如何科學、客觀地制訂溶出度試驗質(zhì)量標準謝風上市品品驗郵：

上市東區(qū)衡1500號郵：xiemufeng@摘要：本詳盡闡述了如何科學、客觀地擬定質(zhì)量標準中溶出度試驗各參數(shù)，并廓清了擬定出點和控制要素，為如何使該試驗法的擬定體現(xiàn)出制劑內(nèi)在品質(zhì)提供了佐證與參考。關鍵詞：溶出度試驗法；擬定參數(shù)溶出度試驗作“價固體制劑內(nèi)在品質(zhì)的靈魂與核”，隨著人們對該項技術的不斷研究與深入，對其認識與理解亦在不斷發(fā)展與變化著[1,2,3]。現(xiàn)今，該試驗不僅具有為建立體內(nèi)外相關性而設立的宗旨，且還已成為證明藥物體內(nèi)釋放特性的一種簡單、廉價而不失嚴謹?shù)膶嶒炇覚z測方法。尤其“在多種值溶出介質(zhì)中溶出曲線（本文的“溶出度曲線”包涵釋放曲線，以下同）的測定（以及比對）更是成為“剖析”和肢解固體制劑內(nèi)在品質(zhì)一種擘肌分理、抽絲剝繭的重要手段；成為固體制劑內(nèi)在品質(zhì)呈現(xiàn)于外在的一種“表象”“射”體成為在仿制藥途同歸”的研發(fā)進程中、提高生物等效(BE)試驗成功率所歷經(jīng)“必由之路”，甚至成為該品種在其工藝與處方完全成熟持續(xù)進行多批大規(guī)模生產(chǎn)后所擁有的特定特征“指紋圖譜”。總之“條溶出曲線的測定”可在與固體制劑品質(zhì)相關的所有環(huán)節(jié)上均發(fā)揮出舉足輕重的作用。無論是研發(fā)仿制藥/創(chuàng)新藥是省級藥檢所在審核質(zhì)量標準草藥典標準提高/正、評價性抽驗、不同來源的藥品間品質(zhì)評價等各項工作，均涉及到在進行了大量深入的研究驗證后，最終應如何科學、客觀地制訂質(zhì)量標準中溶出度試驗法，即通過該法測得的結(jié)果能否充分反映出該產(chǎn)品所應具有的內(nèi)在優(yōu)良品質(zhì)、所應具有的良好體內(nèi)生物利用度以及品質(zhì)均一性，能否通過該試驗法的制訂促使企業(yè)進行深入的制劑工/處方研究與周而復始的品質(zhì)保證等等

[

。截止目前，關于如何制訂質(zhì)量標準中溶出度試驗法的文章尚未有發(fā)表。本人已撰寫發(fā)表多篇了有關溶出度試驗在藥物研發(fā)、質(zhì)控、內(nèi)在質(zhì)量評價等方面如何發(fā)揮作用的文章本篇將就本人工作經(jīng)驗與感悟，詳盡闡述如何制訂溶出度試驗質(zhì)量標準。一、針仿制藥

[6,7,8]

，無論是《藥品注冊管理辦法》中的三類新藥（已在國外上市銷售但尚未在國內(nèi)上市銷售1的藥品）還是六類新藥（已有國家藥品標準的原料藥或者制劑兩者唯一區(qū)別就是有“可參照的質(zhì)量標準”，但均請按照以下思路進行。1.既有質(zhì)量標準的可參性針對六類仿制藥，實驗者肯定會查詢到相關參考文獻，如各國藥典、國家藥監(jiān)局標準、進口質(zhì)量標準本橙皮書FDA公布的溶出曲線數(shù)據(jù)庫、日本仿制藥技術申報資料概要（采用醫(yī)薬品インタビューフォーム”在Google上收索即可，內(nèi)容僅為日文）等，但由于這些標準本身所具有的局限性、歷史性和利益性，因此絕不建議實驗者不經(jīng)對原研品的剖析（詳2~7內(nèi)容直接擷取，即便是國外藥典或進口質(zhì)量標準，制訂者也不應盲目迷信（詳見討論1家藥品審評中心自年起就反復提出“仿產(chǎn)品不是仿標準”宗旨的核心要素之一（對于口服固體制劑，還有一要素為“有關物質(zhì)”2.購買原研品六類仿制藥，均可購買到進口品或原研廠在國內(nèi)合資企業(yè)產(chǎn)品。三類新（其實也是仿制藥者必須想盡辦法購買來原研品可通過私人關系帶，或通過“世界藥房”網(wǎng)站、白求恩藥房”網(wǎng)站等中介，還可向國家藥監(jiān)局注冊司請一次性進口件（少量、僅用于研發(fā)）等多種方式。絕不應以購買不來為借口，“天馬行空、閉門造車”地進行處方開發(fā)與制劑工藝研究且購買時應盡可能獲取不同時間段的多個批號樣（如出廠不久的和臨近效期的將購買來的原研品作為0個月計，放入冰箱內(nèi)冷藏。對于研發(fā)者，強烈建議與仿制品同時進行個月穩(wěn)定性考核，每一時間點樣品取出后均放入冰箱冷藏，直至個月結(jié)束。首先測定最終時間點的多條溶出曲線（當然還有有關物質(zhì)測個月相比的變化情形，再酌情考慮是否需測定其他時間點樣品，從而根據(jù)原研品溶出曲線波動情況對自身仿制品的研發(fā)和品質(zhì)做出正確判斷與準確評估。3.采用多條溶出曲線“循漸進、絲剝繭”般剖析研品在進行溶出曲線測定前，一定要先進行以下三項工作3.1“pH-溶解度”曲線測定

