題 目計數培養基適用性驗證方案方案號版本號01

批準頁起草人審核人簽字日期QC經理批準人簽字日期QA經理驗證目的參照標準驗證工程驗證人員及職責判定標準實驗材料菌液制備菌液計數適用性檢查陰性對照附件1.檢測記錄1.驗證目的純化水微生物計數用的培養基應進展培養基的適用性檢查。本次驗證的目的是確認R2A培養基適合純化水中總需氧菌總數測定。參照標準2015版中國藥典二部1105微生物限度檢查法。驗證工程R2A培養基的適用性檢查。驗證小組人員及職責：驗證小組人員:小組人員職務姓名所在部門組長質量部組員質量部組員質量部驗證人員職責及要求按驗證方案及相關文件實施驗證。認真觀察并做好驗證原始記錄。對實施驗證的結果負責。驗證中各部門的職責驗證領導組職責制訂驗證總方案，負責全公司驗證工作的管理確定驗證工程及驗證工程負責人。負責驗證方案的批準工作。負責驗證資料及結果的審核工作。負責驗證報告的批準工作。驗證工作小組職責負責驗證方案的起草工作。參與驗證方案的討論、確認工作。負責驗證方案的實施。負責驗證結果的分析、統計、報告工作。參與驗證結果的評價工作。4.3.3質量部職責負責公司驗證日常管理工作。負責驗證方案的審核工作。負責驗證過程中儀器、儀表、計量器具的校驗工作。負責檢驗儀器及檢驗方法的驗證。負責驗證中各項檢測工作，提供驗證的檢驗記錄、檢驗報告，對驗證過程中的各項檢驗工作負責。負責對驗證人員的培訓、考核工作。負責驗證資料和報告的審核工作。負責驗證文件回收、歸檔管理工作。判定標準被檢培養基上的菌落平均數與對照培養基上的菌落平均數的比值應在0.5-2的圍，且菌落形態大小與對照培養基上的菌落一致。試驗材料6.1被驗證產品：R2A瓊脂培養基6.2儀器設備6.2.1壓力蒸汽滅菌器6.2.2HF1200LC型生物平安柜DNP-9160BS型培養箱DHG90型鼓風枯燥箱微波爐6.3.驗證用培養基名稱生產廠家批號R2A瓊脂培養基6.4.驗證用菌株：（第代）試驗菌株增菌培養基培養溫度培養時間枯草芽孢桿菌胰酪大豆胨液體培養基30—35C18-24h銅綠假單胞菌胰酪大豆胨液體培養基23—28C18-24h菌液制備分別取銅綠假胞桿菌、與枯草芽孢桿菌的新鮮培養物至胰酪大豆胨液體培養基中，于30?35°C培養不超過18-24h。取經30?35°C培養18-24h的銅綠假單胞菌、與枯草芽孢桿菌的新鮮培養物1ml參加到9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，倍稀釋獲得約為50?100cfu/ml的菌懸液備用。菌液計數：〔每種菌液接種2個平皿〕分別取銅綠假單胞菌與枯草芽孢桿菌菌懸液1ml分別注入無菌平皿中，立即傾注R2A瓊脂培養基，每株試驗菌平行制備2個平皿，置30?35C培養不少于5天；菌落計數結果〔2個平皿計數取平均值〕見下表菌落計數結果〔cfu/ml〕試驗次數10-5稀釋10-6稀釋10-7稀釋12平均值12平均值12平均值枯草芽孢桿菌銅綠假單胞菌適用性檢查分別取銅綠假單胞菌與枯草芽孢桿菌菌懸液1ml分別注入無菌平皿中，立即傾注R2A瓊脂對照培養基，每株試驗菌平行制備2個平皿，置30?35°C培養不不少于5天；菌落計數結果〔2個平皿計數取平均值〕見下表菌落計數結果〔cfu/ml〕試驗次數10-5稀釋10-6稀釋10-7稀釋12平均值12平均值12平均值枯草芽孢桿菌銅綠假單胞菌陰性對照為確認試驗條件是否符合要求，應進展陰性對照試驗，陰性對照試驗應無菌生長如陰性對照有菌生長，應進展偏差調查。附表1：計數培養基適用性檢查驗證記錄試驗時間年月日 完成時間年月日

驗證菌株平皿號供試品組cfu/ml對照培養基組cfu/ml菌落比值枯草芽孢桿菌（培養5/r/