?生物化學實驗?(精)?生物化學實驗?(精)?生物化學實驗?(精)?生物化學實驗?講課方案湖南文理學院生命科學學院學院生化與分子生物學教研組實驗一蛋白質的性質實驗〔1〕—蛋白質和氨基酸的呈色反應授目：蛋白的性〔1〕——蛋白和氨基酸的呈色反〔3學〕授象：生科、學、科授教：講課目及根本要求：1、認識蛋白的根本構位及主要接方式。2、認識某些蛋白和氨基酸的呈色反原理。3、學幾種常的定蛋白和氨基酸的方法。講課內容大綱及分派：1、原理解：12分?雙反的原理?三反的原理?黃色反的原理?坂口反的原理?考斯亮反的原理2、與器械2分3、步解：10分4、。2分講課重點及點：1、雙反的原理。2、蛋白、氨基酸與水合三的色反。講課方法：采納啟式講課，合理，步行分析并于適合示范。講課手段〔掛、幻燈、多媒體?等〕：采納板等手段行講課。使用的教材及參照顧：1、生物化學指，自。2、基生物化學，高等教育第一版社，王秀奇主，第二版，2003年。思慮：1、假如蛋白水解后雙反呈陰性，可以水解反程度作出什么的推？2、三反的陽性果何色？能否用三反靠譜定蛋白的存在？3、考斯亮G-250法定蛋白含量的原理是什么？4、怎樣正確使用分光光度？5、定蛋白含量有哪些方法，定原理有哪些不同樣？本元講課〔講課的主要、見效、存在的、改舉措等〕1、合理內容述內容，見效好。2、根本操作范，學生養成優秀的，擁有扎的技術。實驗二蛋白質的性質實驗〔2〕—蛋白質等電點的測定和積淀反應授目：蛋白的性〔

2〕——蛋白等點的定和積淀反〔

3學〕授象：生科、學、科授教：講課目及根本要求：1、認識蛋白的兩性解離性。2、學定蛋白等點的一種方法。3、加深蛋白膠體溶液定要素的。4、認識積淀蛋白的幾種方法及其妄圖。5、認識蛋白性與積淀的關系。講課內容大綱及分派：1、原理解：?蛋白的兩性解離性?蛋白等點的見解

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分?蛋白溶解度最低的溶液pH其等點定蛋白水膠體粒的要素蛋白積淀反的型2、操作解：10分蛋白的析重金屬離子積淀蛋白某些有機酸積淀蛋白有機溶積淀蛋白乙醇惹起的性與積淀3、。2分講課重點及點：1、定蛋白水膠體粒的要素。2、蛋白性與積淀的關系。講課方法：采納啟式講課，合理，步行分析并于適合示范。講課手段〔掛、幻燈、多媒體?等〕：板，PPT。使用的教材及參照顧：1、生物化學指，自2、基生物化學，高等教育第一版社，王秀奇主，第二版，2003年思慮：1、定蛋白水膠體粒的要素有哪些？2、蛋白性與積淀的關系。3、解蛋白兩性反中色及積淀化的原由。4、方法定蛋白等點的原理是什么？本元講課〔講課的主要、見效、存在的、改舉措等〕1、合理內容述內容，見效好。2、根本操作范，培育學生象的察和果的思慮。實驗三牛乳中蛋白質的提取與判斷講課題目：牛乳中蛋白質的提取與判斷〔3學時〕講課對象：生科、農學、動科專業講課教師：講課目的及根本要求1、學習從牛乳中制備酪蛋白的原理和方法。講課內容大綱實時間分派1、實驗原理解說：8分鐘蛋白質在其等電點pH溶液中溶解度降底。依據這個原理，將牛乳的pH調整至4.8，即酪蛋白的等電點時，酪蛋白即積淀出來。用乙醇除掉酪蛋白積淀中不溶于水的脂肪，獲得純的酪蛋白所得酪蛋白的定性判斷2、實驗條件及步驟解說：7分鐘酪蛋白的制備酪蛋白的性質判斷乳清中可凝結性蛋白質的判斷講課重點及難點：酪蛋白的制備。講課方法：1、聯合理論實質，深入淺出。2、實驗操作過程給于示教。講課手段〔掛圖、幻燈、多媒體??等〕板書，PPT。使用的教材及參照資料1、生物化學實驗指導，自編講義2、基礎生物化學實驗，高等教育第一版社，王秀奇主編，第二版，2003年思慮題：1、牛乳中制備酪蛋白的原理和方法。本單元講課總結〔講課的主要經驗、見效、存在問題、改進舉措等〕1、實驗內容聯合理論內容進行表達，見效較好。2、重申實驗根本操作標準，讓學生養成優秀的實驗習慣，擁有扎實的實驗技術。實驗四氨基酸的分別判斷——紙層析法講課題目：氨基酸的分別判斷——紙層析法〔講課對象：生科、農學、動科專業講課教師：講課目的及根本要求