[。取過量原料藥（可為預經(jīng)微粉化處理置支具塞試管中，分別加、…、溶出介質(zhì)適量，置℃水浴振蕩過夜，形成過飽和溶液，取出后濾過，取續(xù)濾液法測得溶解度，繪制曲線。對于難溶性藥物，對照品溶液可酌情采用純甲醇或純乙腈配制。2[[15]該曲線的繪制可提供眾多信息：如與X軸平行，說明各pH值溶解度幾近一致，由此可預測多條溶出曲線應重合；如曲線上有陡峭變化、甚至是有數(shù)量級差異，則可揭示多條溶出曲線形狀必會有所差異（即高低錯落低的那條曲線一定是溶解度最低的pH介質(zhì)，這為制劑研發(fā)方向提供了針對性與佐證素材。當出現(xiàn)主成分在某pH值介質(zhì)中極不穩(wěn)定、溶解后即迅速分解，無法測定的情況，則該介質(zhì)溶解度可不測定，其溶出曲線亦可免做。3.2值查詢與測定值的知曉也十分重要通過查詢或測定獲得定法可參照以下三篇文，12該值未涵蓋于四條標準溶出曲線pH值范圍，則研發(fā)時5~6溶出曲線就應測定該值所對映的pH值介質(zhì)或以上“值-溶解度曲線”上急劇變化的pH值，這些值溶出曲線的測定對于仿制制劑研發(fā)和曲線比對均具有十分重要的意義。3.3主成分在各溶介質(zhì)中穩(wěn)定性為獲得準確試驗數(shù)據(jù)，該驗證必不可少。建議取原料藥粉末配制的溶液即可，無需取樣品溶出液。3.4采用溶出曲線剖析”與肢解”原品本人已發(fā)表此篇文章，請詳見參考文獻[4.質(zhì)量標準中各參數(shù)的訂

[4,14]在進行了以上對原研品和仿制品多pH值溶出介質(zhì)中溶出曲線的測定后，才能科學客觀、合理全面地制訂質(zhì)量標準。具體闡述如下：4.1溶出介質(zhì)的選

速釋制首先應滿足在該介質(zhì)中最終溶出量達以上，然后可按下列情況分別選取。根據(jù)該藥物在體內(nèi)吸收主要消化道部位的生理pH（適用于一般情況能在一定程度上反映體內(nèi)外相關性的pH值（適用于創(chuàng)新藥最能體現(xiàn)不同來源制劑間彼此差異的pH值（適用于標準轉(zhuǎn)/藥典起草、尤適合于我國大量仿制藥存在情形最能反映生產(chǎn)工藝變化、偏差的pH值（適用于企業(yè)內(nèi)控標準，用于批間樣品品質(zhì)均一性的評價溶出曲線中最低的pH值（適用于企業(yè)內(nèi)控標準，用于應對國家市場檢查與監(jiān)督溶出數(shù)據(jù)精密度更佳的pH值（某些樣品在首選介質(zhì)中精密度不佳時、更換為精密度3[[16]更為理想的介質(zhì)）當多條溶出曲線重合時（各時間點溶出量相差不超過10.0%橙皮書》傾向首選“水其出發(fā)點為雖然水的pH和表面張力會因來源不同而改變且在試驗過程中也可能會因藥物影響或者溶解入二氧化碳使溶出行為發(fā)生變化，但考慮到發(fā)生上述可能性的概率較小，且可通過事先驗證予以探明，故秉承環(huán)保、提高試驗效率等出發(fā)點，質(zhì)量標準中首選水。而美國藥典鑒于以上問題的存在，傾向采用帶有值的介質(zhì)。筆者更傾向日本作法，因水的pH值范圍5.0~7.0被上述多條溶出曲線的pH所涵蓋。當多條溶出曲線不重合，則可根據(jù)上述各針對性酌情擬定。

腸溶制應規(guī)定酸中介質(zhì)(pH1.0~1.2)和堿中介質(zhì)(放量的測定。酸中釋放量的測定現(xiàn)今愈發(fā)傾向通過測得準確數(shù)據(jù)予以表達、而非肉眼觀察外觀形狀進行控（日本橙皮書皆采用此法規(guī)定2時不得過10%為防止藥物在年輕人體內(nèi)發(fā)生過量釋放，甚至在該階段可故意采用高轉(zhuǎn)速（如00以進一步探明藥物的內(nèi)在優(yōu)良品質(zhì)。如主成分溶出后在酸性介質(zhì)中不穩(wěn)定旋即降解，即便立即測定也無法準確評估時，建議測定溶出杯中剩余固體顆粒所含主成分量，隨后用測得百分含量減去剩余百分含量，再除以測得百分含量，即為酸中釋放百分量。現(xiàn)今，隨著市場上銷售的腸溶衣輔料已皆可在范圍內(nèi)包裹住藥片，使主成分釋放量合格，而經(jīng)研究表明：人體內(nèi)胃環(huán)境，隨年齡增長胃酸分泌逐漸減少（胃內(nèi)pH值范圍此再在范圍內(nèi)測定已顯得毫無意義故現(xiàn)今開始逐步測定pH4.5介質(zhì)，規(guī)定依然是不得過10%溶出量。英國藥典自2008年始，“奧美拉唑腸溶膠囊片”的制訂原則便是以此為依據(jù)，這樣的測定更有針對性和實用性，值得我們學習和借鑒！堿中釋放量同速釋制劑；但需注意的是：腸溶衣對紫外測定時常有干擾，故強烈建議采用紫外-兩點相減法或HPLC法，否則極易出現(xiàn)溶出量均值高于含量以上的情況。

緩控釋劑首先應滿足在該介質(zhì)中最終溶出量達以上。當體外多條釋放曲線重合時（酸中僅測定2小時即可議首選水(作介質(zhì)，既經(jīng)濟又方便。絕不建議采用酸性介質(zhì)，因任何人體內(nèi)的十二指腸至小腸消化道器官是不存在該值的也不建議參照人體內(nèi)消化器官的標準（6.8采用不同時段、不同溶出介質(zhì)（不斷調(diào)試）的費時費力方式、且此方式實驗誤差較大。當體外多條釋放曲線不重合時，建議選擇最終溶出量達以上的、最慢的那個pH值4[[4]介質(zhì)。

