1、 食品安全國家標準食品中丙二醛的測定1 范圍本標準規(guī)定了食品中丙二醛的測定方法。本標準第一法適用于食品中丙二醛的測定。本標準第二法適用于動植物油脂中丙二醛的測定。第一法 高效液相色譜法2 原理試樣先用酸液提取，再將提取液與硫代巴比妥酸（TBA）作用生成有色化合物，采用高效液相色譜-二極管陣列檢測器測定，外標法定量。 試劑和材料注1：除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的一級水。3.1 甲醇，色譜純。3.2 乙酸銨溶液（0.01mol/L）：稱取0.77g乙酸銨，加水溶解，定容至1000 mL，經(jīng)0.45m過濾器過濾。3.3 三氯乙酸，C2HCl3O2。3.4 乙二

2、胺四乙酸二鈉，C10H14N2Na2O82H2O。3.5 硫代巴比妥酸（TBA），C4H4N2O2S，生化試劑。3.6 1，1，3，3-四乙氧基丙烷，C11H24O4：97%，CAS號：122-31-6。3.7 三氯乙酸混合液：準確稱取37.50g（精確至0.01g）三氯乙酸（4.3）及0.50g（精確至0.01g）乙二胺四乙酸二鈉（4.4），用水溶解，稀釋至500 mL。3.8 硫代巴比妥酸（TBA）水溶液: 準確稱取0.288g（精確至0.002g）硫代巴比妥酸（4.5）溶于水中，并稀釋至100mL（如不易溶解，可加熱超聲至全部溶解，冷卻后定容至100mL），相當于0.02mol/L。3.

3、9 丙二醛標準儲備液（100 g/mL）：準確移取0.315g（精確至0.002g）1，1，3，3-四乙氧基丙烷（4.6）至100mL容量瓶中，用水溶解后稀釋至100mL，置于冰箱4儲存。有效期3個月。3.10 丙二醛標準使用溶液（1 g/mL）：準確移取丙二醛標準儲備液（4.9）1.0mL，用三氯乙酸混合液（4.7）稀釋至100mL，置于冰箱4儲存。有效期2周。3.11 丙二醛標準系列溶液：準確移取丙二醛標準使用液0.10mL、0.50mL、1.0mL、1.5mL、2.5mL于10mL容量瓶中，加三氯乙酸混合液（4.7）定容至刻度，該標準溶液系列濃度為0.01g/mL，0.05g/mL，0.

4、10g/mL，0.15g/mL，0.25g/mL，現(xiàn)配現(xiàn)用。4 儀器和設備4.1 高效液相色譜：配有二極管陣列檢測器。4.2 天平：感量為1 mg。4.3 恒溫震蕩器。4.4 恒溫水浴鍋。4.5 水相針式濾器，0.22m聚醚砜濾膜。5 分析步驟5.1 試樣制備5.1.1 提取稱取粉碎均勻的樣品5g（精確至0.01g），置入100 mL具塞三角瓶中，準確加入50mL三氯乙酸混合液（4.7），搖勻，加塞密封，置于恒溫震蕩器（5.3）上50振搖30min，取出，冷卻至室溫，用雙層定量慢速濾紙過濾，棄去初濾液，續(xù)濾液備用。5.1.2 衍生化準確移取上述濾液和標準系列溶液（4.11）各5mL分別置于25

5、mL具塞比色管內(nèi)，加入5mL硫代巴比妥酸（TBA）水溶液（4.8），加塞，混勻，置于90水浴內(nèi)反應30min，取出，冷卻至室溫，取適量上層清液過濾膜上機分析。5.2 液相色譜參考條件色譜柱：C18柱，柱長150mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5m，或性能相當者；流動相：0.01mol/L乙酸銨:甲醇=70:30（體積比）；柱溫：30；流速：1.0mL/min；進樣量：10L；檢測波長：532nm。5.3 測定分別吸取上述標準系列工作液和待測試樣的衍生溶液注入高效液相色譜儀中，測定相應的峰面積，以標準工作液的濃度為橫坐標，以峰面積響應值為縱坐標，繪制標準曲線。根據(jù)標準曲線得到待測液中丙二醛的濃度，丙二

