1、環(huán)境生物學試驗一生物顯微鏡使用和細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)觀測 第1頁第1頁實驗?zāi)?. 理解普通光學顯微鏡結(jié)構(gòu)和各部分性能，并掌握正確使用及維護辦法。2. 在顯微鏡下觀測植物和動物細胞,理解動物細胞與植物細胞結(jié)構(gòu)異同點。3. 掌握生物繪圖法。4. 理解細胞是生命體結(jié)構(gòu)與生命活動基本單位。第2頁第2頁顯微鏡基本結(jié)構(gòu)機械部分鏡座 鏡柱 鏡臂 鏡筒 載物臺 轉(zhuǎn)換器 調(diào)焦器 聚光器調(diào)整螺旋光學部分物鏡 目鏡 聚光器 反光鏡 內(nèi)光源照明系統(tǒng) 第3頁第3頁顯微鏡使用環(huán)節(jié)： （1）取、放顯微鏡正確做法 一手握鏡臂，一手托鏡座托在胸前。放在距離桌邊5-10cm左右為好。（2）對光 先將低倍物鏡對準通光孔，調(diào)整反光鏡（外光源

2、顯微鏡）或電源電壓，使視野中光線明亮而不耀眼。（3）放置標本 將玻片中有標本地方移到通光孔中央。第4頁第4頁顯微鏡使用環(huán)節(jié)： （4）調(diào)焦點 慢慢轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋，從側(cè)面注視使物鏡與玻片靠近工作距離5mm左右。（5）使用低倍鏡觀測 移動標本，找到需要觀測位置。用細準焦螺旋調(diào)清楚物像。（6）使用高倍鏡觀測 將高倍鏡換入，然后用細準焦螺旋調(diào)清楚物像。第5頁第5頁（7）使用油鏡觀測 在觀測線粒體、細菌等細小結(jié)構(gòu)時需要使用100倍物鏡。100倍物鏡需要在油介質(zhì)中工作，故稱油鏡或油浸物鏡。油鏡需在物鏡與標本之間充上一個折光率與玻璃同樣高介質(zhì)。通常使用香柏油，才干使物像清楚。（8）使用油鏡辦法 先低倍，后高倍

3、，再用油鏡。用油鏡前要將觀測對象移到視野中央，移開高倍物鏡，將香柏油滴在標本蓋玻片上，直接換入油鏡，使鏡頭浸在油中。轉(zhuǎn)動細準焦螺旋，調(diào)整焦點，使物像清楚。（9）觀測后用“顯微鏡保養(yǎng)”中簡介辦法及時清除鏡頭上香柏油。第6頁第6頁需要注意幾種問題一、正確使用準焦螺旋問題 試驗中極易出現(xiàn)下列錯誤:（1） 不通過低倍鏡，直接在高倍鏡下調(diào)焦；（2）在高倍鏡下用粗準焦螺旋調(diào)焦，且轉(zhuǎn)動速度不久；（3）無論載物臺上升或下降，眼睛始終在往目鏡中看視野。 調(diào)整焦距一定要在低倍鏡下調(diào)，先轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋，物鏡靠近載玻片，當視野中出現(xiàn)模糊物像時，就要換用細準焦螺旋調(diào)整，縮小尋找范圍，提升找到物像速度。 第7頁第7頁二、

4、物鏡轉(zhuǎn)換問題 使用低倍鏡后換用高倍鏡，往往喜歡用手指直接推轉(zhuǎn)物鏡，這樣容易使物鏡光軸發(fā)生偏斜，原因是轉(zhuǎn)換器材料質(zhì)地較軟，精度較高，螺紋受力不均勻很容易松脫。一旦螺紋破壞，整個轉(zhuǎn)換器就會報廢。 手握轉(zhuǎn)換器下層轉(zhuǎn)動板轉(zhuǎn)換物鏡。 三、正確用眼問題 用顯微鏡觀測物體時，應(yīng)雙眼同時睜開，左眼往目鏡內(nèi)注視，右眼試圖向視野內(nèi)注視，如此重復訓練，就會達到雙眼同時睜開觀測要求。 第8頁第8頁四、使用結(jié)束后顯微鏡復原 顯微鏡使用完畢,關(guān)閉電源,拔下插頭；將物鏡鏡頭轉(zhuǎn)開,取下玻片,擦凈載物臺和物鏡,調(diào)動粗準焦螺旋,將載物臺下降至最低點,將各部分還原。罩上防塵罩。五、顯微鏡保養(yǎng)（1）注意防潮； （2）保持清潔,注意防