介質(zhì)中蛋白酶和胰白酶的入一般情況下，不建議溶出介質(zhì)中添加這些酶[5]。但如某些藥物必須飯后服用、且生物等效性試驗需在“進食”狀態(tài)下進行時則在仿制藥研發(fā)中必須進行“溶出介質(zhì)中分別添加胃蛋白酶和胰蛋白酶的比對研究”，此時質(zhì)量標準中亦應加入。另：當硬膠囊劑使用囊殼為明膠膠囊時，為避免產(chǎn)生交聯(lián)現(xiàn)象影響溶出，可也加入，但需進行驗證。4.2取樣時間點與度的訂

普通制以第一次出現(xiàn)溶出量均在85%以上兩時間點兩點溶出量差在5%內(nèi)即出現(xiàn)平臺期”前一時間點作為質(zhì)量標準中樣時間點并將該點溶出量減去15%為溶出限度。這就將“之前我們通常認為的溶出度取樣時間點常選擇溶出曲線拐點處后推10～分鐘

”的原則予以明確化和具體化，因為拐點處后的10～分鐘”即為溶出飽和平臺期”。由此便可推斷出：溶出限度一般僅有、、80%、四個數(shù)值。如第一時間點為20分鐘，由于其不為刻鐘的整數(shù)倍，一般提高至15鐘，但限度可僅減去。當出現(xiàn)采用50溶出曲線緩慢上升至60分鐘后才出現(xiàn)平臺（研究時需測定到分鐘）時，會出現(xiàn)取樣時間點過于滯后的情形，這不利于產(chǎn)品的日常檢驗。此時為提高試驗效率，可適當放寬參數(shù)（如加大轉(zhuǎn)速）或采用溶出更快的介質(zhì)，使60分鐘前出現(xiàn)平臺期，即不建議擬定分鐘后的取樣時間點。但前提是，這些調(diào)整不應弱化針對不同來源制劑間內(nèi)在品質(zhì)的區(qū)分力（如采用增加轉(zhuǎn)速方式”或無法立體內(nèi)外相關性介質(zhì)（更換的介質(zhì)也必須具有體內(nèi)外相關性的特質(zhì)）”。

緩控釋制劑應至少設定3時間點（服用方式一2）4個時間點（服用方式一1第一點為避免“突釋”應設定為試驗1~2小時后或溶出量相當于標示量時間點第二點是為考察藥品溶出特性，該限度應設定在溶出量約時間點；最后一點是為確保藥物溶出量超過80%間點。如擬定點，第二、三、四時間點的溶出量分別約為、60%溶出量。任何一點的擬定范圍均應勿超過標示含量的，且各點溶出限度交叉范圍建議勿超過5%，除非體內(nèi)特征可顯示出相應的可接受性和波動性。對于零級釋放產(chǎn)品，因其釋放曲線為“條直線故還應增加每小時釋放量的規(guī)定（即斜率規(guī)定“苯地平控釋片進口質(zhì)量標5準（拜耳出品）”中就有小時的嚴格規(guī)定。

治療窗窄藥物為防止“突釋”愈發(fā)傾向采用兩點法測定一可采用510鐘的第一點溶出量不得大于某一限度（以控制突釋二點規(guī)定一定時間內(nèi)溶出不得小于某一限度以保證溶出完”的作（《日本橙皮書中卡馬西平片擬定為分鐘不得過和分鐘不得少于70%二可采用緩控釋制劑擬定法第一點規(guī)定或分鐘時溶出量為一限度范圍而非一上限以保證其溶出曲線呈現(xiàn)“緩慢上升性美國藥典卡馬西平片規(guī)定分鐘釋放應30~50%，45鐘時不得少于該規(guī)定亦可有效防止處方中加入大量表面活性劑或增溶劑“投機取巧”作法。各國制訂的技術指導原則中收載的此類藥物清單如下：氨茶堿、茶堿、膽茶堿、雙羥丙茶堿、苯妥因鈉、丙戊酸、炔雌/孕酮制劑、地高辛、洋地黃毒甙、華法令鈉、甲磺酸異他林吸入氣霧劑、卡馬西平、可樂定透皮貼劑、磷酸丙吡胺、硫酸胍乙啶、硫酸奎尼丁、硫酸哌唑嗪、硫酸異丙腎上腺素、米諾地爾、撲米酮、碳酸鋰、鹽酸克林霉素、鹽酸可樂定、鹽酸普魯卡因胺、左甲狀腺素鈉、環(huán)孢霉素A、他克莫司、西羅莫、丙戊酸/丙戊酸鈉等。4.3裝置的選擇建議首選通用性強、耐用性好、廣泛普及的籃法與槳法。膠囊劑首選籃法、片劑首選槳法

[18]。對于不易采用籃法（如發(fā)生堵塞籃法孔隙、或樣品塌陷于藍底、或粘附于籃頂漂浮于液面的制劑，可考慮采用槳法、加沉降藍尤對于采用了粘附性較強輔料的緩釋制劑，極易發(fā)生試驗過程中始終粘附于溶出杯不同部位、而使溶出數(shù)據(jù)均一性較差的情況時，更推薦采用沉降藍絕不建議采用自制沉降裝置因其制作的不規(guī)范性會導致數(shù)據(jù)的難以重現(xiàn)性。不推薦使用非法定或非標準試驗裝置。如卻有必要采用，但應提供詳盡驗證資料和充足理由，并充分驗證其必要性與質(zhì)量可控性（即實驗室間的可操作性、耐受性和易重現(xiàn)性美國藥典第三七法決不能因價格昂貴而自行設計組裝且由于其現(xiàn)階段該儀器尚難以推廣和普及，故筆者建議勿采用。如經(jīng)典的籃法與槳法無法正確表達出該樣品體外溶出特征，可在此基礎上進行改裝，如針對栓劑或陰道制劑的體外溶出度研究與測定，即如此（詳見參照文獻[19,20]4.4轉(zhuǎn)速的擬定既有觀念錯誤6[[21]由于50的攪拌強度被看作與中老年人體胃腸道蠕動強度相當由于患者大多為中老人群，故首選該轉(zhuǎn)速。現(xiàn)今國內(nèi)仍存在一種普遍看法，認為槳板法50轉(zhuǎn)籃法/100，其實這是錯誤的。筆者在日本國家藥檢所進修期間，經(jīng)導師指教、并親自采USP溶出度校正片實驗驗證，結(jié)果為[：

