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1、 本技術說明為使用 RNAscope 檢測試劑盒檢測外周血單核細胞(PBMC) 試 本技術說明為使用 RNAscope 檢測試劑盒檢測外周血單核細胞(PBMC) 試Aldrich)、SuperFrost plus 載玻片(Fisher) 和PBMC固定液(10%NBF)nical-user-安全說明書(SDS),第 PBMC收8.上下10 次重懸細胞團,將細胞懸液轉移試劑準個新的 15 mL1.3mLHistopaque1077(或其Ficoll 溶液15mL離心管中,溶液溫度升至室溫(8:)15mL2.通過將50CellPrep 細液(儲備在 20冷凍保存)1PBSPBS5ml50mL10.
2、室溫250RCF 分鐘(制動)11. 在不碰到細胞團的前提下吸出上清液,留下盡PBMC純5mL液15mL心管中室溫下用水平轉子(頭端搖動式)800RCF心 分鐘(使用最小的加制動)4.用移液器或吸取裝50mL5.1mLPBMC6.室溫250RCF 分鐘(制動)離心 分鐘收集細胞3.800RCF 分鐘室溫下空氣干燥載玻片 分鐘50%室溫孵育 分鐘去掉50%離心 分鐘收集細胞3.800RCF 分鐘室溫下空氣干燥載玻片 分鐘50%室溫孵育 分鐘去掉50%70%室溫孵育 分鐘去掉70%100%室溫孵育 分鐘100%醇,用新100%醇代替,室溫孵育 分鐘。3.40mL1PBS懸細胞,然后在室溫下以RCF
3、離心4. 在不碰到細胞團的前提下吸去上清,留下盡可能注:載玻片可以于 20 ) 100%至 個月1.5mLPBMC定液重懸細胞,輕輕地上下吹10 次完全吹散細胞團2.37水浴鍋中孵育 小時第 部分:84YIUVK HybEZ雜交爐40C1.250RCF 分鐘2. 吸去上清液,不要攪動細胞團10mLPBMC洗滌液重懸細胞,250RCF離 10mLPBMC保存液(70%EtOH)重懸細胞上下吹吸 10 次完全吹散細胞團100%37干燥 分鐘Immedge2-4 次。讓疏水圈完全干透 1 分鐘5.室溫下孵育 分鐘4)可保存 天1.用PBMC液調整1106/mL Hettich 細胞甩片機。如果使用其
4、他細胞離心系HybEZ加 2-4 滴蛋白酶 III。使用足夠的溶液重要提示 RNAscope 320293)RNAscope nical-2(細manualsHybEZ雜交爐40C下孵育 分鐘HybEZ加 2-4 滴蛋白酶 III。使用足夠的溶液重要提示 RNAscope 320293)RNAscope nical-2(細manualsHybEZ雜交爐40C下孵育 分鐘:白酶 III(每次一片)。不得使樣本變干。1PBS1PBS1PBS,室溫分鐘84YIUVK 技術開啟揭示 RNASCOPE 2.5ASSAY- 用戶手冊, 了解限制使用證或免責信息。Advanced Diagnostics,Inc保留在任何時候改變其產品和服務的權利來配合技術發展。本手冊可變更,恕不另行通知。雖然這本手冊已經做好
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