常用消毒劑及其效果評價方法

中國食品藥品檢驗所

主要內容

前言概念具體實例前言

藥品生產中哪些環節可能有微生物分布前言有哪些控制微生物污染的策略前言策略一：空氣凈化系統及良好的驗證程序策略二：工藝用水系統及良好的水系統消毒驗證程序策略三：合適的人員和物件控制措施策略四：選擇合適的消毒滅菌劑并驗證消毒滅菌效果

必要性：盡管生物潔凈室采用了空氣潔凈技術，人員和物件都有了良好的控制措施，但是仍然不能很自信地認為微生物污染就能夠得到較好的控制。前言前言

必要性：對無菌生產區域進行徹底的消毒，是一項十分復雜的技術，但是制藥企業并沒有像對待終端滅菌那樣去重視消毒技術，因此很有必要對消毒技術所包含的消毒劑選擇以及消毒條件的確定等方法提供給制藥企業，以利于對無菌生產區域的微生物進行有效的控制。

概念消毒是指減少微生物的數量，使之達到安全或相對安全的水平，而與使用規定和使用目的相符合。滅菌是指殺滅或者不活化所有的微生物生命形式，它與消毒的區別在于滅菌的概念是絕對的。概念

理想的消毒劑應該是：能廣譜地殺滅微生物對人體無毒無腐蝕性，對設備無污染具有洗滌劑作用具有穩定性作用迅速不會因為有機物的存在而失去活性能產生所期望的后效作用廉價概念

消毒劑的使用頻率：

應重視消毒劑的交替使用。由于沒有一種消毒劑是完全理想的，因此有必要在實際工作中使用兩種以上的消毒劑。交替使用在理論上有利于防止形成相同環境的分離菌或抑制細菌的適應性。交替使用的頻率可固定一個周期。概念制藥工業常用的消毒劑主要有：醇類酚類季胺鹽類醛類過氧化物氯化物及次氯酸鹽概念醇類：使用歷史悠久，乙醇有幾百年的歷史；殺菌機制是使微生物蛋白質脫水變性；需要配制成一定濃度的水溶液才具有殺菌效果（60％～70％）（v/v）；支鏈醇的效果強于直鏈醇，因此異丙醇的效果較乙醇好；優點是使用之后無殘留；缺點是殺菌效力不強，對細菌芽孢和真菌孢子無效概念酚類：是目前使用的主要消毒劑種類（占50％）；抑菌譜廣，對G+和G－細菌及真菌均有殺傷作用；適宜用水或乙醇的水溶液配制；有效濃度在400ppm到1300ppm；對芽孢作用不強，不能用于殺芽孢；對有機物有耐受性；會產生殘留，但能被生物降解；制藥行業多使用酸性和堿性酚類消毒劑，如LpHst和VespheneIIse；適用于消毒地面、墻壁以及不與藥品接觸的表面；概念季胺鹽類：在酸性或堿性環境中均能殺死細菌或真菌，在堿性條件下效力稍強；殺菌譜較窄，應和其他類型消毒劑搭配使用；殺菌效力會被肥皂、陰離子型去污劑和有機物鈍化，若配制用水中微生物含量高，則其消毒效力會被削弱；對G－菌殺傷力差，該類細菌會在消毒劑中存活并繁殖；不能殺滅芽孢和孢子；配制后3～4周即不穩定。概念過氧化物：液態用于消毒有百年的歷史；過氧化氫蒸氣（VPHP）替代醛類蒸氣進行氣霧型消毒是消毒技術領域的新發展；氣態的過氧化物也被用于隔離系統的消毒；濃度3～6％的過氧化氫溶液能殺死一般的細菌，濃度高于6％，能殺死細菌芽孢；過氧乙酸的殺菌能力高于過氧化氫，低溫下亦有很強的殺菌能力且無任何有毒殘留物；殺菌譜廣，對有機物無耐受能力，對某些金屬有腐蝕作用，因此不適用于銅和鋁合金類設備的消毒。概念

氯化物和次氯酸鹽：主要有二氧化氯和次氯酸鈉；二氧化氯用于動物設施、水處理系統以及冷卻用水塔的消毒處理；二氧化氯會破壞酚類化合物；二氧化氯比氯氣的殺芽孢能力更強；次氯酸鈉是殺滅芽孢和孢子最有效的消毒劑之一；次氯酸鈉的配制濃度通常為5％（稀釋度為1：10）濃度在1000～2000ppm之間的酸化次氯酸鈉是控制孢子的最佳氧化劑；對有機物無耐受性，液態不穩定。具體實例消毒方法

地面：使用已滅菌過的潔凈室專用拖把和酚類消毒劑或其它規定的消毒劑浸潤后，對地面進行消毒。消毒時應遵循從里到外的原則，將拖把按同一方向進行。

具體實例

墻面/門/傳遞窗的平臺：注意：消毒墻面時不要讓拖把頭觸及地面，以免將地面的污染物帶到墻面上；地面和墻面的清潔消毒工具應區分使用。具體實例

簾子：先用酚類消毒劑擦拭，待10分鐘后，再用70%異丙醇擦拭或浸泡去除酚類消毒劑殘留。具體實例

設備、傳送帶、容器具：消毒設備時，不包括與產品直接接觸的表面。對不銹鋼或塑制設備、容器具，取無菌的潔凈室專用布先用酚類消毒劑擦拭，帶10分鐘后，再用70%異丙醇擦拭或浸泡去除酚類消毒劑殘留。對銅制或鋁合金設備，取無菌的潔凈室專用布用70%異丙醇濕潤后；按照由里而外、從上到下的次序，對各部位進行消毒。具體實例