最弱級：槳板法/轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)法/（樣品在籃內(nèi)）轉(zhuǎn)籃法100轉(zhuǎn)樣品在籃外、即沉于杯底）中級：槳板/75轉(zhuǎn)籃/轉(zhuǎn)樣品在籃內(nèi)槳板法/50轉(zhuǎn)（樣品置于沉降籃內(nèi)）最強級：槳板法/轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)樣品在籃內(nèi)槳板法/（樣品置于沉降籃內(nèi)猜測可能是當年我國引入溶出度試驗時將英文譯錯所致；截止目前已有不少同仁來電來函反映上式的正確性。當樣品置于沉降藍內(nèi)，在試驗過程中始終處于杯底，由此受到的外來渦旋力將大于樣品任意漂浮或停滯于杯中某處，故其級別比不置于沉降藍內(nèi)高出一級。需放寬試參數(shù)時不能隨意采用高于50轉(zhuǎn)速，因為這將極大地弱化對不同制劑處方溶出行為的區(qū)分力。對于有必要放寬溶出度試驗參數(shù)的情況分別考察轉(zhuǎn)速為75~100轉(zhuǎn)和加入表面活性劑兩種方式，以更好地建立起體內(nèi)外相關性和能區(qū)分不用來源制劑內(nèi)在品質(zhì)優(yōu)劣。目前傾向于采“提高轉(zhuǎn)速、加入表面活性”方式因?qū)τ谥欣夏昊颊撸m胃腸道蠕動較弱體內(nèi)存在膽堿類物質(zhì)用表面活性劑表達當樣品在杯底出現(xiàn)錐度堆積小山狀”時，則傾向加大轉(zhuǎn)速、而非加入表面活性劑方式。表面活性劑添加濃度研究應從％(w/v)起板、按25別逐步增加去“剖析”原研制劑（即逐步試驗0.01%、0.02%、、、0.5%、、和3.0%，9個濃度；另：配制溶出介質(zhì)、溶解表面活性劑以及無機鹽時，一定要采用加熱煮沸方式，切忌采用振搖或超聲建議采用3.0%上濃度。當兩級別間溶出曲線差異較為顯著時，則應適當增加中間濃度以進一步研究。需強調(diào)的是：絕不建議不經(jīng)以“循序漸進，而根據(jù)“槽條件”推斷出某濃度便直接擷取（詳見討論5研究時應注意不同來源的表面性劑可能會對試驗結(jié)果帶來顯著性差異情，如十二烷基硫酸鈉(SDS)的使用，現(xiàn)今愈發(fā)傾向在研究時采用市場某一主流品牌（分析級在質(zhì)量標準中注明，以使其后試驗的重現(xiàn)，絕不建議研究時采用市場上多個品牌、在質(zhì)量標準中不注明的作法，費時費力、且導致試驗結(jié)果無法預料。綜上所述若質(zhì)量標準中未制訂轉(zhuǎn)或采用了添加表面活性劑的介質(zhì)就應在研發(fā)資料和起草說明中予以詳盡驗證和闡述。最極端試條件質(zhì)量標準中擬定的最極端條件建議為板法/轉(zhuǎn)出介質(zhì)中加入3.0%表面活性劑。因目前上市的所有原研制劑，皆未有在此條件下沒有一個溶出介質(zhì)達不到85%或）溶7[[5]出量的產(chǎn)品；且在該條件下，如任何一個介質(zhì)中皆未有以上溶出量，亦可推斷該制劑猶如頭般堅硬”如此制劑在人體內(nèi)的生物利用度也就可想而知了，這一點對于創(chuàng)新藥的制劑研發(fā)具有很強的指導意義。溶出介質(zhì)中嚴禁添加有機溶劑因為這將極大地降低體內(nèi)外相關性，嚴重背離溶出度試驗應用理念，是典型的為了溶出合格而設定”的標準同時對于人體而言，是不可能喝2兩白酒再吃藥的。遺憾的是，國內(nèi)的一些質(zhì)量標準仍有這樣的品種存在，值得深思。若確實找不到一個理想溶出條件，說明現(xiàn)今的制劑手段尚無法解決該原料藥的溶解性，尚無法開發(fā)成適合人體吸收的制劑，此時則應果斷、明智地放棄，使之休眠，直至開發(fā)出可解決其生物利用度的輔料。特例pH值特例：鑒于表面活性劑的加入，對于配制和試驗操作皆會帶來極大困難，此時若在pH大8.0的介質(zhì)中（即溶解度顯著提高的pH值）可找到一個較為溫和試驗條件下最終溶出量達85%上則推薦采用該值即便該值已背離人體正常生理值

[5]