6、醛標準品的液相色譜圖參見附錄A。6 分析結(jié)果的表述結(jié)果按式（1）計算： X = （1）式中：X試樣中丙二醛含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；c從標準系列曲線中得到的試樣溶液中丙二醛的濃度，單位為微克每毫升（g/mL）；V試樣溶液定容體積，單位為毫升（mL）；m最終試樣溶液所代表的試樣質(zhì)量，單位為克（g）。計算結(jié)果以重復性條件下獲得的兩次獨立測XX果的算術(shù)平均值表示，保留2位有效數(shù)字。7 重復性在重復性條件下獲得的兩次獨立測XX果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。第二法 分光光度法8 原理丙二醛經(jīng)三氯乙酸溶液提取后，與硫代巴比妥酸（TBA）作用生成粉紅色化合物，測定其在532nm波長處的

7、吸光度值，與標準系列比較定量。9 試劑和材料注2：除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的一級水。9.1 三氯乙酸，C2HCl3O2。9.2 乙二胺四乙酸二鈉，C10H14N2Na2O82H2O。9.3 硫代巴比妥酸（TBA），C4H4N2O2S，生化試劑。9.4 1，1，3，3-四乙氧基丙烷，C11H24O4：97%，CAS號：122-31-6。9.5 三氯乙酸混合液：準確稱取37.50g（精確至0.01g）三氯乙酸（10.1）及0.50g（精確至0.01g）乙二胺四乙酸二鈉（10.2），用水溶解，稀釋至500 mL。9.6 硫代巴比妥酸（TBA）水溶液: 準確稱

8、取0.288g（精確至0.002g）硫代巴比妥酸（10.3）溶于水中，并稀釋至100mL（如不易溶解，可加熱超聲至全部溶解，冷卻后定容至100mL），相當于0.02mol/L。9.7 丙二醛標準儲備液（100 g/mL）：準確移取0.315g（精確至0.002g）1，1，3，3-四乙氧基丙烷（10.4）至100mL容量瓶中，用水溶解后稀釋至100mL，置于冰箱4儲存。有效期3個月。9.8 丙二醛標準使用溶液（1 g/mL）：準確移取丙二醛標準儲備液（10.7）1.0mL，用三氯乙酸混合液（10.5）稀釋至100mL，置于冰箱4儲存。有效期2周。9.9 丙二醛標準系列溶液：準確移取丙二醛標準使用

9、液0.10mL、0.50mL、1.0mL、1.5mL、2.5mL于10mL容量瓶中，加三氯乙酸混合液（10.5）定容至刻度，該標準溶液系列濃度為0.01g/mL，0.05g/mL，0.10g/mL，0.15g/mL，0.25g/mL，現(xiàn)配現(xiàn)用。10 儀器和設備10.1 分光光度計。10.2 天平：感量為1 mg。10.3 恒溫震蕩器。10.4 恒溫水浴鍋。11 分析步驟11.1 試樣制備 稱取粉碎均勻的樣品5g（精確到0.01g）置入100 mL具塞三角瓶中，準確加入50mL三氯乙酸混合液（10.5），搖勻，加塞密封，置于恒溫震蕩器（11.3）上50振搖30min，取出，冷卻至室溫，用雙層定量

10、慢速濾紙過濾，棄去初濾液，續(xù)濾液備用。準確移取上述濾液和標準系列溶液各5mL分別置于25mL具塞比色管內(nèi)，另取5mL三氯乙酸混合液（10.5）作為樣品空白，分別加入5mL硫代巴比妥酸（TBA）水溶液（10.6），加塞，混勻，置于90水浴內(nèi)反應30min，取出，冷卻至室溫。11.2 測定以樣品空白調(diào)節(jié)零點，于532nm處1cm光徑測定樣品溶液和標準系列溶液的吸光度值，以標準系列溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制標準曲線。12 分析結(jié)果的表述試樣中丙二醛含量按照（2）式計算：X = （2）式中：X試樣中丙二醛含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；c從標準系列曲線中得到的試樣溶液中丙二醛的濃度，單位為微克每毫升（g/mL）；V試樣溶液定容體積，單位為毫升（mL）；m最終試樣溶液所代表的試樣質(zhì)量，單位為克（g）。1000單位轉(zhuǎn)換計算結(jié)果以重復性條件下獲得的兩次獨立測XX果的算術(shù)平均值表示，保留2位有效數(shù)字。13 重復性在重復性條件