3學時〕經過氨基酸的分別，學習紙層析法的根本源理及操作方法。講課內容大綱實時間分派1、實驗原理的說明10分鐘紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分派層析法層析溶劑由有機溶劑和水構成?物質被分別后在紙層析圖譜上的地點是用Rf值〔比移〕來表示在必定的條件下某種物質的Rf值是常數。Rf值的大小與物質的構造、性質、溶劑系統、層析濾紙的質量和層析溫度等要素相關。2、實驗操作解說：5分鐘講課重點及難點、擴展劑的制備。2、氨基酸樣品的點樣。講課方法理論與實質相聯合，深入淺出，培育學生綜合運用所學課程知識。實驗過程中向學生提出問題，讓學生在實驗中察看思慮，提升學生的分析問題，解決問題的能力。講課手段〔掛圖、幻燈、多媒體..等〕板書，PPT，示教。使用的教材及參照資料、生物化學實驗指導，自編講義2、基礎生物化學實驗，高等教育第一版社，王秀奇主編，第二版，2003年思慮題：1、何謂Rf值？影響Rf值的主要要素是什么？2、層析缸中均衡溶劑的作用是什么？3、濾紙為何要在層析缸中開初懸空密封飽和30min？4、張開時為何要調理濾紙使溶劑前沿線平行于點樣線？5、實驗結果為何有時會產生拖尾、相鄰氨基酸分不開等異樣現象？本單元講課總結〔講課的主要經驗、見效、存在的問題、改進舉措等〕在實驗中向學生發問題，可加強學生的好奇心，關于理解實驗原理很有幫助。實驗五酶的特色〔設計型實驗〕講課題目：酶的特色〔設計型實驗〕〔6學時〕講課對象：生科、農學、動科專業講課教師：講課目的及根本要求1、加深對酶的性質的認識：本實驗由溫度對酶活力的影響；劑及控制；酶的專一性4組實驗構成。

PH對酶活力的影響；酶的激活2、學會設計并實行影響酶催化活性要素的實驗方案。講課內容大綱實時間分派1、實驗原理解說：

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分鐘酶的催化作用受溫度的影響。在最適溫度下，酶的反應速度最高。大部分動物酶的最適溫度為37-40℃，植物酶的最適溫度為50-60℃?酶的活力受環境pH的影響極為明顯。不同樣酶的最適pH值不同樣?酶的活性受活化劑或控制劑的影響?酶擁有高度的專一性，淀粉和蔗糖無還原性2、實驗設計方案解說：5分鐘講課重點及難點1、影響酶催化活性的要素。2、實驗方案設計及原理方法選擇。講課方法：聯合理論實質，深入淺出。實驗操作過程給于示教。講課手段〔掛圖、幻燈、多媒體??等〕多媒體，板書，繪圖，示教。使用的教材及參照資料1、生物化學實驗指導，自編講義2、基礎生物化學實驗，高等教育第一版社，王秀奇主編，第二版，2003年思慮題：1、實驗方法設計及選擇的原理和依據2、進行設計性實驗的經驗與意會3、什么是酶的最適溫度及其應妄圖義？4、什么是酶反應的最適pH？對酶活性有什么影響？5、什么是酶的活化劑？6、什么是酶的控制劑？與變性劑有何差別？本單元講課總結〔講課的主要經驗、見效、存在的問題、改進舉措等〕1、學生實驗聯合理論內容進行自行設計，表達實驗設計方法，見效較好。2、學生自己設計實驗方案，商討影響酶催化活性的要素，培育學生分析和解決實詰問題的能力，提升學生的主動性和創辦性，獲得能力的培育。實驗六酵母核糖核酸的分別及組分判斷講課題目：酵母核糖核酸的分別及組分判斷講課對象：生科、農學專業講課教師：

〔3學時〕講課目的及根本要求：認識核酸的組分，并掌握判斷核酸組分的方法。講課內容大綱實時間分派：1、實驗原理解說：10分鐘酵母核酸中RNA含量好多。RNA可溶于堿性溶液，在堿提取液中參加酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸積淀，由此即獲得RNA的粗制品。核糖核酸含有核糖、嘌呤堿、嘧啶堿和磷酸各組分。加硫酸煮沸可使其水解，從水解液中可以測出上述組分的存在。2、實驗操作解說：

5分鐘3、總結

2分鐘講課重點及難點：核酸組分判斷的實驗依據。講課方法：理論聯合實踐，深入淺出。實驗操作過程賞賜示教。講課手段：板書，PPT，示教。使用的教材及參照資料1、生物化學實驗指導，自編講義2、基礎生物化學實驗，高等教育第一版社，王秀奇