美國藥典中“阿維A酸膠囊(AcitretinCapsule)”用“籃法/轉(zhuǎn)pH9.6~10.0緩沖液中加3.0%SLS（十二烷基磺酸鈉）作溶出介質(zhì)，900ml，30鐘，限度”的條件就是出于該考慮。轉(zhuǎn)速特例不推薦采用低于轉(zhuǎn)的條件除非針對特定劑型或特定工藝中國藥典“布洛芬緩釋膠囊”擬定。此時則應格外注意儀器適用性，曾發(fā)現(xiàn)不同儀器間測定結(jié)果存在顯著差異情況（即低轉(zhuǎn)速下顯示出儀器間性能差異性如懸浮劑一般采用～但對于出現(xiàn)錐度堆積的情況，可通過適當增加槳速予以改善。4.5體積選擇統(tǒng)一設定為或1000ml。900ml與人體消化道內(nèi)的體液總體積較為接近，則是為便于計算。其他體積均無必要選擇。至于中國藥典收載的第三法——小杯法，是特定歷史時期產(chǎn)物（當時液相不普及，對于小規(guī)格制劑，即便采用5cm吸收池，仍無法滿足紫外吸收度應達0.2的最低要求，于是在第二法的基礎之上衍生改良而來該法不滿足當初設計溶出儀時所追求的漏槽條件更不符合大杯法所應具有的流體力學特征，故截至目前其他各國藥典均未采用。現(xiàn)今，隨著液相色譜儀在國內(nèi)已完全普及，即便再小規(guī)格，亦可通過各種措施解決準確測定問題，故該法已無必要。因此，即便既有國內(nèi)質(zhì)量標準擬定該法，因原研制劑在研發(fā)和質(zhì)量控制時從未采用過該法，故強烈建議實驗者一律改為大杯法。85.投樣量之前曾有為滿足樣品最低定量限需要，采用一杯內(nèi)投入2片作法，現(xiàn)今采用HPLC法已皆可解決[23]，故投樣原則必須遵循單片樣品方式[。對于多計量的顆粒劑、混懸液、干混懸劑等劑型，可采用一次單位服用量投入。投入方式可采用混勻后立即傾入已標化的有刻度的試管中即刻用滴管加樣品至刻度，傾入溶出杯中，并用溶出杯中液體清洗試管。6.測定法

[無論采用何法檢測，均應牢固樹“發(fā)階段測定法與質(zhì)量標準測定法應區(qū)別對”科學理性理念。6.1研發(fā)時測定法研發(fā)時，溶出測定工作量十分巨大，具不完全統(tǒng)計：速釋制劑仿制藥研發(fā)需測定約500條溶出曲線、緩控釋制劑需測定1000。如采用紫外法測定，就會有因需不斷篩選處方而采用各種/來源輔料對紫外測定干擾的擔憂和為滿足紫外檢測需達吸收度要求、而采取繁瑣稀釋步驟等的顧慮，故強烈建議采用HPLC法。關于如何高效準確、快速便捷地測定大批量溶出度樣品請詳閱參考文獻[23]，如此便可省時省力、事半功倍。目前市售的國“纖全自動測定溶出”將光纖探頭插入溶出杯中直接測得一條完整曲線（可每隔秒測定雖是采用紫外法測定，但由于其數(shù)據(jù)處理程序中已設定了各種校正法去確保排除各種情形的輔料干擾，故值得肯定與推薦。6.2質(zhì)量標準測定質(zhì)量標準檢測僅是一個介質(zhì)、一個時間點、一個限度，工作量很小，故為考慮測定的方便性，在排除輔料干擾的前提下，可考慮采用紫外法測定；但如含量測定為液相，筆者則建議采用液相，尤其是對于膠囊劑、薄膜衣片、腸溶制劑和緩控釋制劑（囊殼、薄膜衣、腸溶衣、緩控釋制劑輔料極易干擾紫外測定）更是如此[。溶出度均值如超出含量2.0%上，則說明有干擾，此時就會造成不合格樣品誤判為合格情況的出現(xiàn)，必須予以查明和更改測定法目前，國內(nèi)出現(xiàn)此種情況的品種愈發(fā)增多，蓋因采用了價廉劣質(zhì)的輔料所致，值得關注和警示。7.復方制劑對于復方制劑，在遵循以上原則基礎上靈活選擇，不必拘泥于采用同一套參數(shù)。可根據(jù)各組分情況，予以針對性擬定

[26]

。測定法首選液相。98.如何正確看待驗證結(jié)與既有量標準根據(jù)以上內(nèi)容——如何制訂溶出度試驗質(zhì)量標準原則，如驗證結(jié)果與既有質(zhì)量標準相符，則可參照采納；如不一致，則應制訂更為科學、合理的溶出度試驗參數(shù)與測定法。擬定者決不能墨守成規(guī)、畫地為牢，在知曉了既有質(zhì)量標準不科學性、不客觀性的前提下，還照搬照抄、以訛傳訛！9.質(zhì)量標準的漸進性與善性應強調(diào)指出的是：任何一個質(zhì)量標準都不是一成不變、不可更改的！研究者可根據(jù)產(chǎn)品在不同階段出現(xiàn)的特性和隨著對該產(chǎn)品研究的不斷深入，對質(zhì)量標準中溶出度試驗條件予以科學、客觀的更改與完善。甚至在使用溶出度試驗進行產(chǎn)品質(zhì)量控制時，亦可根據(jù)不同情形和需要采用不同方法。申報生產(chǎn)時，隨著制劑工藝放大和處方優(yōu)化，更改申報臨床時的溶出度試驗參數(shù)；省級藥檢所擬定藥典或標準轉(zhuǎn)正時針對不同來源樣品定最具區(qū)分力的溶出介質(zhì)；企業(yè)內(nèi)控標準，為保證批間樣品均一性，在完成既有質(zhì)量標準規(guī)定檢測的溶出介質(zhì)后，增加其他更能反映批間樣品波動性的溶出介質(zhì)等等。10.溶出度試驗質(zhì)標準擬理念由于溶出度試驗是口服固體制劑的魂與“核心所在，故如何科學、合理的擬定至關重要。其根本出發(fā)點為：制訂高標準、嚴要求的溶出度試驗質(zhì)量標準來撬動制劑的深入研究，尤其是工藝藥劑學的研究與實踐。我國藥典或國家標準中部分品種出現(xiàn)的“加入有機溶”“150轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速”、加入高濃度表面活性劑等，皆是與以上理念背道而馳的，蓋因這些品種低劣的制劑工藝所致，只好通過放寬溶出度試驗條件來滿足，但此種藥物在人體內(nèi)的生物利用度可想而知了！二、針創(chuàng)新藥

