液液及及注注射射用用無無菌菌原原料料藥2、、統統一一了了操操作作方方法法（1））取取樣樣體體積積大大于于5ml取取5ml小于于5ml根根據據實實際際裝裝量量取取或或合合并并成成不不少少于于25ml，，每每次取取5ml（2））有有效效讀讀數數不不少少于于3個個，，取取平平均均值值計計算算3、、儀儀器器校校正正（1））標標準準粒粒子子10μμm相相對對標標準準偏偏差差不不大大于于5%（2））8μm與與10μm或或10μμm與與12μμm兩兩個個通通道道的的差差值值計計數數≥68%10μm通通道道的的累累計計計計數數五、、主主要要修修訂訂項項目目內內容容可見見異異物物檢檢查查法法1、、合合并并原原附附錄錄ⅨⅨH及及《《可可見見異異物物檢檢查查法法補補充充規定定》》2、、10ml及及以以下下規規格格，，每每次次手手持持不不超超過過2支支3、、目目視視檢檢測測時時間間不不超超過過20秒秒4、、所所檢檢樣樣品品必必須須系系隨隨機機抽抽取取五、、主主要要修修訂訂項項目目內內容容滲透透壓壓摩摩爾爾濃濃度度測測定定法法1、、供供試試溶溶液液的的濃濃度度（1））由由儀儀器器可可測測定定范范圍圍改改為為不不大大于于700mOsmol/㎏㎏（2））經經稀稀釋釋的的供供試試液液，，其其滲滲透透壓壓摩摩爾爾濃濃度度不不能能簡單單地地用用實實測測值值乘乘以以稀稀釋釋倍倍數數表表示示，，而而應應將實實測測值值和和稀稀釋釋倍倍數數完完整整表表述述2、、擴擴大大了了應應用用范范圍圍，，在在制制劑劑通通則則的的注注射射劑劑和和眼眼用用制劑劑項項下下有有明明確確規規定定。。3、、各各類類制制劑劑的的滲滲透透壓壓摩摩爾爾濃濃度度范范圍圍暫暫不不作作統統一一規規定，，原原則則要要求求與與血血液液等等滲滲或或接接近近等等滲滲（（285～～310mOsmol/㎏㎏））五、、主主要要修修訂訂項項目目內內容容酸敗敗度度檢檢查查法法羰基基值值的的原原計計算算公公式式有有誤誤羰基基值值=1、、854的的各各種種醛醛的的2,4-二二硝硝基基苯苯腙腙的的ε，，而而不不是是mεε2、、V1供試試品品稀稀釋釋總總體體積積V2測定定用用供供試試品品稀稀釋釋液液體體積積25ml5ml25ml3、、修改改為為羰基基值值=S六、、評評價價與與展展望望1、、新新版版藥藥典典就就采采用用的的技技術術手手段段而而言言，，已已完完全全實實現現與與國國際際接接軌；；各各附附錄錄的的技技術術要要求求也也已已達達到到或或接接近近國國際際水水平平2、、農農藥藥殘殘留留量量測測定定法法與與重重金金屬屬檢檢查查法法的的增增、、修修訂訂使使中中藥藥安安全性性檢檢查查的的技技術術水水準準得得以以大大大大提提升升，，不不僅僅實實現現了了方方法法學學與國國際際接接軌軌，，而而且且所所涉涉及及的的農農藥藥品品種種和和重重金金屬屬種種類類也也涵涵蓋了了國國際際上上主主要要控控制制的的品品種種3、、總總有有機機碳碳和和電電導導率率檢檢查查法法的的增增修修訂訂以以及及在在制制藥藥用用水水質質量量標準準中中的的實實施施，，使使制制藥藥用用水水的的化化學學污污染染與與微微生生物物污污染染得得以有有效效控控制制4、、PCR擴擴增增技技術術在在中中藥藥鑒鑒別別中中的的應應用用六、、評評價價與與展展望望5、、離離子子色色譜譜在在重重金金屬屬的的形形態態與與價價態態分分析析以以及及氨基基酸酸分分析析中中的的應應用用6、、溶溶出出度度的的計計量量法法判判定定7、、重重量量（（裝裝量量））差差異異的的計計量量法法判判定定8、、滲滲透透壓壓摩摩爾爾濃濃度度用用于于中中藥藥注注射射劑劑的的檢檢查查9、、新新技技術術新新方方法法在在品品種種各各論論中中的的推推廣廣應應用用附一一農藥藥殘殘留留量量測測定定法法1、、方方法法學學由由單單一一GC法法擴擴大大為為GC、、HPCL、、GC/MS和和LC/MS2、、農農藥藥品品種種由由24種種（（其其中中有有機機氯氯9、、擬擬除除蟲蟲菊菊酯酯3和和有有機機磷12））擴擴充充為為色色譜譜法法124種種（（其其中中有有機機氯氯和和擬擬除除蟲蟲菊菊57、、有機機磷磷54和和氨氨基基甲甲酸酸酯酯13）），，按按色色-質質聯聯用用法法統統計計則則為為128種種。。3、、測測定定方方法法分分兩兩個個層層次次：：一為為色色譜譜法法（（GC、、HPLC））方法法包包括括樣樣品品前前處處理理（（提提取取、、凈凈化化））、、色色譜譜測測定定、、色譜譜驗驗證證和和質質譜譜確確證證二為為色色-質質聯聯機機法法（（GC/MS、、LC/MS））方法法包包括括樣樣品品前前處處理理（（提提取取、、凈凈化化））、、色色-質質聯聯機機測測定定附二二溶出出度度與與釋釋放放度度測測定定法法1、、合合并并溶溶出出度度與與釋釋放放度度測測定定法法兩兩個個附附錄錄2、、新新增增流流池池法法3、、溶溶出出介介質質體體積積刪刪去去900ml的的規規定定，，通通常常為為500～1000ml，，由正正文自自行規規定4