主編，第二版，

2003年思慮題：1、怎樣獲得高產量RNA的粗制品？2、現有三瓶未知溶液，它們分別為蛋白質、糖和RNA，采納什么試劑和方法判斷？〔自行設計簡單的實驗〕本單元講課總結：對學生的實驗預習、實驗紀律、實驗操作、實驗報告、實驗整理等環節進行督導，使學生養成優秀的實驗習慣，提升實驗技術。實驗七紫外分光光度法測定核酸的含量講課題目：紫外分光光度法測定核酸的含量〔3學時〕講課對象：生科、農學、動科專業講課教師：講課目的及根本要求1、認識紫外分光光度計的根本源理和使用方法。2、學慣用紫外分光光度法測定核酸含量的原理和操作方法。講課內容大綱實時間分派1、實驗原理解說：10分鐘?核酸、核苷酸及其衍生物都擁有共軛雙鍵系統，能汲取紫外光。RNA和DNA的紫外吸收巔峰在A260nm波優點。一般在A260波長下，每mL含1ugRNA溶液的光汲取值為0.020。故測定未知濃度RNA或DNA溶液A260nm波長的光汲取值即可計算出此中核酸的含量。此法操作簡單。假定樣品內混淆有大批的核苷酸或蛋白質等能汲取紫外光的物質，那么測定偏差較大，故應想法預除掉。2、實驗操作解說：5分鐘紫外分光光度計的使用講課重點及難點1、核酸的制備2、紫外分光光度計的使用講課方法：理論聯合實踐，深入淺出。實驗操作過程賞賜示教。講課手段〔掛圖、幻燈、多媒體??等〕板書，PPT，示教。使用的教材及參照資料1、生物化學實驗指導，自編講義2、基礎生物化學實驗，高等教育第一版社，王秀奇主編，第二版，2003年思慮題或作業：1、紫外分光光度計的使用方法和操作重點？2、假定樣品中含有蛋白質和核苷酸等雜質，怎樣除去攪亂？本單元講課總結〔講課的主要經驗、見效、存在的問題、改進舉措等〕1、重申實驗根本操作標準，讓學生養成優秀的實驗習慣，擁有扎實的實驗技術。實驗八

維生素

C的定量測定講課題目：維生素C的定量測定講課對象：生科、農學、動科專業講課教師：

〔3學時〕講課目的及根本要求1、學習維生素C定量測定法的原理和方法。2、進一步熟習、掌握微量約定法的根本操作技術。講課內容大綱實時間分派1、實驗原理解說：8分鐘測定維生素C〔抗壞血酸〕的化學方法，一般是依據它的還原性。本實驗即利用維生素C的這一性質，使其與2,6-二氯酚靛酚作用。2,6-二氯酚靛酚鈉鹽的水溶液呈藍色，在酸性環境中為玫瑰色，當其被還原時，那么脫色。2、實驗操作解說：

5分鐘講課重點及難點1、含維生素C的樣品提取液的制備2、嫻熟掌握滴定操作講課方法理論聯合實踐，深入淺出。實驗操作過程賞賜示教。講課手段〔幻燈、多媒體等〕板書，PPT，示教。使用的教材及參照資料1、生物化學實驗指導，自編講義2、基礎生物化學實驗，高等教育第一版社，王秀奇主編，第二版，2003年思慮題：試述本實驗介紹的2,6-二氯酚靛酚滴定法的優弊端。本單元講課總結〔講課的主要經驗、見效、存在問題、改進舉措等〕1、實驗內容聯合理論內容進行表達，見效較好。2、重申實驗根本操作標準，讓學生養成優秀的實驗習慣，擁有扎實的實驗技術。實驗九