[創(chuàng)新藥質(zhì)量標準中擬定溶出度試驗的主要目的是為避免出現(xiàn)那些生物利用度不佳的處方/工藝制得樣品情況發(fā)生。如主成分在各pH值溶出介質(zhì)中溶解度幾近一致，則體外溶出行為的追求目標一定是各條溶出曲線重合。如主成分在各值溶出介質(zhì)中溶解度相差較大，則體外溶出行為的追求目標應是盡可能“高”低溶解的那條溶出曲線，并力爭使其與其他曲線重合。10[27][27]首先篩選出生產(chǎn)工藝和處方輔料中影響生物特性的若干個關鍵性因（如個因素過正交設計或均勻設計得到數(shù)個處方（如10個小試制得各處方樣品，分別進行體外溶出曲線測定，根據(jù)以上目標推斷出個關鍵性因素的篩選方向，按此方向，再次通過正交設計或均勻設計得到個處方構(gòu)成再次進行溶出曲線測定如此重復下去進行處方研究后應可尋找到在某一介質(zhì)條件下能夠區(qū)分出這些制劑溶出的優(yōu)劣即辨明好中差”三個處方。然后通過動物試驗（可以從小鼠過渡到大鼠，再過度Beagle）驗證這三種處方在動物體內(nèi)生物利用度的差異性，并最好與體外溶出曲線的差異性建議起相關性（兩者可不斷趨同后規(guī)模化生產(chǎn)出最為優(yōu)良處方的制劑進行新藥臨床試驗驗證后按照以上思路制訂該產(chǎn)品質(zhì)量標準中的溶出度試驗參數(shù)即可。三、討1.非值賴型制——美制劑的美表達經(jīng)研究表明：隨年齡增長，人體內(nèi)胃酸分泌逐漸減少，正常人群胃內(nèi)值、十二指腸pH值3.1~6.7、小腸pH值，可謂千變?nèi)f化。一個優(yōu)良制劑，應在人體內(nèi)無論何種值環(huán)境下均有較為相同的釋放行為，從而保證在各種環(huán)境下皆有吸收、皆有目標生物利用度。尤對于緩控釋制劑，由于在體內(nèi)停留時間長途徑各種pH值，更應具備此種“特征體外表現(xiàn)”。這便是制劑研發(fā)人員所應追求的“完美制劑的完美達——外多條溶出/釋放曲線重合”目標，即應盡可能研制出“非pH值依賴型制劑”。雖然這一目標某種程度上受到溶解度或輔料性能影響，但經(jīng)對眾多原研品的測定表明：絕大部分藥物均具有以上這些溶出特征，可見原研品在制劑研發(fā)上的投入與深入，而我國現(xiàn)今已上市的仿制藥在該體外表觀上相差甚遠，其主要差距其實是對工藝藥劑學的認知不足與該方面人才的匱乏。這也為我們指明了努力方向與奮斗目標！2.既有質(zhì)量標準的局限、歷史和利益性2.1國內(nèi)既有質(zhì)量準由于眾多歷史原因和制/審核人員當時認知的局限性，部分品種的質(zhì)量標準是秉承“出度跟著制劑”——即為了讓該品種所有國內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)品均合格；為了找到一個緩控釋條件而體現(xiàn)緩控釋性特性，這樣一個背道而馳的錯誤理念制訂而成。從已發(fā)表的眾多溶出度研究文章和2008年國家藥監(jiān)局開始實施的全國評價性抽驗所進行的探索性研究結(jié)果”中已充分體現(xiàn)，此處不再贅述。2.2英國(BP)/洲藥典(EP)11無論是原料藥還是制劑的有關物質(zhì)檢測，該國藥典均將各雜質(zhì)、色譜條件、系統(tǒng)適用性等關鍵性參數(shù)羅列得清清楚楚、一目了然；但收載的制劑卻很少、口服固體制劑更少，甚至有些難溶性口服固體制劑、緩控釋制劑竟然未制訂溶出度檢測項[28]。蓋因溶出度試驗作為評價口服固體制劑內(nèi)在品質(zhì)優(yōu)良與否的核心指標，不便公開而已，故索性不予登載。2.3日本藥典(JP)表現(xiàn)形式完全同英國/洲藥典即便收載了溶出度試驗項也往往標注為“略”或詳見局外規(guī)”。蓋因日本藥品審評部門和國家藥檢所意識到溶出度試驗重要性后，伴隨1998年開始實施的“藥品品質(zhì)再評價工程”，將溶出度試驗質(zhì)量準單獨匯編成《日本橙皮書稱《局外規(guī)單獨出版。2.4美國藥典(是各國藥典中溶出度試驗最具參考價值的文獻我們亦應了解其產(chǎn)生過程與背景USP一般在該藥品行政保護到期前向原研企業(yè)和各仿制企業(yè)（FDA已批準、尚未上市銷售）發(fā)出邀請函告知將收載該品種，希望各單位提供質(zhì)量標準，當各單位提供的溶出度試驗參數(shù)不同時（仿制藥“殊途同歸”體現(xiàn)USP不予統(tǒng)一、全部登載，因為這些標準均經(jīng)FDA審核通過，產(chǎn)品皆為生物等效，這就是我們有時會看到個別品種會登載數(shù)個溶出度試驗條件的原因所在。一般情況下：TSET1為原研品。如僅登載一個條件，一般也是由原研企業(yè)提供的。然而，即便如此亦不建議制訂者直接擷取，因原研品自上市到專利保護期結(jié)束期間，歷經(jīng)大量的各人群的臨床試驗驗證原研企業(yè)可能仍在不斷針對處方與工藝進行優(yōu)化和完善，且樣品生產(chǎn)規(guī)模也早已遠大于最初臨床申報（質(zhì)量標準是那時產(chǎn)生此有些品種的質(zhì)量標準已不能準確、客觀地反映現(xiàn)今上市品所具有的內(nèi)在優(yōu)良品質(zhì)，故筆者仍是強烈建議參照前述試驗思路——必須購買來現(xiàn)階段上市品進行研判。如“尼莫地平片”，BP和USP皆擬定溶出介質(zhì)中添加0.3%表面活性劑，中國藥典完全相同，可經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)：原研品0.0~0.3%溶出介質(zhì)中，溶出曲線幾乎沒有任何變化（最終溶出量皆達8以上，完全可以不添加國內(nèi)眾多仿制品卻迥然不同：為溶出介質(zhì)時，釋放量很少。這充分啟示我們：對原研品的質(zhì)量評估不能畫地為牢似地照搬照抄既有質(zhì)量標準。2.5《日本橙皮書

