1、 第 頁 共 6 頁培養基管理規程目的規范微生物實驗室培養基的申購、配制、培養基質量控制、儲存、使用、廢棄處理等。依據藥品質量管理規范、中國藥典2015年版 四部。范圍適用于微生物實驗室檢驗用的所有培養基。職責化驗室負責人：監督本規程的實施。化驗室檢驗員：按照本規程實施。工具定義培養基系指用人工方法將多種物質按各種微生物生長繁殖的需要配制成的一種混合營養物，用于微生物限度檢查、控制菌檢查等。干粉培養基指以干粉形式存在的培養基。內容培養基的購買培養基管理員每月清點干粉培養基的庫存量，及時申請購買培養基，以保證實驗的正常進行。新購進的干粉培養基由培養基管理員驗收。驗收內容包括：培養基質量檢驗報告書

2、、數量，批號、廠家、有效期、包裝情況（應包裝完整、容器密閉）。若發現包裝不完整、不密閉、培養基受潮或物理性狀發生了明顯改變等應拒絕接收。驗收合格后填寫培養基接收記錄，在培養基外部加貼干粉培養基標簽，填寫內容為：名稱、接收日期、批號、有效期至、儲存條件。若干粉培養基瓶身上已標注以上信息，則不用加貼干粉培養基標簽。培養基的使用培養基的適用性檢查新購進的每批培養基均應進行適用性檢查。隨機抽取相同批號的干粉培養基1瓶，按照要求配制后，進行適用性檢查。培養基的適用性檢查可在供試品檢查前或與供試品檢查同時進行。進行培養基適用性檢查應填寫，計數用培養基適用性檢查記錄和控制菌檢查用培養基適用性檢查記錄。計數培

3、養基適用性檢查所用菌種及培養條件見下表培養基菌種培養條件胰酪大豆胨瓊脂培養基金黃色葡萄球菌3035 48小時銅綠假單胞菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌3035 72小時黑曲霉沙氏葡萄糖瓊脂培養基白色念珠菌2025 72小時黑曲霉R2A瓊脂培養基銅綠假單胞菌3035 48小時枯草芽孢桿菌試驗菌接種量為50100cfu，每株試驗菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，培養，計數。判斷標準用相應的對照培養基替代被檢培養基進行上述試驗。被檢培養基上的菌落平均數與對照培養基上的菌落平均數的比值應在0.52范圍內，且菌落形態大小與對照培養基上的菌落形態一致，則可判培養基的適用性符合規定。反之適用性檢查不合格，不能使用。控

4、制菌檢查用培養基適用性檢查用于不同檢驗的培養基的促生長能力檢查、抑制能力檢查和指示特性檢查所用菌種及培養條件見下表。控制菌檢查培養基特征試驗菌株耐膽鹽革蘭陰性菌腸道菌增菌液體培養基紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基促生長能力抑制能力促生長能力+指示特性大腸埃希菌、銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌大腸埃希菌、銅綠假單胞菌大腸埃希菌麥康凱液體培養基麥康凱瓊脂培養基促生長能力抑制能力促生長能力+指示特性大腸埃希菌金黃色葡萄球菌大腸埃希菌沙門菌RV沙門菌增菌液體培養基木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養基三糖鐵瓊脂培養基促生長能力抑制能力促生長能力+指示特性指示能力乙型副傷寒沙門菌金黃色葡萄球菌乙型副傷寒沙門菌乙型副傷寒沙門

5、菌銅綠假單胞菌溴化十六烷基三甲基銨瓊脂培養基促生長能力抑制能力銅綠假單胞菌大腸埃希菌金黃色葡萄球菌甘露醇氯化鈉瓊脂培養基促生長能力+指示特性抑制能力金黃色葡萄球菌大腸埃希菌白色念珠菌沙氏葡萄糖液體培養基沙氏葡萄糖瓊脂培養基念珠菌顯色培養基促生長能力促生長能力+指示特性促生長能力+指示能力抑制能力白色念珠菌白色念珠菌白色念珠菌大腸埃希菌促生長能力檢查液體培養基促生長能力檢查 分別接種不大于100cfu的試驗菌于被檢培養基和對照培養基中，在相應控制菌檢查規定的培養溫度及不大于規定的最短培養時間下培養，與對照培養管比較，被檢培養基管試驗菌應生長良好。固體培養基促生長能力檢查 分別接種不大于100cf