血糖的定量測定—

GOD-PAP法講課題目：血糖的定量測定—GOD-PAP法講課對象：生科、動科專業講課教師：講課目的及根本要求學慣用GOD-PAP法測定血糖含量。

〔3學時〕講課內容大綱實時間分派1、實驗原理解說：8分鐘動物血液中的糖主假如葡萄糖，正常狀況下，其含量較恒定。健康家兔的血糖水平為80-120mg/dL。GOD-PAP法，即過氧化物酶-抗過氧化物酶法是近幾年臨床血糖定量測定廣泛采納的方法。該法測定血糖依據的酶反應為：葡萄糖O2H2O葡萄糖氧化酶〔GOD〕葡萄糖酸＋H2O22H2O24-氨基安替比林＋酚過氧化物酶〔POD〕醌亞胺＋4H2O醌亞胺在A480nm~A550nm波長有最大汲取，所產生顏色的深淺與血清中葡萄糖的量成正比。2、實驗操作解說：5分鐘講課重點及難點：樣品中葡萄糖濃度的計算方法。講課方法：1、聯合理論實質，深入淺出。2、實驗操作過程給于示教。講課手段〔掛圖、幻燈、多媒體??等〕板書，PPT，示教。使用的教材及參照資料1、生物化學實驗指導，自編講義2、基礎生物化學實驗，高等教育第一版社，王秀奇主編，第二版，2003年思慮題：1、制取樣品時應主要什么？2、體液血糖測定有哪些方法本單元講課總結〔講課的主要經驗、見效、存在問題、改進舉措等〕1、實驗內容聯合理論內容進行表達，見效較好。2、重申實驗根本操作標準，讓學生養成優秀的實驗習慣，擁有扎實的實驗技術。實驗十DNA的瓊脂糖凝膠電泳講課題目：DNA的瓊脂糖凝膠電泳〔3學時〕講課對象：生科、農學、動科專業講課教師：講課目的及根本要求1、認識瓊脂糖凝膠電泳的原理和使用范圍。2、認識瓊脂糖凝膠電泳的操作技術。講課內容大綱實時間分派1、實驗原理解說：10分鐘?DNA片斷瓊脂糖凝膠電泳的原理與蛋白質的電泳原理根真同樣，DNA分子在高于其等電點的pH溶液中帶負電荷，在電場中向正極挪動。DNA分子在電場中經過介質而泳動，除電荷效應外，凝膠介質還有分子篩效應，與分子大小及假想相關。關于線形DNA分子，其電場中的遷徙率與其分子量的對數值成反比。在凝膠中參加少許溴化乙錠，其分子可插入DNA的堿基之間，形成一種光絡合物，在254~365nm波長紫外光照耀下，表現桔紅色的熒光，所以可對分其他DNA進行檢測。電泳時以溴酚藍及二甲苯氰〔藍〕作為雙色電泳指示劑。其目的有：①增大樣品密度，保證DNA平均進入樣品孔內；②使樣品表現顏色，認識樣品泳動狀況，使操作更加便利；③以×TBE做電泳液時溴酚藍的泳動率約與長300bp的雙鏈DNA同樣，二甲苯氰〔藍〕那么與4kb的DNA同樣。2、實驗操作解說：5分鐘?瓊脂糖凝膠的制備?樣品配制與加樣?電泳?察看和攝影3、凝膠成像系統的使用

2分鐘講課重點及難點1、利用電泳方法分別核酸的原理。2、怎樣使用電泳儀和水平式電泳槽。3、凝膠的制備和加樣操作。講課方法聯合理論實質，深入淺出。實驗操作過程給于示教和個別指導。講課手段〔多媒體、錄像等〕PPT，錄像，示教。使用的教材及參照資料1、生物化學實驗指導，自編講義2、基礎生物化學實驗，高等教育第一版社，王秀奇主編，第二版，2003年思慮題：1、DNA在電場中的遷徙率取決于哪些要素？2、瓊脂糖凝膠有哪些本卷須知？本單元講課總結〔講課的主要經驗、見效、存在的問題、改進舉措等〕第一讓學生觀看錄像，要修業生注意電泳技術的根本源理和根本操作。在此基礎上，學生進入實驗操作階段。實驗十一蛋白質的透析講課題目：蛋白質的透析〔3學時〕講課對象：生科專業講課教師：講課目的及根本要求學習透析的根本源理和操作講課內容大綱實時間分派1、實驗原理解說：3分鐘蛋白質是大分子物質，它不可以透過透析膜而小分子物質可以自由透過。在分別提純蛋白質的過程中，常利用透析的方法使蛋白質與此中夾雜的小分子物質分開。2、實驗操作解說：5分鐘用蛋白質溶液作雙縮脲反應向火棉膠制成的透析管中裝人10~15mL蛋白質溶液并放在盛有蒸餾水的燒杯中檢查氯離子的存在。做雙縮脲反應，檢查能否有蛋白質存在。不停改換燒杯中的蒸餾水以加快透析過程。講課重點及難點火棉膠制成透析管講課方法理論聯合實踐，深入淺出。實驗操作過程賞賜示教。講課手段〔幻燈、多媒體等〕板書，示教。使用的教材及參照資料1、生物化學實驗指導，自編講義2、基礎生物化學實驗，高等教育第一版社，王秀奇主編，第二版，2003年思慮題：蛋白質透析的操作重點及主要事項。本單元講課總結〔講課的主要經驗、見效、存在問題、改進舉措等〕1、實驗內容聯合理論內容進行表達，見效較好。2、重申實驗根本操作標準，讓學生養成優秀的實驗習慣，擁有扎實的實驗技術。實驗十二SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分別細菌蛋白質講課題目：SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分別細