日本自1998開始實施“藥品品質(zhì)再評價工程”以來，在《仿制藥生物等效性試驗指導原則不同的口服固體制劑生物等效性試驗指導原則固體制劑處方變更后生物等效性試驗指導原則》和《固體制劑改變劑型后生物等效性試驗指導原則》等一系列指導原則出臺的背景基礎上，開始陸續(xù)出版《日本醫(yī)療用醫(yī)薬品品質(zhì)情報集（即日本橙皮書與參比制劑目錄，官方網(wǎng)址為http://www.jp-orangebook.gr.jp/2010年底，共進行了個12品種的編撰工作，其中詳細羅列了每一品種的“解離常數(shù)”、在4種pH值溶出介質(zhì)中的溶解度”、在各值溶出介質(zhì)中的溶液穩(wěn)定性（“3.采用多條溶出曲線循序漸進剖析原研制劑”項下已述條標準溶出曲線“溶出度試驗質(zhì)量標準，一些品種還“主成分對照品質(zhì)量標準”雜質(zhì)對照品質(zhì)量標準等信息20111月家藥品審評中心組織翻譯了這些品種，并在其官方網(wǎng)站(主頁右側(cè)建立了《日本溶出曲線數(shù)據(jù)庫專欄查詢系統(tǒng)（中文翻譯版[30]。2.6美國FDA公布的“溶出線數(shù)據(jù)”美國（藥品審評中心）屬下的仿制藥辦公室里的生物等效部byDivisionofOfficeofGenericDrugs為提高仿制藥內(nèi)在品質(zhì)、強化各項審評規(guī)范，從2004初開始效仿日本，從多種溶出介質(zhì)中遴選出最能反映內(nèi)在品質(zhì)的一個溶出介質(zhì)匯編成集，登載于該部官方網(wǎng)站：/scripts/cder/dissolution/index.cfm并于每季度更新一次。截止第一季度，已進行了約個品種的披露。列舉如下：Drug

DosageForm

Apparatus

Speed

(mL)

RecommendedSamplingTimes

DateUpdated

Tablet

II(Paddle)

75

HCl9005,10,15,and同時，該部歡迎大家來電來函，對收載的參數(shù)提出異議和修改意見。關于該數(shù)據(jù)庫的說明與答疑內(nèi)容亦十分重要（m讀者自行瀏覽，此處不再贅述。2.7進口質(zhì)量標準由于溶出度試驗的重要性，不排除會有一些企業(yè)故意放寬溶出度試驗參數(shù)，從而確保進口的各批樣品均符合規(guī)定“益性色彩存在”。這實上也對我們的審評員和試驗復核人員的技術水準和專業(yè)把握提出了更高要求。建議仍是秉承以上思路進行研判。3.質(zhì)量標準中可不擬定出度試品種和仿制研發(fā)時申請豁免生等效性驗品口服固體制劑質(zhì)量標準中并非一定要擬定溶出度檢查項原料藥屬于寬治療指數(shù)藥物、并為生物藥劑學分類系統(tǒng)(BCS)第一類藥物—高溶解性、高滲透性，且采用槳板法50轉(zhuǎn)，制劑可在至少四種溶出介質(zhì)中均達30鐘85%以上溶出量時輔料量與主藥量相比未超，輔料中也未加入表面活性劑、甘露醇和山梨醇

（因為這些輔料可造成溶出度試驗對13[24][34][24][34]生物等效預測的誤判時質(zhì)量標準中就可不擬定溶出度檢查僅采用崩解時限予以控制[32]。因為此類制劑在胃（任何pH值崩解吸收已不受胃排空時間的影拉米夫定0.1g規(guī)格）[33]質(zhì)量標準便如此。當原研品屬于此類制劑時，仿制藥研發(fā)亦必須具有以上各特性，此時則可申請豁免生物等效性試驗，不過建議溶出曲線的測定應至少為條。世界衛(wèi)生組織于年11公布了個此類藥物清單，并對每一藥物予以了詳解：對乙酰氨基酚（撲熱息痛酰唑胺、阿昔洛韋、鹽酸阿米替林、阿替洛爾、磷酸氯喹、硫酸氯喹、鹽酸氯喹、西咪替丁、鹽酸環(huán)丙沙星、雙氯芬酸鉀、雙氯芬酸鈉、鹽酸強力霉素、二鹽酸乙胺丁醇、呋塞米、布洛芬、異煙肼、拉米夫定、左氧氟沙星、鹽酸甲氟喹、甲硝唑、鹽酸甲氧氯普胺、強的松龍、強的松、鹽酸普奈洛爾、吡嗪酰胺、硫酸奎納定、鹽酸雷尼替丁、利福平、鹽酸維拉帕米、甲硝唑。藥物滲透性可通過某些網(wǎng)站查詢，如美國口服藥物傳遞研究公司（LaboratoriesInc，簡稱公司）網(wǎng)站就提供該服務，查詢網(wǎng)址為：/resources/services/。4.

溶出儀校正與校正使用現(xiàn)今，各儀器廠商皆已具備對儀器進行機械校正的能力。在這基礎之上，幾乎皆可通過校正片（美/國藥典出品）測試如無法通過，則是溶出杯問題因在手工燒制底部時，無法均一性地制得內(nèi)部完整半球形（燒制厚度不一所致圖所示。此時，需更換溶出杯后再行測試。故建議使用時，安裝位置、槳桿、溶出杯三者皆應統(tǒng)一固定[。圖溶杯部呈不規(guī)則形狀14[36][36]5.