地漏：用70%異丙醇對外蓋、濾污網、地漏內側噴灑消毒，倒入地面消毒劑（以地漏內充滿為止），以隔斷潔凈室內空氣和排水管道內廢氣相通，然后將外蓋蓋回，并做好記錄。保持地漏消毒時間不少于10分鐘，即10分鐘后方可排水至地漏。清潔人員清洗前后，在雙手未消毒或手套未更換前，應注意不與周圍環境中的與清洗無關的物體接觸，以免污染環境。具體實例

清潔消毒程序應遵循以下原則

：不同級別，應從高級別向低級別進行清潔；同一級別，應從最干凈的地方開始，然后往相對臟的地方進行；先墻面，再設備（如有），最后地面。具體實例

消毒劑使用中的注意點

：對于一些特殊房間進行消毒時，會同時使用兩種不同的消毒劑，注意消毒劑切換時，使用無菌水或70%異丙醇清潔一遍以清除殘留；消毒劑的使用需經效果驗證后方可使用；消毒劑應輪換使用，制定消毒劑定期輪換使用表；當環境監控的結果出現偏差時，因重新評估目前使用的消毒劑，必要時更換消毒劑的品種以及調整消毒劑的使用周期。具體實例

消毒劑的配制應注意的問題

：使用純化水或注射用水配制消毒劑；不同種類的消毒劑過濾不得使用同一根濾芯；對每種消毒劑的質量應定期進行檢測；配制人員在配制過程中注意自身防護。具體實例

消毒劑的驗證驗證原則：微生物室對新的消毒劑必須進行消毒性能的驗證實驗，驗證實驗應包括實驗室挑戰實驗和現場挑戰實驗，驗證合格后該消毒劑方可使用。驗證的時間點為消毒劑有效期內最后一天。具體實例

消毒劑的驗證挑戰菌的選擇：消毒劑消毒性能驗證實驗中所用的挑戰菌一般根據消毒劑的消毒性能選擇法規上要求的典型標準菌株和從環境、水及產品中分離出來的典型菌。具體實例

消毒劑的驗證

殘留消毒劑的去除：在消毒劑消毒性能驗證實驗中，有一關鍵的操作就是在消毒劑與菌液作用至規定消毒時間后，要求立即終止殘留消毒劑的繼續作用，以便準確檢測出消毒體系中殘留存活的微生物及數量，因為消毒體系中殘留的消毒劑可能對微生物的生長繁殖具有一定抑制作用，從而導致對殺菌效果偏高的錯誤判斷，甚至產生假陰性的結果。一般去除殘留消毒劑的方法有化學中和法、過濾沖洗法和稀釋法。具體實例

消毒劑的驗證

過濾沖洗法：第一組：消毒劑+菌懸液（觀察消毒劑對試驗菌有無殺滅或抑制作用）；第二組：（消毒劑+菌懸液）+過濾沖洗法處理（觀察用過濾沖洗法處理后，受到消毒劑作用后的試驗菌是否能恢復生長）；第三組：（菌懸液+0.9%NaCl溶液）+過濾沖洗法處理（觀察過濾沖洗法處理是否影響試驗菌的生長數量）；第四組：菌懸液（作為菌懸液陽性對照組）。具體實例

消毒劑的驗證可接受的標準：第一組應無菌或僅有極少數菌生長；第二組有較第一組多但較第三、四組少的試驗菌生長；第三、四組的微生物數量應根據菌懸液的濃度落在一定的范圍之內，且第三組較第四組的回收率應滿足要求。

具體實例

消毒劑的驗證實驗室挑戰實驗：實驗室挑戰實驗是在實驗室內以菌懸液定量法來評價消毒劑的殺菌效果。具體實例

消毒劑的驗證實驗室挑戰實驗：試驗組（第二組）陽性對照組（第三組）陰性對照組對數減少值（LRV）具體實例

消毒劑的驗證現場挑戰實驗：載體浸泡殺菌試驗：是在實驗室內模擬消毒劑對現場載體的定量殺菌試驗。現場消毒鑒定試驗：是在現場鑒定消毒劑對物體表面自然菌的殺滅作用。具體實例

消毒劑的驗證載體浸泡殺菌試驗：菌片的制備消毒試驗中使用的菌片是以菌液滴加于載體上制成的，載體應根據消毒對象選擇，常用的有不銹鋼、玻璃、塑膠、地板等。具體實例

消毒劑的驗證載體浸泡殺菌試驗：試驗組陽性對照組陰性對照組

具體實例

消毒劑的驗證現場消毒鑒定試驗：Swab取樣（棉簽法）