5、塵(鏡頭清潔辦法)； （3）預防酸堿等腐蝕性液體玷污顯微鏡,在觀測暫時裝片時,預防里面液體流出。第9頁第9頁試驗內(nèi)容1. 動物細胞結(jié)構(gòu)觀測（1）人口腔粘膜細胞涂片標本制備 吸取醋酸洋紅或碘液，滴一滴在一潔凈載玻片中央，將消毒牙簽粗一端伸入口腔，在口腔頰內(nèi)壁上輕輕刮取粘膜上皮細胞，將刮下白色粘性物質(zhì)放入載玻片上染液內(nèi)，分散均勻。染色5-10 min后,加蓋蓋玻片（細節(jié)）。第10頁第10頁（2）觀測 將制備好裝片標本置顯微鏡下觀測： 先用低倍鏡觀測，可見人口腔粘膜上皮細胞呈扁圓形或扁平多邊形。再尋找較分散、輪廓清楚單個細胞，移至視野中央轉(zhuǎn)高倍鏡觀測； 在高倍鏡下觀測結(jié)構(gòu): 細胞膜，細胞核，細胞質(zhì)。

6、第11頁第11頁2、植物細胞結(jié)構(gòu)觀測（1）暫時裝片制作 取一潔凈載玻片，滴一滴碘液在玻片中央。用尖頭鑷子從洋蔥肉質(zhì)鱗片內(nèi)表面撕下一小塊膜質(zhì)表皮，平鋪在載玻片碘液滴上，用鑷子將其輕輕壓入液滴中，使之展開，蓋上蓋玻片，用吸水紙吸去蓋玻片周圍多出碘液。洋蔥鱗片表皮細胞暫時裝片標本制備與觀測。第12頁第12頁第13頁第13頁（2）觀測 將制備好裝片標本置顯微鏡下觀測：先用低倍鏡觀測，可見許多長柱狀細胞排列整潔，彼此相連。選擇其中一個較典型細胞移至視野中央，再轉(zhuǎn)高倍鏡觀測，在高倍鏡下可見細胞最外面為一層棕黃色較厚結(jié)構(gòu)，即細胞壁。細胞壁以內(nèi)是著色較淺近于透明細胞質(zhì)，細胞質(zhì)內(nèi)有一個或幾種或大或小透明液泡，在

7、細胞中央或靠近細胞壁，有一個橢圓形細胞核，調(diào)整細調(diào)螺旋，可見核內(nèi)有1-2個染成棕黃色，折光較強核仁，細胞質(zhì)外圍有一薄層細胞質(zhì)膜，但在光鏡下不易分辨。第14頁第14頁 第15頁第15頁紅辣椒表皮細胞觀測（1）暫時裝片制作 剪取一小片辣椒，用解剖刀切去肉質(zhì)部分，然后用刀片輕刮，將肉質(zhì)部分所有刮去，只剩余一層表皮。然后，用鑷子將表皮放在載玻片上，加上一滴水，蓋上蓋玻片。（2）觀測先在低倍鏡下找到標本，然后按照上面辦法，逐步增長放大倍數(shù)并調(diào)整粗、細調(diào)焦螺旋直到看到清楚圖像。觀測細胞形態(tài)，注意是否能看到胞間連絲。第16頁第16頁第17頁第17頁第18頁第18頁體視顯微鏡又稱實體顯微鏡或解剖鏡。觀測是標本表面，有很強立體感。第19頁第19頁試驗匯報試驗?zāi)康脑囼灢牧显囼炘噭┖推餍翟囼瀮?nèi)容（顯微鏡使用和細胞結(jié)構(gòu)觀測）試驗結(jié)果(繪制人口腔黏膜細胞和洋蔥鱗片表皮細胞)思考題第20頁第20頁生物繪圖注意事項繪圖時使用鉛筆(HB)在圖正下方表明圖題圖注用直線引出標注結(jié)構(gòu)名稱,而且注字最好在圖右側(cè)或兩側(cè)排成豎行,上下盡也許對齊;引出直線間不可交叉畫圖時要線條流暢勻稱染色深淺不同地方用點疏密不同來表示,不可用陰影表示圖中點要垂直點下去,不可拖尾,帶勾第21頁第21頁