6、u的試驗菌于被檢培養基和對照培養基平板上，在相應控制菌檢查規定的培養溫度及不大于規定的最短培養時間下培養。被檢培養基與對照培養基生長的的菌落大小、形態特征應一致。指示特性檢查分別接種不大于100cfu的試驗菌于被檢培養基和對照培養基平板上，在相應控制菌檢查規定的培養溫度及不大于規定的最短培養時間下培養。被檢培養基上試驗菌生長的的菌落大小、形態特征、指示劑反應情況等應與對照培養基一致抑制能力檢查 接種不少于100cfu的試驗菌于被檢培養基和對照培養基中，在相應控制菌檢查規定的培養溫度及不小于規定的最長培養時間下培養，試驗菌株應不得生長。胰酪大豆胨液體培養基適用性檢查分別接種不大于100cfu的銅

7、假單孢菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、沙門菌的菌液于被檢培養基和對照培養基中，在3035培養18小時。與對照培養管比較，被檢培養基管試驗菌應生長良好。干粉培養基的領用干粉培養基的領用實行先進先出，近效期先出的原則，領用培養基應及時填寫干粉培養基臺帳。干粉培養基開封后應及時完善標簽上的開封日期、開封人、開封效期至等內容。培養基配制干粉培養基應在配制使用前觀察其性狀是否發生改變，如發現變色、結塊應立即棄去不再使用。開封的干粉培養基可通過粉末的流動性、均勻性、結塊情況和色澤變化等判斷干粉培養基的質量變化。配制時應按說明書上的要求操作，以確保培養基的質量符合要求。配制培養基的溶劑除另有規定外用純化水配

8、制。配制時若需要加熱助溶，應注意不得過度加熱，以免培養基顏色加深或使培養基失效，如需要添加其它組分，加入后應充分混勻。干粉培養基溶解后根據需要可以用20%HCl或20%NaOH調節至規定的pH值。配制好的培養基應按照說明書上的參數進行滅菌。每批配制的培養基滅菌后應測試pH值(冷卻至室溫25測定)。培養基配制后及時填寫培養基、稀釋液配制滅菌使用記錄，并在2h內滅菌，以避免微生物繁殖，消耗培養基的營養成分。配制好的培養基要求透明，無沉淀。如產生沉淀，應溶化后趁熱過濾。配制后培養基的批號管理培養基的批號由培養基配制當天的年月日組成，年份取后2位，月和日不足2位時，分別在數字前加0，如2018年03月

9、03日配制的培養基，其批號應為180303。配制后培養基的使用領用配制好的培養基時應及時填寫培養基、稀釋液配制滅菌使用記錄。使用前，須仔細檢查培養基外觀和效期，如發現失水、沉淀、被污染、瓶塞松動等異常情況，則立即棄去，不得再用。固體培養基滅菌后的再融化只允許1次，以避免因過度受熱降低培養基質量或被微生物污染。開啟后應在一次實驗中使用，剩余培養基應棄去，不得再用。溶化后的固體培養基可置5060保溫，但不得超過8小時。傾注培養基時應擦干培養基容器表面的水分，以避免容器外壁的水滴進入培養基中造成污染。微生物限度檢查用培養基應在環境潔凈度C級下的局部潔凈度A級的單向流空氣區域內開蓋使用。培養基的貯藏新購進未開瓶的干粉培養基按說明書上的儲存條件儲存。開瓶后的干粉培養基應在標示的儲存條件下保存，自開瓶之日起，有效期為一年，但不得超過自身的有效期。配制好的培養基應及時附上培養