圖俯溶杯底部對漏槽件”的再認知漏漕條件的定義為：溶出介質(zhì)體積應大于溶解藥物主成分（該量為制劑最大規(guī)格量）所需體積的至少倍量，以保證藥物溶出不受其溶解性的顯著影響。該理念是美國學者在設計溶出儀設備、斟酌溶出杯體積時，根據(jù)當時已上市的大部分藥物后設計的折中體積。現(xiàn)今，由于溶出杯體積已固（900~1000ml若以此為出發(fā)點根據(jù)某藥物在某溶出介質(zhì)中的溶解度來推算采“種溶出介”“加多少濃度的表面活性劑，將極大地忽視“物制劑”作用，即是對藥劑——就是改善藥物水難溶性程度”這一概的擯棄。故筆者認為，該理念在現(xiàn)今溶出度試驗應用中已無用武之地。歸根結(jié)底，還是要取原研制劑，采用溶出曲線循序漸進般予以分析和辨明。6.

需擬定出度檢查的型除通常的口服片劑與膠囊劑外，難溶性藥物的顆粒/散劑亦需擬定溶出度檢查項，因為此種劑型同樣存在主成分在體內(nèi)釋放過程于咀嚼片時雖要求“咀嚼后吞下”但考慮到可能有部分患者誤當作普通片故為保證該情況下藥物仍能在體內(nèi)快速崩散溶出，發(fā)揮療效，美國藥典中幾乎所有咀嚼片皆擬定了溶出度檢查[37]，而我國目前尚未制訂，值得借鑒。7.

對質(zhì)量準中溶度試驗所發(fā)作用”的認識質(zhì)量標準中的溶出度試驗，由于僅是一個介質(zhì)、一個時間點、一個限度的擬定。故即便經(jīng)過以上嚴謹、周密、科學、全面的驗證予以了確定，但在全面評價藥物內(nèi)在品質(zhì)上仍會捉襟見肘、以偏概全，尤考證不同來源同一制劑品質(zhì)差異性方面，更顯不足。此時。則強烈推薦進行溶出曲線、乃至多條溶出曲線的測定比對工作。現(xiàn)今，國際衛(wèi)生組織針對不同來源的同一制劑的質(zhì)量監(jiān)測與評價已全面引入此法

[38]

；日本對上市仿制藥的質(zhì)量評價也將溶出度試15驗單列（其他項目仍是由地方藥檢所負責國立醫(yī)藥品食品衛(wèi)生研究所（即國家品檢驗所藥品部親自主持指導如何采用多條溶出曲線評價口服固體制劑內(nèi)在品質(zhì)”工作并《藥品品質(zhì)再評價工程》的實施相輔相成[。我國藥監(jiān)部門每年均要進行大量的市場抽查監(jiān)測檢驗，僅按質(zhì)量標準檢驗往往不能更深層次反映問題存在，故筆者強烈建議引入該套評價體系。自2008年，國家食藥品監(jiān)督管理局開展“國家藥品評價性抽驗工作”以來，已將該理與作法貫徹并實施，取得顯著效果。8.期待與展望制藥行業(yè)作為“高科技行業(yè)”的核心體現(xiàn)就是制劑，具體細化“固體制劑的工業(yè)藥劑學，而該點又是與體外溶出度試驗密不可分、相輔相成的。我們只有把握住這一要點，才四兩撥千斤”般地“一針見血地抓住事物本質(zhì)，進而推動行業(yè)發(fā)展整合與優(yōu)勝劣汰。感謝閱讀此文的讀者，讓我們攜手來夯實國產(chǎn)仿制藥發(fā)展基石，來共同培養(yǎng)國產(chǎn)仿制藥成長土壤。為了國產(chǎn)制“精圖治、殺出重”那一天早日到來，讓我們黽勉同行、砥礪同心！再次感謝您的閱讀！參考文謝沐風改溶出度評價方法，提高固體藥制劑水.中醫(yī)藥工業(yè)雜志謝沐風溶度研究系列（一中藥品標準，謝沐風溶度研究系列（二中藥品標準，2006,1(7):48~51.<1092THEPROCEDURE:ALIDATION>forofSolidProducts和forDissolution/InReleaseofDosage【國際藥學聯(lián)合會InternationalFederation/FIP)頒的口服固體制劑試驗指導原和“新型體外溶出度/放度試驗指導原則】摘自官方網(wǎng)站（PharmaceuticalandtheInterestGroups→Dissolution/Drug）謝沐風溶曲線相似性的評價方法中醫(yī)藥工業(yè)雜志謝沐風、張啟明.國藥政部門采用溶出曲評價口服固體制劑內(nèi)在品質(zhì)的情況簡中藥事，謝沐風提質(zhì)量標準促進品質(zhì)提升帶行業(yè)發(fā)展—議如何促進國產(chǎn)藥品的質(zhì)量中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2007,11(38):王亞敏淺溶出度檢查方法的建立摘國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心網(wǎng)16→電刊物20071130淺溶出度檢查方法的建立】李廣領，張育平等水酸紫可見分光光度法測定.河南科技學院學報（自然科學版）樊志順，李勤朗用PH分原理PKA值臨床用藥問題的討論分析實醫(yī)技雜志1996,2(3)晁若冰，伍朝員，賀曉英弱弱堿性藥物PKA值分光光度測定法華西藥學雜志張啟明、謝沐風.采多條溶出曲線評價口固體制劑的內(nèi)在質(zhì)量中國藥工業(yè)雜志，青柳伸男.日薬局方溶出規(guī)格の設定方針について獨立行政法-醫(yī)薬品醫(yī)療機器総合機構(gòu)(http://www.pmda.go.jp)→日薬局方→技術情報【摘自日本國厚生省國家藥品審評中心網(wǎng)站→日本藥典技情報如何制溶出度試驗質(zhì)量標準/柳伸男撰寫】用于艾滋病、瘧疾和結(jié)核治療的多來源（仿制）制(FPPs)預認證文件提交指導原則（補充）摘世界衛(wèi)生組織網(wǎng)站【ProgrammesandprojectsPrequalificationMedicinesProgramme→點中文”→點繼”→點仿藥(Generics)→點補1】英國藥典年版17.鄭鋼化藥品普通口服固體制劑溶出度方法驗證易忽視的幾個問國藥品審評中-電子刊物-化藥藥物評價-化藥質(zhì)量控制編20071106唐素芳化藥品溶出度方法研究摘自國食